简述诱变育种的操作方法和步骤！

简述诱变育种的途径有哪些

1、育种的根本目的是培育具有优良性状(抗逆性好、品质优良、产量高)的新品种,以便更好地为人类服务.
2、选择育种方法要视具体育种目标要求、材料特点、技术水平和经济因素,进行综合考虑和科学决策：
①一般作物育种可选杂交育种和单倍体育种；
②为得到特殊性状可选择诱变育种(如航天育种)或多倍体育种；

具体步骤如下：
　　 经诱变处理产生的诱变一代，以M1表示。由于受射线等诱变因素的抑制和损伤，M1的发芽率、出苗率、成株率、结实率一般较低,发育延迟,植株矮化或畸形，并出现嵌合体。但这些变化一般不能遗传给后代。诱变引起的遗传变异多数为隐性，因此M1一般不进行选择,而以单株、单穗或以处理为单位收获。
诱变二代(M2)是变异最大的世代,也是选择的关键时期,可根据育种目标及性状遗传特点选择优良单株（穗）。多数变异是不利的，但也能出现早熟、杆矮、抗病、抗逆、品质优良等有益变异，变异频率约为0.1～0.2%。
诱变三代（M3）以后,随着世代的增加,性状分离减少，有些性状一经获得即可迅速稳定。经过几个世代的选择就能获得稳定的优良突变系，再进一步试验育成新品种。具有某些突出性状的突变系，还可用作杂交亲本。

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一、实验目的和内容目的：以紫外线诱变获得用于酱油生产的高产蛋白酶菌株为例，学习微生物诱变育种的基本操作方法。内容：1．对米曲霉(Aspergillsoryzae)出发菌株进行处理，制备孢子悬液。2．用紫外线进行诱变处理。3．用平板透明圈法进行两次初筛。4．用摇瓶法进行复筛及酶活性测定。二、实验材料和用具米曲霉斜面菌种；豆饼斜面培养基、酪素培养基、蒸馏水、0.5%酪蛋白；三角瓶(300mL、500mL)、试管、培养皿(9cm)、恒温摇床、恒温培养箱、紫外照射箱、磁力搅拌器、脱脂棉、无菌漏斗、玻璃珠、移液管、涂布器、酒精灯。三、操作步骤(一)出发菌株的选择及菌悬液制备1．出发菌株的选择可直接选用生产酱油的米曲霉菌株，或选用高产蛋白酶的米曲霉菌株。2.菌悬液制备取出发菌株转接至豆饼斜面培养基中，30℃培养3～5d活化。然后孢子洗至装有1mL0.lmol/LpH6.0的无菌磷酸缓冲液的三角瓶中(内装玻璃珠，装量以大致铺满瓶底为宜)，30℃振荡30min，用垫有脱脂棉的灭菌漏斗过滤，制成把子悬液，调其浓度为106～108个/mL，冷冻保藏备用。(二)诱变处理用物理方法或化学方法，所用诱变剂种类及剂量的选择可视具体情况决定，有时还可采用复合处理，可获得更好的结果。本实验学习用紫外线照射的诱变方法。1．紫外线处理打开紫外灯(30W)预热20min。取5mL菌悬液放在无菌的培养皿(9cm)中，同时制作5份。逐一操作，将培养皿平放在离紫外灯30cm(垂直距离)处的磁力搅拌器上，照射lmin后打开培养皿盖，开始照射，与照射处理开始的同时打开磁力搅拌器进行搅拌，即时计算时间，照射时间分别为15s、30s、lmin、2min、5min。照射后，诱变菌液在黑暗冷冻中保存1～2h然后在红灯下稀释涂菌进行初筛。2．稀释菌悬液按10倍稀释至10-6，从10-5和10-6中各取出0.lmL加入到酪素培养基平板中(每个稀释度均做3个重复)，然后涂菌并静置，待菌液渗入培养基后倒置，于30℃恒温培养2～3d。(三)优良菌株的筛选1.初筛首先观察在菌落周围出现的透明圈大小，并测量其菌落直径与透明圈直径之比，选择其比值大且菌落直径也大的菌落40～50个，作为复筛菌株。2．平板复筛分别倒酪素培养基平板，在每个平皿的背面用红笔划线分区，从圆心划线至周边分成8等份，1～7份中点种初筛菌株，第8份点种原始菌株，作为对照。培养48h后即可见生长，若出现明显的透明圈，即可按初筛方法检测，获得数株二次优良菌株，进大摇瓶复筛阶段。3．摇瓶复筛将初筛出的菌株，接入米曲霉复筛培养基中进行培养，其方法是，称取麦秩85g，豆饼粉(或面粉)15g，加水95～110mL(称为润水)，水含量以手捏后指缝有水而不下滴为宜，于500mL三角瓶中装入15～20g(料厚为1～1.5cm)，121℃湿热灭菌30min，然后分别接入以上初筛获得的优良菌株，30℃培养，24h后摇瓶一次并均匀铺开，再培养24～48h，共培养3～5d后检测蛋白酶活性。4．蛋白酶的测定方法(1)取样：培养后随机称取以上摇瓶培养物1g，加蒸馏水100mL，(或200mL),40℃水浴，浸酶1h，取上清浸液测定酶活性。另取lg培养物于105℃烘干测定含水量。(2)酶活性测定：30℃pH7.5条件下水解酪蛋白(底物为0.5%酪蛋白)，每分钟产酪氨酸1μg为一个酶活力单位。计算公式为：(A样品OD680nm值-A对照OD680nm值)×K×V/t×NK：标准曲线中光吸收为“1”时的酪氨酸微克数；V：酶促反应的总体积；t：酶促反应时间(min)；N：酶的稀释倍数。5．谷氨酸的检测此项检测也是酱油优良菌株的重要指标之一。检测培养基：豆饼粉：麸夫=6：4，润水75%，121℃湿热灭菌30min。谷氨酸测定：于以上培养基中加入7%盐水(W/V)，40～45℃水浴，水解9d后过滤，以滤液检测谷氨酸含量(测压法)。四、注意事项1.紫外线照射时注意保护眼睛和皮肤。2.诱变过程及诱变后的稀释操作均在红灯下进行，并在黑暗中培养。五、实验报告1.试列表说明高产蛋白酶菌株的筛选过程和结果。2.你认为以上的筛选方法有什么优缺点，如何改进？六、问题和思考1．试述紫外线诱变的作用机理及其在具体操作中应注意的问题。2．为什么在诱变前要把菌悬液打散和培养一段时间？注：筛选菌株数的计算若按突变率为0.01计算，则一次筛选可取250—300个菌落，第一次筛选后可多选几株高产株，而二级筛选为重点阶段，其最适量可参考以下计算方法：如初筛菌株数为200株，二次筛选欲选株数为2株，则二级应选(200×2)1/2，为20株，这样的数量选择，使有可能从较少的数量中获得相对较多的优良菌株。

