如何测糖浆的细菌总数
一、设备和材料
恒温培养箱、恒温水浴槽、试管、移液管、菌落计数器、放大镜、托盘天平、称量纸、培养皿。
二、培养基和试剂
营养琼脂培养基 0.9%生理盐水
三、检验程序
待检样 适当倍数的稀释液 选择2-3 个适当稀释度各1ml分别加入灭菌平皿内 每皿内加入适量营养琼脂 37℃ 48±2小时 菌落计数→报告
四、操作步骤
1．按无菌操作要求称取样品10g，连同100ml生理盐水加入灭菌三角瓶内，震荡，使成1∶10的均匀供试液。
2．用1ml 灭菌吸管吸取1∶10的供试液 1ml，在离稀释剂液面上约1cm处，沿管壁注入装有9ml 灭菌的盐水管中，混匀即为1∶100的稀释液。
3．另取1ml 灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释。如此每递增稀释一次，应换用一支1ml灭菌吸管并充分混匀，稀释至10-3 倍数或适当倍数备检。
4．在做上述10倍递增稀释时，每稀释妥一稀释度，即可取1ml稀释液注入9厘米平皿内。（一般可根据对供试品污染情况的估计，从供试液起，选择2-3个适宜稀释度进行测定，每个稀释度各用2-3个平皿）
注：每次吸液时均应将待稀释液充分混匀，充分振荡或用吸管反复吹系数次。
4．稀释液注入平皿后，将熔化并冷至45～50℃的肉汤琼脂培养基倾注平皿内约15mL，转动平皿使充分混合均匀后置水平台待凝。
5．琼脂凝固后，翻转平板，置30-35℃培养箱内培养24h、48h，分别计算平板内生长的菌落，以48小时的菌落数为准。
五、菌落计数方法
先用肉眼观察，点数菌落数（霉菌不包括在内），然后持放大镜检查有无遗漏，各平板菌落计数后，求出同一稀释度各平板生长的平均菌落数，如平板中有连成片状的菌落或在点样菌落蔓延生长时，该平板不宜计数。
六、细菌菌数报告
一般的报告方法是选取同一稀释度平均菌落数在30～300个之间的平板，作为菌落总数测定的范围，其中一个平板有较大片状菌落生长时，或两平板菌落数相差一倍以上，此稀释度不宜采用，稀释度的选择：
1．一个稀释度，平均菌落数在30～300个之间时，乘以稀释倍数报告。
2．两个稀释度，平均菌落数在30～300个之间，则应求出两者总菌数之比，比值小于或等于2应报告平均数，大于2则报告其中较小的数字。
3．有稀释度的平均菌落数均多于300个，应按稀释度最高的平均菌落数，乘以稀释倍数报告。
4．所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则按稀释倍数最低的平均菌落数，乘以稀释倍数报告。
5．所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一个稀释度大于300，而相邻的另一稀释度小于30，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
6．有稀释度均无菌生长，报告数为<10个/克。
菌数的报告，菌数在100以内时，按实有数报告之，大于100时，采用左端前2位数字，在前两位数字之后的数值，以四舍五入法计算，数字后面的空，可用10的指数表示。
如供试品经检验细菌数不符合要求，无特殊规定时应重新取样，依法复检两次，按三次结果平均值报告并判定合格与否。
SM-R大米糖浆检测
将已经萃取提纯的蜂蜜液态样品，送入液相色谱串联质谱仪中。实验人员解释说，如果将色谱柱当作跑道的话，各种不同的物质，通过液相极性分离出不同的糖，由于分子量、分子结构极性不同，在相同助力的推动下，却会先后到达终点。通过色谱图观察，不同物质达到峰值的时间预算，可确定是否是大米糖浆，而通过达到的峰的面积可以确定含有的大米糖浆的含量。
SM-R是大米糖浆里特有的物质，也是判断蜂蜜是否纯正最重要、最基本的检测项目之一，为我国蜂蜜出口欧盟的必检项目之一。如果产品被检测出SM-R呈阳性，则涉嫌在蜂蜜中掺入大米糖浆。大米糖浆虽然也是糖，但却廉价，其保健功效是完全不一样的。
