微生物限度检查中的供试液配制成1:100的可不可以直接1ml的氯化钠加90ml的无菌水

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-26
中国药典微生物限度检查法的检验量和供试液制备

检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或cm²)。除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml;膜剂为100cm²;贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品,其检验量应增加20g或20ml(其中10g或10ml用于阳性对照试验)。检验时,应从2个以上最小包装单位中抽取供试品,膜剂还不得少于4片。一般应随机抽取不少于检验用星(两个以上最小包装单位)的3倍最供试品。 根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1小时。除另有规定外,常用的供试液制备方法如下。1.液体供试品取供试品10ml,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,混匀,作为l:10的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。2.固体、半固体或黏稠性供试品取供试品10g,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,用匀浆仪或其他适宜的方法,混匀,作为1:10的供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80,并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。3.需用特殊方法制备供试液的供试品(1)非水溶性供试品方法1 取供试品5g(或5ml ),加至含溶化的(温度不超过45℃)5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中,用无菌玻棒搅拌成团后,慢慢加人45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,边加边搅拌,使供试品充分乳化,作为1 : 20的供试液。方法2 取供试品10g,加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯(制法见附录XII A无菌检查法中供试品的无菌检查项下)和无菌玻璃珠的适宜容器中.必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量,充分振摇,使供试品溶解。然后加入45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,振摇5~10分钟,萃取,静置使油水明显分层,取其水层作为l : 10的供试液。(2)膜剂供试品取供试品100cm²,剪碎,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml(必要时可增加稀释液),浸泡,振摇,作为1:10的供试液。(3)肠溶及结肠溶制剂供试品取供试品10g,加pH6.8无菌磷酸盐缓冲液(用于肠溶制剂)或pH7.6无菌磷酸盐缓冲液(用于结肠溶制剂)至100ml,置45 ℃水浴中,振摇,使溶解,作为1 :10的供试液。(4)气雾剂、喷雾剂供试品取规定量供试品,置冰冻室冷冻约1小时,取出,迅速消毒供试品开启部位,用无菌钢锥在该部位钻一小孔,放至室温,并轻轻转动容器,使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部药液,加至适量的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(若含非水溶性成分,加适觉的无菌聚山梨酯80)中,混匀,取相当于10g或10ml的供试品,再稀释成1:10的供试液。(5)贴剂供试品取规定量供试品,去掉贴剂的保护层,放置在无菌玻璃或塑料片上,粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料(如无菌纱布)覆盖贴剂的粘贴面,以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体积并含有表面活性剂(如聚山梨酯80或卵磷脂)的稀释剂中,用力振荡至少30分钟,制成供试液。贴剂也可采用其他适宜的方法制备成供试液。(6)具抑菌活性的供试品当供试品有抑菌活性时,采用下列方法进行处理,以消除供试液的抑菌活性,再依法检查。常用的方法如下。①培养基稀释法取规定量的供试液,至较大量的培养基中,使单位体积内的供试品含量减少,至不含抑菌作用。测定细菌、霉菌及酵母菌的菌数时,取同稀释级的供试液2ml,每1ml供试液可等量分注多个平皿,倾注琼脂培养基,混匀,凝固,培养,计数。每1ml供试液所注的平皿中生长的菌落数之和即为1ml的菌落数,计算每1ml供试液的平均菌落数,按平皿法计数规则报告菌数;控制菌检查时,可加大增菌培养基的用量。②离心沉淀法取一定量的供试液,500转/分钟离心3分钟,取全部上清液混合。用于细菌检查。③薄膜过滤法见细菌、霉菌及酵母菌计数项下的“薄膜过滤法”。④中和法凡含汞、砷或防腐剂等具有抑菌作用的供试品,可用适宜的中和剂或灭活剂消除其抑菌成分。中和剂或灭活剂可加在所用的稀释液或培养基中。

