如何进行原代培养?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-26

取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。
培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取



  • 如何进行细胞原代培养?
    答:最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。分散细胞培养大致步骤为:将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶),置合适的培养基中培养,使细胞 得以生存、生长和繁殖(注意整个过程无菌)。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上,加入培养基后进行培养。
  • 哪位做过脂肪细胞原代培养
    答:摘??要:??目的 建立人前脂肪细胞原代培养方法,以更深入地研究人体脂肪组织增生的生物学特征。??方法 选用成人的腹部脂肪组织,采用原代消化细胞培养法培养出棱形细胞;同时取皮肤组织,进行成纤维细胞培养作为对照。??结果 培养出的棱形细胞成分均一,增殖旺盛,分化率高。经形态学动态变化的观察,生长曲线及油红O脂肪染...
  • 原代细胞培养实验原理步骤哪里有?
    答:原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培 养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。操作步骤 (一)胰酶消化法 1、器材:将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2—3秒钟(时间不能过...
  • 原代培养和传代培养的区别
    答:原代培养 通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在首次传代前的培养可认为是原代培养。传代培养 原代培养形成的单层细胞汇合以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,都将影响细胞的生长,这一程序常称为传代或传代培养。简单说...
  • 如何进行细胞原代培养
    答:接着,使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶进行消化处理,以释放皮肤细胞。消化后的细胞悬液经过离心和重悬后,接种到培养皿中进行培养。在培养过程中,需要定期观察细胞的生长情况,并进行必要的操作以维持细胞的活性。总之,细胞原代培养需要严格控制实验条件,包括样本选择、消化处理、培养基选择和培养条件等。同时,...
  • 原代细胞原代细胞的培养
    答:原代细胞的培养是一种直接从生物体获取细胞、组织或器官后即刻进行的培养过程,通常特指未进行传代前的细胞培养阶段,此时细胞保持着原始的特性。正常情况下,这些细胞仍维持二倍体的数量。实际上,我们通常将第一代到第十代内的培养细胞统称为原代细胞培养,这段时间内的细胞保持其原始状态和功能特性。原...
  • 原代细胞培养小知识
    答:培养原代细胞的要点:解冻时,原代细胞对温度敏感,需在37℃水浴中轻轻旋转解冻,迅速移至无菌操作台。Cell Systems的原代视网膜内皮细胞复苏时无需离心,直接接种,第二天更换培养液即可。传代时,原代细胞由于间隙抑制,需观察生长周期,一般在细胞密度达到85%左右进行,避免100%汇合导致细胞衰老。传代时需...
  • 体外培养的细胞,不论是原代细胞还是传代细胞
    答:由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养.原代培养细胞离体时间短,性状与体内相似,适用于研究.一般说来,幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养.体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续....
  • 细胞培养的几种方法和步骤
    答:细致操作的艺术原代培养需要精细操作,首先从组织中分离并消化分散细胞,调整密度后在适宜条件下培养,通常3-5天内观察细胞生长。细胞黏附生长后,每隔2-3天更换一半培养液,满瓶壁后进行传代。关键步骤与注意事项无菌操作是细胞培养的基石,防止污染至关重要。选用适合细胞的培养液和胎牛血清,胶原酶溶液需...
  • 原代培养的特点 原代培养的特点简述
    答:1、原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。2、严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。3、原代培养细胞与体内原组织在...