β-呋喃果糖苷酶检测
β-呋喃果糖苷酶检测是在液相色谱仪上进行的，同样的送样、极性分离后的与标准色谱卡的对照，来判断是否含有β-呋喃果糖苷酶。
β-呋喃果糖苷酶，可将蔗糖直接转化成葡萄糖和果糖。作为蜂蜜掺假手段之一，其作用机理是将普通蔗糖的葡萄糖基与果糖基的s-(1，4)糖苷键断裂，生成果糖与葡萄糖。如果在加入二糖蔗糖的同时又加入了β-呋喃果糖苷酶，就可将蔗糖直接转化成葡萄糖和果糖，而天然蜂蜜中90%的成分为葡萄糖和果糖这两种单糖，但这种化学方式生产的“蜂蜜”其营养价值与天然蜂蜜完全不同。
“在这种情况下掺杂糖浆和白砂糖的蜂蜜有可能借助于HPLC也检验不出来。”实验室人员解释说，现在针对β-呋喃果糖苷酶建立了相应的检测方法，针对甜菜糖来源的果葡糖浆掺假进行检测，能够控制一部分的造假行为。
碳六项检测
通过“碳同位素质谱分析仪”检测，这项检测专业的说法叫液相串联同位素质谱检测，来判断蜂蜜中各种糖同位素值的测定方法。液相分离不同的糖，不同糖的同位素比值不一样，来判断糖的种类。
“大米、玉米、马铃薯等植物的糖是碳四植物糖，碳四植物糖通过光合作用产生，不是蜜蜂酿造的，蜂蜜中碳四植物糖含量越高，说明造假越严重。”据业内人士透露，碳同位素检测，主要是通过碳13蛋白和蜂蜜的碳同位素阈值来判断蜂蜜是否掺假，但阈值在-23~--23.5之间的为灰色地带，即不能判断它是否掺假。
TLC检测
又称高果糖浆检测，高果糖浆是一种多糖，淀粉类植物如马铃薯、甜菜糖等都属于高果糖浆，味道和颜色与蜂蜜相似，但是价格比蜂蜜便宜很多。TLC检测使用的是薄层色谱检测法，检测方法看似很老土———通过将样品滴在硅胶板上的“履迹”和颜色深浅，来判断其中是否含有高果糖浆。
恒温培养箱、恒温水浴槽、试管、移液管、菌落计数器、放大镜、托盘天平、称量纸、培养皿。
二、培养基和试剂
营养琼脂培养基 0.9%生理盐水
三、检验程序
待检样 适当倍数的稀释液 选择2-3 个适当稀释度各1ml分别加入灭菌平皿内 每皿内加入适量营养琼脂 37℃ 48±2小时 菌落计数→报告
四、操作步骤
1．按无菌操作要求称取样品10g，连同100ml生理盐水加入灭菌三角瓶内，震荡，使成1∶10的均匀供试液。
2．用1ml 灭菌吸管吸取1∶10的供试液 1ml，在离稀释剂液面上约1cm处，沿管壁注入装有9ml 灭菌的盐水管中，混匀即为1∶100的稀释液。
3．另取1ml 灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释。如此每递增稀释一次，应换用一支1ml灭菌吸管并充分混匀，稀释至10-3 倍数或适当倍数备检。
4．在做上述10倍递增稀释时，每稀释妥一稀释度，即可取1ml稀释液注入9厘米平皿内。（一般可根据对供试品污染情况的估计，从供试液起，选择2-3个适宜稀释度进行测定，每个稀释度各用2-3个平皿）
注：每次吸液时均应将待稀释液充分混匀，充分振荡或用吸管反复吹系数次。
4．稀释液注入平皿后，将熔化并冷至45～50℃的肉汤琼脂培养基倾注平皿内约15mL，转动平皿使充分混合均匀后置水平台待凝。
5．琼脂凝固后，翻转平板，置30-35℃培养箱内培养24h、48h，分别计算平板内生长的菌落，以48小时的菌落数为准。
五、菌落计数方法
先用肉眼观察，点数菌落数（霉菌不包括在内），然后持放大镜检查有无遗漏，各平板菌落计数后，求出同一稀释度各平板生长的平均菌落数，如平板中有连成片状的菌落或在点样菌落蔓延生长时，该平板不宜计数。
六、细菌菌数报告
一般的报告方法是选取同一稀释度平均菌落数在30～300个之间的平板，作为菌落总数测定的范围，其中一个平板有较大片状菌落生长时，或两平板菌落数相差一倍以上，此稀释度不宜采用，稀释度的选择：
1．一个稀释度，平均菌落数在30～300个之间时，乘以稀释倍数报告。
