哪些分子生物学技术被用于对细菌的分类,鉴定

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-15
有哪些技术可被用于对细菌进行分类、鉴定?方法的研究概况。

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1、细菌常规鉴定方法
1. 1 免疫诊断技术
1. 1. 1凝集试验
目前常用的是葡萄球菌协同凝集试验(SPA - CoA) ,金黄色葡萄球菌细胞壁的A 蛋白(SPA) 能与动物血清中IgG的Fc 结合,成为致敏的颗粒载体,特异性IgG的Fc 与SPA 结合后, F (ab’) 2 段暴露在葡萄球菌表面,与相应细菌反应呈现凝集现象,此法用于细菌快速鉴定和分型。
1. 1. 2免疫酶技术
免疫酶技术( EIA , Enzymeimmunoa2ssay) 是将酶标记的抗抗体与抗原—抗体复合物结合形成抗原- 抗体- 酶标记抗抗体复合物,加入酶底物产生有色产物。以酶联免疫吸附测定( ELISA) 和斑点酶联免疫吸附技术(Dot - ELISA) 应用较广泛。
1.1. 3 免疫荧光技术
免疫荧光技术( FIA , Fuorescenceimmunoassay) 是将一抗滴加于待检抗原上,再加一抗的荧光抗体(二抗) ,呈现特异性的荧光抗原抗体复合物以鉴定病原菌。此法比ELISA 更直观,可直接观察到菌体形态。
1. 1. 4放射免疫测定技术
放射免疫测定( RIA , Rad2ioimmunoassay) 是用放射性同位素标记抗原或抗体,与相应的抗体或抗原结合后通过放射自显影定性和定量抗原或抗体。
1. 1. 5免疫胶体金标记技术
胶体金是继酶、荧光素和放射同位素后免疫标记技术中令人瞩目的新标记物。胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、枸橼酸钠等的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,通过静电作用与抗体或抗原形成一种稳定的胶体状态,即为免疫金,免疫金与相应的抗原抗体结合后,呈现特定的颜色反应。
1. 2  蛋白质图谱分析
蛋白质图谱分析主要采用聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE,Polyacrylamide Gel Electrophoresis)和SDS -PAGE。聚丙烯酰胺凝胶是单体丙烯酰胺(Acr) 和
N ,N’- 亚甲双丙烯酰胺(Bis) 在催化剂过硫酸铵和加速剂四甲基乙二胺(TEMED)作用下聚合为含酰胺基侧链的脂肪族长链,相邻长链通过甲叉桥连接形成三维网状结构物质,PAGE 根据电荷、形状和分子大小分离和定性、定量分析蛋白质和多肽。SDS - PAGE 根据分子量的不同分离蛋白质,SDS 是一种阴离子表面活性剂,与蛋白质疏水部分结合使蛋白质带大量负电荷且使蛋白质的形状趋向一致,抵消了蛋白质本身所带电荷和形状的影响,因此,样品分子量的对数与其在凝胶中的迁移率呈直线关系。

