如何进行细胞原代培养?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-28
怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊???

怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊???
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基;
2.关键还是生长因子等的浓度;
3.如果需要的话,需要明胶包被.

细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。
分散细胞培养大致步骤为:将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶),置合适的培养基中培养,使细胞 得以生存、生长和繁殖(注意整个过程无菌)。
组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上,加入培养基后进行培养。

原代培养比日常的细胞系培养难。我建议如其在这边寻找答案,不如买一本细胞培养基础看看,上面的介绍详细而且权威。如果单单通过网友介绍给你,可能对你的帮助并不大。

原代培养是动物细胞工程的一个名词,需要把从动物组织细胞用胰蛋白酶处理成单个细胞,放在一定的培养液中进行培养,这就是原代培养。培养到一定时期后,细胞不再分裂,就需要转移到新的培养液中再培养,这叫传代培养。

  • 细胞培养一般方法有哪些
    答:细胞培养首先分为原代培养和传代培养.一、原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存;二、传代培养首先进行细胞复苏:1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,...
  • 如何进行原代培养?
    答:此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定...
  • 细胞模型的建立及培养方法有哪些
    答:传代培养首先进行细胞复苏,使细胞基本成单个悬浮,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞细胞培养首先分为原代培养和传代培养、冻存,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化,晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,
  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其:细胞培养和传代
    答:将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、...
  • 有谁知道细胞培养的详细步骤
    答:一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液,一般7~14d可以长满瓶壁,进行传代。4. 注意事项 (1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强各个环节的无菌操作观念,以预防为主,一旦污染,一般很难消除。(2...
  • 动物细胞工程中,制成细胞悬浮液后 接着该如何进行原代培养和传代...
    答:将材料剪碎,并用胰蛋白酶处理(消化),处理形成单个细胞,将单个的细胞放入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定...
  • 原代细胞是如何培养的?选择组织块还是消化液培养法?
    答:常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。(一)组织块培养法 许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。1. 设备材料 培养箱、冰箱、超净工作...
  • 原代细胞培养的技巧
    答:如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足,代谢废物积累较快需要经常换液和传代。2)适当增大原代培养接种的细胞密度,给培养的细胞提供geng多的类似于在体内时细胞之间的相互作用,会极-大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。3)尽快使...
  • 如何进行细胞原代培养?
    答:最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。分散细胞培养大致步骤为:将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶),置合适的培养基中培养,使细胞 得以生存、生长和繁殖(注意整个过程无菌)。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上,加入培养基后进行培养。
  • 作业:简述细胞原代培养的过程。
    答:1、一般取出组织之后,先要对组织块进行修剪,去除有害物质。以鸡胚为例,取出鸡胚之后,去除头部和内脏,用BSS也进行清洗两次。2、将组织进行剪碎处理,加入一定量的胰酶进行消化,多放入37°二氧化碳培养箱中静止5分钟左右。3、轻轻的倒掉上清液,并加入一定量的DMEM溶液。4、用纱布进行过滤,滤除大的...