2．两个稀释度，平均菌落数在30～300个之间，则应求出两者总菌数之比，比值小于或等于2应报告平均数，大于2则报告其中较小的数字。
3．有稀释度的平均菌落数均多于300个，应按稀释度最高的平均菌落数，乘以稀释倍数报告。
4．所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则按稀释倍数最低的平均菌落数，乘以稀释倍数报告。
5．所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一个稀释度大于300，而相邻的另一稀释度小于30，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
6．有稀释度均无菌生长，报告数为<10个/克。
菌数的报告，菌数在100以内时，按实有数报告之，大于100时，采用左端前2位数字，在前两位数字之后的数值，以四舍五入法计算，数字后面的空，可用10的指数表示。
如供试品经检验细菌数不符合要求，无特殊规定时应重新取样，依法复检两次，按三次结果平均值报告并判定合格与否。
答：先用肉眼观察，点数菌落数（霉菌不包括在内），然后持放大镜检查有无遗漏，各平板菌落计数后，求出同一稀释度各平板生长的平均菌落数，如平板中有连成片状的菌落或在点样菌落蔓延生长时，该平板不宜计数。六、细菌菌数报告 一般的报告方法是选取同一稀释度平均菌落数在30～300个之间的平板，作为菌落总数...
答：采用EasyTestTM测试片、3MPetrifilmTM测试片和国标的传统培养基法分别测定各个样品的菌落总数、大肠杆菌数和大肠菌群数,再将EasyTestTM测试片的结果分别与3MPetrifilmTM测试片和国家标准中的传统培养法得到的结果进行
答：二、需要做微生物限度检验的制剂有：(1).所有的中药制剂都要求做微生物限度检查（做过无菌检验的除外 (2).除中药制剂之外的丸剂、胶囊剂、颗粒剂、部分片剂不要求做微生物限度检查 (3).要求做微生物限度检查的制剂还有：1.片剂的口腔贴片、阴道片、阴道泡腾片、外用可溶片 2.栓剂 3.酊剂 4.软膏...
答：看颜色-- 真蜂蜜颜色呈透明或半透明色。真蜂蜜中因含有一些蛋白质、生物酶、矿物质和花粉等成分，所以看起来不是很清亮，呈白色、淡黄色或琥珀色，以浅淡色为佳。假蜂蜜由于是用白糖熬成或用糖浆冒充，故色泽鲜艳，一般呈浅黄或深黄色；看形状-- 真蜂蜜呈黏稠液体，挑起可见柔性长丝，不断流。假蜂...
答：微生物的特点三、微生物对产品的污染四、污染的预防与控制五、微生物检验的任务和意义六、微生物检验的对象七、微生物检验的质量管理八、微生物检验的发展趋势【思考题】阅读小知识：微生物的命名及分类项目二 微生物的形态结构【知识目标】【能力目标】【背景知识】一、细菌二、放线菌三、酵母菌四、...
答：可以。发达国家已经将果糖广泛应用于食品、医药、保健品生产中。果糖浆的消费量也呈较快的增长形式。一些发达国家在糖果与饮料中基本不用蔗糖而用果糖。如加拿大法律规定，所有饮料必须使用果葡糖浆。果糖产品在食品领域起初是作为蔗糖的替代性产品出现的。由于果糖产品具有蔗糖不可比拟的性能优势，果糖产品在...
答：菌落总数 白砂糖中规定≤350个／g。菌落总数是食糖卫生质量的一项重要指标，进行菌落总数测定是为了测定食糖被细菌污染的程度。大肠菌群 白砂糖中规定≤30个／100g。大肠菌群是根据卫生等方面的要求提出来的一组与粪便污染有关的细菌。食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，因而也就可能有肠道致...
答：3.卫生指标：氰化物(以HCN计)≤5毫克/升；二氧化硫(以游离SO2计)≤0.05克/千克；黄曲霉素素B1≤5微克/千克；砷(以As计)≤0.5毫克/千克；铅(以Pb计)≤1毫克/千克；铜(以Cu计)≤10毫克/千克；细菌总数≤50个/毫升；大肠菌群≤3个/100毫升；致病菌不得检出。