人工诱变的常用方法是
答：人工诱变 在人为的条件下,利用物理、化学等因素，诱发生物产生突变，从中选择、培育动植物和微生物的新品种。诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异，再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株，进而培育成新的品种或种质的育种方法。它是继选择育种和杂交育种之后发展起来的一项现代育种...

微生物育种的诱变育种
答：电离辐射有一定的局限性，操作要求较高，且有一定的危险性，通常用于不能使用其他诱变剂的诱变育种过程。1.1.3离子注入离子注入是20 世纪80 年代初兴起的一项高新技术，主要用于金属材料表面的改性。1986 年以来逐渐用于农作物育种，近年来在微生物育种中逐渐引入该技术[3]。离子注入时，生物分子吸收能量...

诱变育种的方法
答：诱变育种的方法有物理诱变和化学诱变。一、物理诱变 1、物理诱变因素的辐射能对植物诱发化学反应，结果造成DNA结构的变化。这些变化如果在DNA中保持重复，证明是突变。2、物理诱变剂 （1）紫外灯发出的紫外线（UV）照射：紫外线的能量和穿透力低，能成功地用于处理花粉粒。（2）电磁辐射：x射线又称阴极...

高中生物:设计一个实验,利用诱变育种的方法,获得产生纤维素酶较多的菌株...
答：1 配制含纤维素的培养基 2 接种细菌 3 诱变处理：如紫外线照射 4 观察透明圈大小，选出菌株 原理：纤维素被纤维素酶水解后变得透明

紫外线诱变育种的基本原理和主要步骤
答：另外二聚体的形成，会妨碍双链的解开，因而影响dna的复制和转录。总之紫外辐射可以引起碱基转换、颠换、移码突变或缺失,即是所谓的诱变。主要步骤：1．将细菌培养液以3000r／min离心5min，倾去上清液，将菌体打散加入无菌生理盐水再离心洗涤。2．将菌悬液放入一已灭菌的，装有玻璃珠的三角瓶内用手摇动...

诱变育种的基本环节有哪些?关键是什么
答：具体步骤如下：经诱变处理产生的诱变一代,以M1表示.由于受射线等诱变因素的抑制和损伤,M1的发芽率、出苗率、成株率、结实率一般较低,发育延迟,植株矮化或畸形,并出现嵌合体.但这些变化一般不能遗传给后代.诱变引起的遗传变异多数为隐性,因此M1一般不进行选择,而以单株、单穗或以处理为单位收获.诱变二...

杂交育种的常用方法和人工诱育种
答：（3）发生时期：有性生殖的四分体时期或减数第一次分裂后期 （4）优点：使同种生物的不同优良性状集中于同一个个体，具有预见性。（5）缺点：育种年限长，需连续自交才能选育出需要的优良性状。（6）举例：矮茎抗锈病小麦等 人工诱变育种 （1）原理：基因突变 （2）方法：辐射诱变，激光、化学物质...

诱变育种方法
答：诱变育种主要依赖物理和化学两种方法，其中物理诱变中辐射诱变是常见手段。辐射通过传递能量至生物体内，引发分子电离和激发，产生自由原子或自由基，引发分子结构变化，进而影响生化过程，如DNA合成和酶活性，导致染色体突变和基因突变。选择综合性状优良但有缺陷的品种作为处理材料，考虑到遗传背景和对辐射的反应...

诱变育种的方法
答：用射线或激光照射。诱变育种是利用物理因素（如紫外线、X光线、Y射线、激光等）或化学因素（如亚硝酸、硫酸二乙酯等）处理生物，使生物发生基因突变。花药离体培育是单倍体育种常用的方法。

诱变育种常用的方法有???
答：诱变育种：是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质（DNA）的分子结构发生改变， 引起性状变异并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。物理方法：射线（紫外线、X光线、Y射线，中子线），激光微束，离子束，微波，超声波，热力等 化学诱变常用方法：浸渍法、涂抹法、滴液法、注射法、施...