DNA浓度鉴定纯度鉴定方法有哪些
紫外分光光度计定量。
方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒，紫外分光光度计定量后，根据重组质粒分子量计算其拷贝数，稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品，取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝/μl高中低3个浓度的标准品，反复冻融1、6、11、15次和21次后，以冻融后的质粒标准品为模板同时进行real-time PCR扩增定量，比较量值变化。
高中值稳定，低浓度波动相对较大，高浓度质粒最大变化量为0.06个数量级；中浓度质粒最大变化量为0.18个数量级；低浓度质粒最大变化量为0.34个数量级。
扩展资料：
质粒DNA提取的要求规定：
1、以CaCl2沉淀法去除大分子RNA，Q-Sepharose和SOURCE两步离子交换层析法去除染色体DNA、小分子RNA、蛋白质等杂质。
2、有效去除质粒DNA制备过程中产生的杂质,可应用于药剂水平质粒DNA的制备。
3、L.P.Elwell的实验条件稍作改进，温和地制备清亮裂解液并抽提质粒DNA，应用Sephacryl S-1000作凝胶过滤，获得了纯度高、产量大，无染色体DNA。
参考资料来源：中国知网-反复冻融质粒标准品对荧光实时定量PCR实验的
可以通过紫外吸收检测。
因为核酸的最大吸收波长为260nm，蛋白质为280nm，在波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，单链寡核苷酸的含量为30μg/ml，可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD值的比值，估计核酸的纯度。
纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。
270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。
扩展资料：
在判断过程中，也有可能出现质粒DNA提取纯度失败的情况，具体可能是有以下几个原因：
1、菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当；
2、混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染；
3、Rnase失活,可能带来RNA污染；
4、离心不充分（有絮状物在上层）,或在离心后吸取上清时,将沉淀吸入,会带来蛋白质污染.
参考资料来源：百度百科——质粒DNA纯化
将待测DNA溶液作适当稀释,选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算DNA浓度.
DNA浓度（ng /µL）=OD260×50×稀释倍数
当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高
当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高
当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯
你是刚刚入学的研究生，还是只是有兴趣了解一下？如果是前者的话，实验室一般采用的是Thermo Fisher Scientific专门测DNA，RNA，蛋白浓度的仪器nanodrop，可以测浓度纯度（ng/ul）和纯度（采用特殊波长OD值的比值）。另外，还有其他相应的仪器，有兴趣的话可以自己查一查，目前用nanodrop较常见。如果只是有兴趣了解一下，用不着这么精确的仪器，用很多化学方法自己都可以测出来。
答：这个应该用分光光度计检测啊，浓度看OD260，纯度看OD260/OD280以及OD260/OD230。要是非用电泳检测，纯度就看看点样孔是否发亮，发亮的话是有蛋白质，浓度的话可以在旁边加一个已知浓度的marker。
答：检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。精确测定DNA浓度的方法：DNA纯度和浓度的检测:分光光度(紫外吸收)法 1.预热紫外分光光度计10-20分钟。 2.取所需的比色杯（4ml）...
答：用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.TE 缓冲液 琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计
答：用已知浓度一定量的样品和等量的未知样品跑电泳，然后EB荧光染色，轻轻冲洗，在紫外光下观察两带的亮度，这个只能有大概的认识。
答：跑电泳啊，如果有多条条带说明东西不纯。在保证纯度的情况之下测OD值，再转换成质量，似乎是1OD等于33.8ug???然后根据质粒的大小，计算质粒的分子量。把质量除以分子量，就得到摩尔数了。
答：估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。
答：纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。生物帮上面有这方面的详细介绍， http:/...
答：你取出1微升或2微升，用EB稀释100倍或50倍到100微升，OD260/280的比值在1.8-2.0是比较理想的，代表你的DNA纯度很高。波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，算一下，再乘以你的稀释倍数，就是浓度了
答：若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况，所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度...
答：3、蛋白质去除：加入蛋白酶K等蛋白酶，去除DNA溶液中的蛋白质。4、DNA纯化：通过离心、过滤和柱层析等技术，将DNA与其他杂质分离开来，得到纯化的DNA。5、DNA质量检测：使用分光光度计等方法测定DNA溶液中DNA分子的含量和纯度，并评估DNA的质量和浓度。6、DNA鉴定：通过聚合酶链式反应（PCR）和电泳等...
