测定DNA含量用什么方法?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-06
可用什么方法测定DNA的含量?

紫外分光光度计 OD260/280比值,如果浓度够大的话可以适当稀释,是OD260在0.1到1之间最好,OD260值为1时 双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测,还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要分析软件,肉眼是无法正确比较的。

二苯胺稍溶于水,溶于乙醇、乙醚、苯等,能溶于浓无机酸中,但用水稀释时又析出。

组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。 在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。 分光光度法不但能确定核酸的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。DNA的比值为1.8,RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8,说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法。

  • 测定DNA含量可以用什么方法?
    答:外分光光度计 OD260/280比值,如果浓度够大的话可以适当稀释,是OD260在0.1到1之间最好。OD260值为1时,双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测。还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要...
  • 如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
    答:琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖...
  • 如何用紫外吸收法测定DNA含量
    答:除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽...
  • 如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
    答:紫外分光光度计定量。方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒,紫外分光光度计定量后,根据重组质粒分子量计算其拷贝数,稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品,取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝/μl高中低3个浓度的标准品,反复冻融1、6、11、15次和21次后,以冻融后...
  • 测定核酸含量的方法有哪些?
    答:③紫外分光光度法 实验室中最常用的是测定样品在 260nm 和 280nm 吸光值的比值,纯 DNA 的 A260/A280 应为 1.8,纯 RNA 应 为 2.0。样品中如含有杂蛋白及苯酚,A260/A280 比值则明显降低。对于纯的样品,只要读出 A260 则可计算出含量,A260=1 时相当于 50μg/ml 双螺旋 DNA 或 ...
  • 如何测定样品中dna和蛋白质的含量
    答:DNA/RNA吸收光谱峰在260 nm处,据计算,测定此波长下DNA溶液的OD值,当OD260=1时,双链DNA含量约为50 μg/ml ,单链DNA与RNA含量为40 μg/ml ,寡核甘酸的含量为33 μg/ml ,据此可用紫外分光光度计测定溶液中DNA或RNA的含量。由于蛋白质的吸收峰在280 nm处,在测定 DNA或RNA含量时,还常...
  • dna定量细胞学检查是什么
    答:DNA定量细胞学检查是一种用于检测和分析细胞中DNA含量的技术。DNA定量细胞学检查主要是通过特定的技术方法,对细胞中的DNA含量进行定量测定和分析。以下是关于该检查的详细解释:1. 定义与目的 DNA定量细胞学检查是一种实验室检测技术,旨在评估和测量细胞中的DNA数量和质量。这种检查方法对于多种医疗诊断...
  • 测dna和rna用什么方法比较好?
    答:比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5下...
  • DNA质量检测相关方法,及效果
    答:对于基因组DNA质量检测主要包括:基因组DNA片段大小的确定,基因组DNA浓度的测定,基因组DNA纯度的测定三方面。用到的技术方法有:琼脂糖凝胶电泳(确定片段大小),使用紫外分光光度计测定基因组DNA溶液的OD值(浓度和纯度的测定,OD260/OD280应该在1.8左右,高了表明有RNA污染,低了表明有蛋白质污染)...
  • 除了紫外吸收的方法测定DNA.浓度外 还有哪些常用方法?
    答:紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法. 原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链 寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定...