详见 http://epub.cnki.net/kns/brief/default_result.aspx

PCR鉴定技术、SNP分析、基因组测序等

  • 哪些分子生物学技术被用于对细菌的分类,鉴定
    答:DNA-DNA杂交,该技术被认为是细菌分类和鉴定的“黄金法则”,主要方法如下:标记法、吸光度法、荧光强度法等。16SrRNA法:细菌核糖体的RNA有三种类型,(23S、16S、5S)rRNA,其中16S被认为作为生物系统发育和分类指标最为合适。细菌核心基因(看家基因),包括gyrB、rpoB、groEL、recN等。
  • 哪些分子生物学技术被用于对细菌的分类,鉴定
    答:1. 1. 1凝集试验 目前常用的是葡萄球菌协同凝集试验(SPA - CoA) ,金黄色葡萄球菌细胞壁的A 蛋白(SPA) 能与动物血清中IgG的Fc 结合,成为致敏的颗粒载体,特异性IgG的Fc 与SPA 结合后, F (ab’) 2 段暴露在葡萄球菌表面,与相应细菌反应呈现凝集现象,此法用于细菌快速鉴定和分型。1. 1. 2免疫...
  • 试述细菌种属鉴定的常用分子生物学方法。
    答:现最常用的是硝酸纤维膜结合法。②165rRNA序列测定。rRNA分子具有高度保守性,在所有的细胞生物中都存在,在长期的进化中,16SrRNA的总碱基数有所不同,保守的部分使不同序列很容易相互对齐进行比较。(4)165-235rRNA序列测定:在165和235rRNA的间隔区,各菌种的长度是不一样的,利用包含165和235rRNA部分...
  • 分子生物学技术在细菌检验中的应用
    答:1.dna-dna杂交,该技术被认为是细菌分类和鉴定的“黄金法则”,主要方法如下:标记法、吸光度法、荧光强度法等。2.16srrna法:细菌核糖体的rna有三种类型,(23s、16s、5s)rrna,其中16s被认为作为生物系统发育和分类指标最为合适。3.细菌核心基因(看家基因),包括gyrb、rpob、groel、recn等。
  • 细菌鉴定的方法有哪些
    答:常用的分子生物学技术包括基因序列分析、聚合酶链式反应(PCR)等。通过这些技术,可以获得细菌的基因序列信息,然后与已知的数据库进行对比,从而准确地鉴定细菌的种类。以上三种方法各有特点,可以根据实际情况选择使用,或者结合使用多种方法以获得更准确的结果。随着科技的发展,分子生物学鉴定在细菌鉴定中的...
  • 请教病原微生物分型的方法种类及优劣势比较。谢谢!
    答:目前,应用分子生物学技术对病原微牛物进行分型的方法包括:脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gelelectrophoresis。PFGE)分型、聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分型、生物芯片分型、多位点序列分型(muhilocus sequencetyping,MI。ST)、质粒DNA图谱分型以及限制性片段长度多态性(restriction fragment ...
  • 分离纯化微生物的方法有哪些?各方法适用分离什么菌种?
    答:从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离。分离技术 主要是稀释和选择培养,稀释是在液体中或在固体表面上高度稀释微生物群体,使单位体积或单位面积仅存留一个单细胞,并使此单细胞增殖为一个新的群体。最常用的为...
  • 分子生物学对细菌分类学的重要性
    答:核糖体由蛋白质和核酸组成,分为大,小两个亚基,组成核糖体的核酸就是rRNA,rRNA约占细菌RNA总量的80%,存在于所有的细菌中,原核生物rRNA分为5SrRNA、16SrRNA、23rRNA,它们位于同一操纵子上,rRNA分子在长期进化中具有保守性,核苷酸序列变化较缓慢,应该是细菌系统分类发育标记分子(phylogenetic markers)。自上世纪60年代...
  • 细菌的分类有哪些种类?
    答:细菌的分类方法多样,主要依据包括形态特征、细胞壁结构、致病性以及分子生物学特性等。按照形态,细菌可以分为球菌、杆菌和螺旋菌三大类。球菌进一步细分为单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌和葡萄球菌等;杆菌包括球杆菌、链杆菌、竹节杆菌、双歧杆菌、粗大杆菌、细小杆菌和棒状杆菌等;螺旋菌则包括...
  • 细菌快速鉴定的方法有哪些
    答:2. 分子生物学鉴定法:随着分子生物学技术的发展,DNA序列分析被广泛应用于细菌鉴定。通过提取细菌的DNA片段,与已知的DNA序列数据库进行对比分析,可以迅速确定细菌的种类和基因型。这种方法准确度高,但操作相对复杂,需要专业的技术人员和实验室设备支持。3. 生物化学鉴定法:基于细菌对不同生化反应的反应...