可以根据样品的具体情况,在无菌情况下取25g样品,然后放到225ml/g的生理盐水中进行混匀或打匀,这就是10倍稀释,然后用干净吸管取1ml,放入9ml生理盐水中,用新的吸管混匀,这就是100倍稀释液;直接取1ml放入9ml生理盐水中,混匀,即1000倍稀释液,以此类推。

不可以。

最多是1比20的供试液

微生物限度检查中的供试液配制,首先将供试品配制成1:10的浓度,再吸取1:10的供试液加到9ml的PH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中,此浓度为1:100的浓度,如果直接取1ml样品,就违背了药典规定的10ml检验量的标准了。

  • 微生物限度检查中的氯化制是什么
    答:微生物限度检查中的氯化制是指供试液制备过程中加入氯化钠。根据查询相关资料信息,微生物限度检查常用的供试液制备方法是:取供试品10ml,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,混匀,作为1∶10的供试液。
  • 微生物限度检查中的供试液配制成1:100的可不可以直接1ml的氯化钠加90ml...
    答:不可以。最多是1比20的供试液
  • 怎样制备微生物回收实验用的供试液
    答:微生物限度检查中,供试液制备方法反复提到制成1:10供试液,如“水溶性供试品:取供试品,用PH7.0无菌气化钠-蛋白胨缓冲液,或PH7. 2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液”。那么这个1:10的供试液是怎么配制?下面两种做法:1、目前多数做法,固体样品,取10g,加...
  • 中国药典微生物限度检查法的供试品检查
    答:按计数方法的验证试验确认的程序进行供试液制备。用稀释液稀释成1:10、1:l0²、l:10³等稀释级的供试液。 根据菌数报告规则取相应稀释级的供试液1ml,置直径90mm的无菌平皿中,注人15~20ml温度不超过45 ℃的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基...
  • 微生物限度检查法 怎么做十倍递增稀 释 分别为1:10 1:100 1:1000
    答:可以根据样品的具体情况,在无菌情况下取25g样品,然后放到225ml/g的生理盐水中进行混匀或打匀,这就是10倍稀释,然后用干净吸管取1ml,放入9ml生理盐水中,用新的吸管混匀,这就是100倍稀释液;直接取1ml放入9ml生理盐水中,混匀,即1000倍稀释液,以此类推。
  • 微生物限度检查应该在什么环境下操作
    答:微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。虽然检查项目中没有ph的检查,但是项目具体操作中有ph的要求,如:液体供试品:取供试品10ml,加pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,混匀,作为1∶10 的供试液。
  • 克拉霉素微生物限度检验,克拉霉素不溶于水要怎么做才好呢?
    答:方法1 取供试品5g(或5ml ) ,加至含溶化的(温度不超过45℃ )5g司盘80 、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80 无菌混合物的烧杯中,用无菌玻棒搅拌成团后,慢慢加人45 ℃ 的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml ,边加边搅拌,使供试品充分乳化,作为1 : 20 的供试液。方法2 取供试...
  • 微生物限度为什么只验证1:10
    答:微生物限度是指一种药品中允许存在的微生物数量的限制,通常以菌落总数和特定微生物数量为标准。而验证1:10的方法是将一部分药物样品与10倍体积的培养基混合,然后进行培养,以便检测微生物的存在。这种方法可以检测到微生物的数量,同时还可以检测到其他微生物的存在。此外,这种验证方法也可以检测到微生物...
  • 纯化水微生物限度检查方法
    答:4.10微生物限度(薄膜过滤法)4.10.1取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液,加至适量的稀释剂中,混匀,过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时,可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜,冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。...
  • ...微生物检测的标准。我觉得那个药典微生物限度检验不怎么好。_百度知...
    答:一、标准 细菌数:≤500 cfu /100cm2,霉菌和酵母菌数≤50 cfu /100cm2,大肠埃希菌不得检出 。二、供试液制备:取本品用开口面积为20cm2的灭过菌的金属模板压在内层面上,将无菌棉签用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稍沾湿,在板孔范围内擦抹5次,换1支棉签再擦抹5次,每个位置用2支棉签...