如何提高动物细胞原代细胞培养的成功率?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-28
如何提高原代细胞培养的效率

原代细胞(primary cell) 指机体组织(组织、鼠组织、鼠组织兔组织等)经蛋白酶或其获单细胞并体外进行模拟机体培养细胞称原代细胞般认培养原代第1代细胞传代第10代内细胞统称原代细胞培养工条件使其原代细胞存、、繁殖传代进行细胞命程、细胞癌变、细胞工程等问题研究
细胞株(cell strain) 通选择或克隆形原代培养细胞获具特殊性质或标志物细胞称细胞株般认细胞株用单细胞离培养或通筛选由单细胞增殖形细胞群细胞株特殊性质或标志必须整培养期间始终存
细胞系(cell line) 原代细胞经首传代功即细胞系泛指般能传代细胞其能够连续传代细胞叫做连续细胞系或限细胞系能连续培养称限细胞系数二倍体细胞限细胞系由原先存于原代培养物细胞世系所组能继续传代或传代数限 称限细胞系(finite cell line) 连续培养 则称连续细胞系(continuous cell line) 培养50代并限培养类肿瘤细胞体外培养半稳定并连续传代即称连续性株或系

是的,
原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。

首先,要确保无菌操作;其次,要保证组织的状态,取新鲜组织,不能放置太久,操作过程中胰酶和胶原酶作用时间要适当;三要保证细胞纯度,分离后的细胞要进行纯化再培养;四是培养基要新鲜,尽量采用进口血清,血清浓度和培养基PH要适当。

我们公司专门生产原代细胞,楼上几点讲的非常好,我还要补充以下:
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基;
2.关键还是生长因子等的浓度;
3.如果需要的话,需要明胶包被。

  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其:细胞培养和传代
    答:初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械...
  • 原代细胞培养常见问题有哪些
    答:原代细胞培养常见问题的原因及其解决的办法:培养液pH值变化太快可能原因(1)CO2张力不对(2)培养瓶盖拧得太紧(3)NaHCO3缓冲系统缓冲力不足(4)培养液中盐浓度不正确(5)细菌、酵母或真菌污染建议解决方法(1)按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为...
  • 细胞生物学:小鼠心肌细胞原代培养
    答:一、概述 整体动物心肌细胞的增殖能力在出生后仅能维持一个短时期,小鼠在出生3周后DNA合成所需的酶的活性及心肌细胞的增殖能力就明显降低至成年鼠水平。小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏,尤以出生1-4d的较好,此时心肌细胞已分化充分,适于作各种研究,而出生4d以后的乳鼠心脏中...
  • 原代细胞的分离培养
    答:(3) 严格地说,原代培养是指未经传代的细胞,但在实际工作中,人们常将10 代以内的细胞用作原代培养细胞,因为此时的细胞基本上保持着原有的生物学特性。(4) 从原代培养的操作步骤不难看出,原代细胞中含有多种细胞成分,即它们是异质型( heterogeneity) 的群体,因此在设计实验及分析结果时,切勿...
  • 如何改进动物细胞原代培养技术,来减少微生物的污染?
    答:穿上隔离服等等!!就看你要求如何了!无菌要求越高,操作要求越高,设备要求也越高拉! 至于后面那个问题细胞原代组织培养除了胚胎小鼠外还有很多很多啊!理论上只要是细胞都可以原代培养的哦。只是胚胎小鼠比较容易获得,而且分化程度低容易培养罢了,其他的什么癌原代细胞啊什么的都可以 ...
  • 如何进行原代培养?
    答:使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取 ...
  • 如何进行细胞原代培养
    答:首先,选择适当的组织样本是细胞原代培养的关键。通常,选取健康、无病变的组织,并确保样本在采集后尽快进行处理,以保持细胞的活性。样本可以是动物、人类或其他生物的组织,具体取决于实验需求。其次,将采集的组织样本进行消化处理,以分解细胞间的连接并释放单个细胞。常用的消化酶包括胰蛋白酶、胶原蛋白...
  • 高中生物 动物细胞培养
    答:还要保持PH在7.2~7.4之间!容器内还要通入氧气以保持代谢旺盛还有充入二氧化碳调整PH。然后会先进行原代培养,接着传代培养,出现接触抑制后,分散到另外的培养瓶中培养。注意点:动物细胞具有贴壁生长,接触抑制的特点。一般生长到10代的细胞,有些可以到40代50代,这部分遗传物质正常的细胞称为细胞株...
  • 在动物细胞培养过程中,采用什么可以保证细胞生活的
    答:动物细胞培养过程中,原代细胞培养专家齐氏生物建议您控制好培养条件(5%CO2,37°培养箱),同时给予适当营养(培养基、血清、生长因子等)。
  • 动物细胞工程动物细胞培养
    答:分离后的细胞需要被制成细胞悬浮液,这一过程通过加入预先配置的培养液完成,这样可以使细胞分散在液体中,便于后续的培养操作。细胞培养通常分为两个阶段:原代培养和传代培养。原代培养是细胞初次从组织中取出后直接培养,而传代培养则是细胞生长到一定代数后,需要重新分离并继续培养,这个阶段也可能会伴随...