哪些分子生物学技术被用于对细菌的分类，鉴定
1、细菌常规鉴定方法
1. 1 免疫诊断技术
1. 1. 1凝集试验
目前常用的是葡萄球菌协同凝集试验(SPA - CoA) ,金黄色葡萄球菌细胞壁的A 蛋白(SPA) 能与动物血清中IgG的Fc 结合,成为致敏的颗粒载体,特异性IgG的Fc 与SPA 结合后, F (ab’) 2 段暴露在葡萄球菌表面,与相应细菌反应呈现凝集现象,此法用于细菌快速鉴定和分型。
1. 1. 2免疫酶技术
免疫酶技术( EIA , Enzymeimmunoa2ssay) 是将酶标记的抗抗体与抗原—抗体复合物结合形成抗原- 抗体- 酶标记抗抗体复合物,加入酶底物产生有色产物。以酶联免疫吸附测定( ELISA) 和斑点酶联免疫吸附技术(Dot - ELISA) 应用较广泛。
1.1. 3 免疫荧光技术
免疫荧光技术( FIA , Fuorescenceimmunoassay) 是将一抗滴加于待检抗原上,再加一抗的荧光抗体(二抗) ,呈现特异性的荧光抗原抗体复合物以鉴定病原菌。此法比ELISA 更直观,可直接观察到菌体形态。
1. 1. 4放射免疫测定技术
放射免疫测定( RIA , Rad2ioimmunoassay) 是用放射性同位素标记抗原或抗体,与相应的抗体或抗原结合后通过放射自显影定性和定量抗原或抗体。
1. 1. 5免疫胶体金标记技术
胶体金是继酶、荧光素和放射同位素后免疫标记技术中令人瞩目的新标记物。胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、枸橼酸钠等的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,通过静电作用与抗体或抗原形成一种稳定的胶体状态,即为免疫金,免疫金与相应的抗原抗体结合后,呈现特定的颜色反应。
1. 2 蛋白质图谱分析
蛋白质图谱分析主要采用聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE,Polyacrylamide Gel Electrophoresis)和SDS -PAGE。聚丙烯酰胺凝胶是单体丙烯酰胺(Acr) 和
N ,N’- 亚甲双丙烯酰胺(Bis) 在催化剂过硫酸铵和加速剂四甲基乙二胺(TEMED)作用下聚合为含酰胺基侧链的脂肪族长链,相邻长链通过甲叉桥连接形成三维网状结构物质,PAGE 根据电荷、形状和分子大小分离和定性、定量分析蛋白质和多肽。SDS - PAGE 根据分子量的不同分离蛋白质,SDS 是一种阴离子表面活性剂,与蛋白质疏水部分结合使蛋白质带大量负电荷且使蛋白质的形状趋向一致,抵消了蛋白质本身所带电荷和形状的影响,因此,样品分子量的对数与其在凝胶中的迁移率呈直线关系。
详见 http://epub.cnki.net/kns/brief/default_result.aspx
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DNA-DNA杂交，该技术被认为是细菌分类和鉴定的“黄金法则”，主要方法如下：标记法、吸光度法、荧光强度法等。
16SrRNA法：细菌核糖体的RNA有三种类型，(23S、16S、5S)rRNA，其中16S被认为作为生物系统发育和分类指标最为合适。
细菌核心基因（看家基因），包括gyrB、rpoB、groEL、recN等。
答：病原微生物的分子分型方法 近年来，随着分子牛物学技术快速发展，新的诊断技术和方法不断涌现并广泛应用于临床微生物的检测，为病原微牛物的致病性、流行性、变异性以及耐药性分析等方面提供J，重要的信息。目前，应用分子生物学技术对病原微牛物进行分型的方法包括：脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel...
答：细菌的分类：1、根据形状分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌（包括弧菌、螺菌、螺杆菌）。2、按细菌的生活方式来分类，分为两大类：自养菌和异养菌，其中异养菌包括腐生菌和寄生菌。3、按细菌对氧气的需求来分类，可分为需氧（完全需氧和微需氧）和厌氧（不完全厌氧、有氧耐受和完全厌氧）细菌。4、按...
答：7、酶切带型分型确定操作单元：将扩增产物用HhaI和HaeIII两种限制性内切酶进行酶切，电泳检测酶切产物，酶切带型相同的分为一个操作单元。8、连接转化：从每一个操作单元中选取一株菌的16S rDNA进行连接实验。将连接产物转入感受态细胞中，将感受态细胞涂布于含有Amp的平板上，倒置培养12-16h。9、克隆...
答：传统的分类依据主要是以形态和生理生化特征为基础建立的分类系统，而现代的分类依据则更多地依赖于分子生物学特征，例如基因序列比对、基因组学和蛋白质质谱等技术，这些技术在微生物学领域逐渐普及和应用于微生物分类和鉴定工作中。而细菌分类的不同水平分别是物种、属、科、目、纲、域等等。碱基对是DNA或...
答：可以用于耐药细菌mlst分型的网站是Pubmlst。根据相关资料得，一个用于细菌分型的热门网站多位点序列分型(Multilocussequencetyping，MLST)是近年来针对细菌分型发展很快的一种分子生物学分析方法，具有很高。
答：关于细菌的分子生物学检测说法错误的是（）A.细菌染色体大多为裸露的环状闭合双链DNA，控制细菌的各种遗传特性 B.质粒是染色体外的遗传物质，也是DNA C.细菌DNA组成决定细菌的基因型 D.对细菌的染色体和质粒DNA进行分析，就是对细菌基因型进行的分析 E.对细菌DNA进行分析，可直接测定，无需提取DNA 正确...
答：二、详细解释 1. 细菌培养法：这是检测大肠杆菌的经典方法。通过采集样本，如水样、食品样或人体排泄物等，然后在特定的培养基上进行细菌培养。大肠杆菌在此类培养基上会生长并形成菌落，从而可以观察和计数。2. 分子生物学技术：随着生物技术的发展，PCR等分子生物学技术被广泛用于大肠杆菌的检测。通过...
答：教程的核心内容主要涵盖两个关键领域：分子生物学与细胞生物学技术。在分子生物学篇章中，研究对象广泛，涉及细菌、酵母、植物和动物，内容深入到生物大分子的层次，从DNA的结构和功能，到RNA的转录和翻译，再到蛋白质的合成和功能。技术手段多样，包括对这些大分子的高效提取、分离、纯化和鉴定，以及基因...
答：2. 分子生物学技术在遗传多样性研究中的应用 多种技术被用于研究遗传多样性，如DNA限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、微卫星(SSR)等。这些技术帮助我们理解作物抗病基因的多样性。3. 病原微生物致病性研究 针对稻瘟病菌、小麦条锈菌等病原体，有专门的生理小种鉴定方法，以便精准...
