DNA和RNA纯度检测的问题!

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-06

蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm,所以280nm常用来表示蛋白质吸光度;而260nm为DNA的吸光度。
理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为1.8.  OD260反映的是溶液中核酸的浓度,OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。
样品中如果含有蛋白质及苯酚,A260/A280比值会明显下降。对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA,或者40微克/ml 单链DNA(RNA),或者20微克/ml 寡核苷酸计算。
  OD260/OD280=1.9~2.0 RNA居多,纯度已经很高了。
纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白质、酚等污染)
纯RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(2.0时表明可能有异硫氰酸残存)



  • DNA和RNA纯度检测的问题!
    答:纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白质、酚等污染)纯RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(2.0时表明可能有异硫氰酸残存)
  • DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响...
    答:是核酸纯度的指示值,纯度好的DNA,在pH7-8.5 下其比值应该在2.0 或2.5,A260 / A280的比值, 用于评估样品的纯度, 因为蛋白的吸收峰是280 nm。 纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230是多肽、芳香基团、苯酚和...
  • 4.如何检测、评价提取的DNA、RNA质量?如何计算提取的DNA、RNA浓度?
    答:一般通过OD260/OD280来判断他们的含量,纯DNA的比值一般在1.8,大于1.8,小于2时可能有RNA污染,在1.9到2.0时RNA纯度高,小于1.8时可能有蛋白质污染,大于2.0时可能在提取过程中的化学物质残留。提取原则 1、保证核酸一级结构的完整性。2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓...
  • 测量核酸纯度的时候 A260/A280 为什么DNA的和RNA的不一样(DNA>1.8 RNA...
    答:很简单,因为DNA和RNA的结构不一样,所以吸光能力不一样。多说一句,单链DNA和双链DNA的吸光能力也有差别。
  • dna纯度的判断根据什么?
    答:【DNA纯度判断根据】:DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断,符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6-1.8之间,低于此范围表明蛋白质含量超标,高于此范围表明样品中含有RNA。【光密度概念】:OD是optical density(光密度)的缩写, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。吸光度...
  • 测dna和rna用什么方法比较好?
    答:比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5下...
  • 如何使用简单的实验方法检测DNA纯度
    答:2. 用可扫描的紫外分光光度计测定制备的DNA/RNA的紫外吸收曲线,测定OD260和OD280,并计算比值:OD260/OD280,纯DNA的此比值约为1.8~2.0。纯RNA的此比值约为大于2.0。3. 根据:每毫升1微克的纯DNA的OD260值= 0.020,计算所得DNA的纯度;每毫升1微克的纯RNA的OD260值= 0.025,计算所得...
  • DNA浓度鉴定纯度鉴定方法有哪些
    答:选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算DNA浓度.DNA浓度(ng /µL)=OD260×50×稀释倍数 当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯 ...
  • 如何测量RNA的纯度和含量
    答:RNA纯度:RNA在纯化过程中容易受到DNA、蛋白质及有机溶剂的影响,这些残存物将会影响以后的操作。光谱分析(NANODROP)利用物质对不同波长光的吸收度的不同,可以鉴别出溶液纯度及浓度。组成结构 RNA和DNA一样,也是由各种核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链,但与DNA有一系列差异。在...
  • 有关实验“DNA的提取及检测”的问题
    答:观察A:DNA是否跑出,带型是否整齐划一;B:RNA是否除尽 (2)分光光度计检测D260/D280的比值:在1.8-2.0的范围内认为纯度较高上述方法提取的DNA比值在1.65-1.95之间。浓度=30000xOD260(DNA样品为5ul时)。不知道你说的是动物的还是植物的,我当年做的是动物的。用的是鸡血,因为在学校,...