如何通过琼糖凝胶电泳来鉴定DNA 的纯度

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-06
怎样通过凝胶电泳图谱检测DNA的纯度和浓度

这个应该用分光光度计检测啊,浓度看OD260,纯度看OD260/OD280以及OD260/OD230。
要是非用电泳检测,纯度就看看点样孔是否发亮,发亮的话是有蛋白质,浓度的话可以在旁边加一个已知浓度的marker。

除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如 A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。A 320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A 320 一般是 0。

用已知浓度一定量的样品和等量的未知样品跑电泳,然后EB荧光染色,轻轻冲洗,在紫外光下观察两带的亮度,这个只能有大概的认识。