如何利用紫外线作为诱变育种的诱变剂

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-24
什么是诱变育种?常用的诱变剂有哪些?

用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变进行的筛选,称为诱变育种 诱变剂:物理:紫外,X射线,β射线,快中子等 化学:硫酸二乙酯(EDS),亚硝基胍等

紫外线是一种最常用有效的物理诱变因素,其诱变效应主要是由于它引起DNA结构的改变而形成突变型。紫外线诱变,一般采用15W或30W紫外线灯,照射距离为20-30cm,照射时间依菌种而异,一般为1-3min,死亡率控制在50%-80%为宜。被照射处理的细胞,必须呈均匀分散的单细胞悬浮液状态,以利于均匀接触诱变剂,并可减少不纯种的出现。同时,对于细菌细胞的生理状态则要求培养至对数期为最好

紫外线是波长136~390毫微米的短于紫外波长的射线,它是一种非电离辐射,能使被照射物质的分子或原子中的内层电子提高能级跃迁到能量高的外层轨道(称为激发),导致分子的理化变化。DNA分子上的碱基对强烈吸收紫外线,而且嘧啶比嘌呤敏感100倍。紫外线辐射能引起DNA链的断裂、DNA分子内和分子间的交联、核酸与蛋白质的交联,以及胞嘧啶和尿嘧啶的水合作用等,但最主要的则是形成嘧啶二聚体,他会阻碍双链的解链和复制,阻碍碱基的正常配对,从而导致基因突变。它的遗传效应主要是引起GC→AT 的转换或移码突变。由于存在光复活作用,即白光照射能活化光激活酶并将嘧啶二聚体解开而使DNA恢复正常,故辐照和处理后的培养应避免可见光照射(应在红光下操作)。
测定紫外光的剂量有直接法(以尔格/平方毫米表示绝对剂量)和间接法(以辐照时间或致死率作为相对剂量)两种。微生物所受射线的剂量决定于灯的功率、照射距离和时间。
如果功率和距离是固定的话,则剂量就和照射的时间成正比,故照射时间的长短可作为相对剂量。一般用15W的紫外灯,距离固定在30厘米左右,选用致死率达90~99.9%所需的辐射时间进行诱变处理。但各类微生物所需的最适时间不同,一般营养体需辐照3~5分钟,芽孢要10分钟,芽孢杆菌的营养体要1~3分钟,革兰氏阳性菌和无芽孢菌较易杀死,用30秒,放线菌的分生孢子用30秒~2分钟。
辅射不宜在肉汤等成分复杂的液体中进行,以免化学反应的干扰;同时要有电磁搅拌设备,以求照射均匀,尤其在菌液浓度较大或菌体、孢子等较大而重时很容易在处理期间发生沉降,此时电磁搅拌更显重要。照射前紫外灯宜先开灯预热20~30分钟,使光波稳定。

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    答:一般用15W的紫外灯,距离固定在30厘米左右,选用致死率达90~99.9%所需的辐射时间进行诱变处理。但各类微生物所需的最适时间不同,一般营养体需辐照3~5分钟,芽孢要10分钟,芽孢杆菌的营养体要1~3分钟,革兰氏阳性菌和无芽孢菌较易杀死,用30秒,放线菌的分生孢子用30秒~2分钟。辅射不宜在肉汤等...
  • 简述诱变育种的操作方法和步骤!
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    答:紫外线诱变,一般采用15W或30W紫外线灯,照射距离为20-30cm,照射时间依菌种而异,一般为1-3min,死亡率控制在50%-80%为宜。被照射处理的细胞,必须呈均匀分散的单细胞悬浮液状态,以利于均匀接触诱变剂,并可减少不纯种的出现。同时,对于细菌细胞的生理状态则要求培养至对数期为最好 ...
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    答:最佳回答:采用15min紫外线照射。通过紫外线诱变某菌株确定诱变剂量可以采用15min紫外线照射。确定了菌株的最佳诱变剂量,即采用15min紫外线照...百度知道 大家还在搜 紫外诱变的方法是什么 育种出发菌的紫外诱变 紫外诱变中如何防止光复活现象 紫外诱变后培养的注意事项 紫外诱变在液体...
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    答:盐酸羟胺是一种还原剂,常用于C位置,促使G-C变为A-T。复合使用不同诱变因子或重复使用同种因子可增强效果。例如,顾正华等人通过多次DMS和NTG处理,成功获得了L-组氨酸产生菌。选择诱变剂时,需要考虑其专一性以及环境条件等因素,因为这影响突变类型。远紫外光是最通用的诱变剂,但要注意其可能带来的...
  • 诱变育种的流程图
    答:诱变育种的流程如下:一、选择适合的诱变剂 根据实验目的和需求,选择适合的诱变剂,如物理因素(如X射线、紫外线、激光等)或化学因素(如亚硝酸、碱基类似物、硫酸二乙酯、秋水仙素等)。二、制备诱变剂 按照诱变剂的使用说明,制备适量的诱变剂。三、处理生物材料 将生物材料(如种子、幼苗、微生物等...