如何进行细胞原代培养
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-26
细胞原代培养是将机体组织经消化或机械方法分散成单个细胞，在体外模拟体内环境使其生长繁殖并维持主要结构和功能的一种细胞培养方法。以下是进行细胞原代培养的基本步骤：
首先，选择适当的组织样本是细胞原代培养的关键。通常，选取健康、无病变的组织，并确保样本在采集后尽快进行处理，以保持细胞的活性。样本可以是动物、人类或其他生物的组织，具体取决于实验需求。
其次，将采集的组织样本进行消化处理，以分解细胞间的连接并释放单个细胞。常用的消化酶包括胰蛋白酶、胶原蛋白酶等。消化过程需要严格控制温度、时间和酶的浓度，以避免对细胞造成过度损伤。
接下来，将消化后的细胞悬液进行离心，去除消化酶和杂质，然后用适当的培养基重悬细胞。培养基的选择应根据细胞的类型和实验需求而定，通常包含细胞生长所需的营养物质、生长因子和血清等。
最后，将细胞悬液接种到培养皿或培养瓶中，放入培养箱中进行培养。培养条件包括适宜的温度、湿度、二氧化碳浓度和光照等，这些条件应根据细胞的特性进行调整。在培养过程中，需要定期观察细胞的生长情况，并进行换液、传代等操作，以保持细胞的良好状态。
以皮肤组织为例，可以进行以下操作：从健康志愿者身上获取一小块皮肤样本，经过适当的消毒处理后，将皮肤组织剪碎成小块。接着，使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶进行消化处理，以释放皮肤细胞。消化后的细胞悬液经过离心和重悬后，接种到培养皿中进行培养。在培养过程中，需要定期观察细胞的生长情况，并进行必要的操作以维持细胞的活性。
总之，细胞原代培养需要严格控制实验条件，包括样本选择、消化处理、培养基选择和培养条件等。同时，需要根据细胞的特性和实验需求进行灵活调整，以获得最佳的实验结果。
细胞培养一般方法有哪些
答：一、原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存；二、传代培养首先进行细胞复苏:1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,...
如何进行原代培养?
答：此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一定...
细胞模型的建立及培养方法有哪些
答：传代培养首先进行细胞复苏,使细胞基本成单个悬浮,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞细胞培养首先分为原代培养和传代培养、冻存,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化,晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,
原代细胞培养和传代培养的方法及其:细胞培养和传代
答：将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、...
有谁知道细胞培养的详细步骤
答：3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／...
动物细胞工程中,制成细胞悬浮液后 接着该如何进行原代培养和传代...
答：将材料剪碎，并用胰蛋白酶处理（消化），处理形成单个细胞，将单个的细胞放入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定...
原代细胞的分离培养
答：（1） 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定，除胰蛋白酶外，常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞；用II 型胶原酶消化大鼠腺垂体细胞等。（2）如果没有不锈钢筛， 可用4 层纱布代替，但纱布要预先经高温高压灭菌。（3） 严格地说，原代培养是指未经传代的细胞，但在实际工作中...
原代细胞培养的技巧
答：使用这种方式需注意勿使搅拌速度过快，否则即可使培养液溢出又容易造成污染。如果培养液的量在5ml以下，可以采用旋转瓶培养。给悬浮培养的细胞换液时要注意不要吸出细胞。2）能够进行悬浮培养的细胞，其生命力一般都比较旺盛，体外分裂增殖的速度较快，营养成分消耗大，换液时间隔一般较短。原代细胞培养...
什么是原代培养和传代培养?
答：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。
作业:简述细胞原代培养的过程。
答：1、一般取出组织之后，先要对组织块进行修剪，去除有害物质。以鸡胚为例，取出鸡胚之后，去除头部和内脏，用BSS也进行清洗两次。2、将组织进行剪碎处理，加入一定量的胰酶进行消化，多放入37°二氧化碳培养箱中静止5分钟左右。3、轻轻的倒掉上清液，并加入一定量的DMEM溶液。4、用纱布进行过滤，滤除大的...
首先，选择适当的组织样本是细胞原代培养的关键。通常，选取健康、无病变的组织，并确保样本在采集后尽快进行处理，以保持细胞的活性。样本可以是动物、人类或其他生物的组织，具体取决于实验需求。
其次，将采集的组织样本进行消化处理，以分解细胞间的连接并释放单个细胞。常用的消化酶包括胰蛋白酶、胶原蛋白酶等。消化过程需要严格控制温度、时间和酶的浓度，以避免对细胞造成过度损伤。
接下来，将消化后的细胞悬液进行离心，去除消化酶和杂质，然后用适当的培养基重悬细胞。培养基的选择应根据细胞的类型和实验需求而定，通常包含细胞生长所需的营养物质、生长因子和血清等。
最后，将细胞悬液接种到培养皿或培养瓶中，放入培养箱中进行培养。培养条件包括适宜的温度、湿度、二氧化碳浓度和光照等，这些条件应根据细胞的特性进行调整。在培养过程中，需要定期观察细胞的生长情况，并进行换液、传代等操作，以保持细胞的良好状态。
以皮肤组织为例，可以进行以下操作：从健康志愿者身上获取一小块皮肤样本，经过适当的消毒处理后，将皮肤组织剪碎成小块。接着，使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶进行消化处理，以释放皮肤细胞。消化后的细胞悬液经过离心和重悬后，接种到培养皿中进行培养。在培养过程中，需要定期观察细胞的生长情况，并进行必要的操作以维持细胞的活性。
总之，细胞原代培养需要严格控制实验条件，包括样本选择、消化处理、培养基选择和培养条件等。同时，需要根据细胞的特性和实验需求进行灵活调整，以获得最佳的实验结果。
答：一、原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存；二、传代培养首先进行细胞复苏:1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,...
答：此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一定...
答：传代培养首先进行细胞复苏,使细胞基本成单个悬浮,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞细胞培养首先分为原代培养和传代培养、冻存,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化,晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,
答：将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、...
答：3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／...
答：将材料剪碎，并用胰蛋白酶处理（消化），处理形成单个细胞，将单个的细胞放入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定...
答：（1） 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定，除胰蛋白酶外，常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞；用II 型胶原酶消化大鼠腺垂体细胞等。（2）如果没有不锈钢筛， 可用4 层纱布代替，但纱布要预先经高温高压灭菌。（3） 严格地说，原代培养是指未经传代的细胞，但在实际工作中...
答：使用这种方式需注意勿使搅拌速度过快，否则即可使培养液溢出又容易造成污染。如果培养液的量在5ml以下，可以采用旋转瓶培养。给悬浮培养的细胞换液时要注意不要吸出细胞。2）能够进行悬浮培养的细胞，其生命力一般都比较旺盛，体外分裂增殖的速度较快，营养成分消耗大，换液时间隔一般较短。原代细胞培养...
答：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。
答：1、一般取出组织之后，先要对组织块进行修剪，去除有害物质。以鸡胚为例，取出鸡胚之后，去除头部和内脏，用BSS也进行清洗两次。2、将组织进行剪碎处理，加入一定量的胰酶进行消化，多放入37°二氧化碳培养箱中静止5分钟左右。3、轻轻的倒掉上清液，并加入一定量的DMEM溶液。4、用纱布进行过滤，滤除大的...
