细胞凋亡实验中细胞培养多长时间后可以收集细胞
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-07-02
细胞凋亡实验中细胞培养多长时间后可以收集细胞
细胞周期测定实验
答：PI染液的使用在细胞凋亡率测定中尤为重要，通过RNaseA、PBS配制并去除DNase活性，Triton X-100非固定剂则适用于-20℃乙醇固定。实验过程中，对照设置可根据研究需求调整，确保数据的准确性。最后，流式检测技术的细节不容忽视，RNA酶的处理时间通常在37度30分钟后再转移到4度30分钟，荧光染料低温染色可...
心血管系统的细胞凋亡
答：在心血管临床中报道细胞凋亡较早者是其与心律失常的关系。James曾从形态学上总结了自己近30年来对心脏传导系紊乱研究的病例,指出心脏电活动的紊乱有许多源于先天性,而且在多发性浦肯野细胞瘤、房室结先天性良 心血管系统性多囊瘤、某些类型的先天性心脏传导阻滞、房室结和希氏束在出生后的形态发生、Wolff-Parkinson...
...并进行相应处理,在相同且适宜的条件下培养一段时间,存活的细胞...
答：有核细胞与无核细胞每天都有死亡，不能确定是否是细胞凋亡，B错误；C、从培养第2天到第3天，无核细胞死亡很多，不能说明主要与实验中细胞膜损伤有关，因为缺乏相应的对照实验，C错误；D、从培养第4天到第10天，有核细胞每天只有少量死亡，其原因可能与细胞凋亡有关，D正确．故选：D．
细胞培养技术的增殖
答：指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。如：二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下可传30～50代，相当于150～300个细胞增殖周期，能维持一年左右的生命，细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段1.原代培养期(primary c...
细胞培养瓶培养的癌细胞多少天凋亡
答：首先衰肿瘤细胞尽管能增殖仍保留着代谢力产具抑制促进肿瘤性蛋白质能够旁泌形式影响邻近肿瘤细胞增殖促进肿瘤其衰细胞往往具凋亡抗性能够通度表达Bcl2抵抗凋亡故容易清除体期存肿瘤细胞组织培养占核位置首先癌细胞比较容易培养细胞前建立细胞系癌细胞系另外肿瘤类威胁疾病肿瘤细胞培养研究癌变机理、抗癌药检测、癌物极其重要...
测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定吗
答：测细胞凋亡，贴壁细胞dapi染色，最好是固定。DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。DAPI溶液使用步骤：固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，...
求助诱导细胞凋亡,Annexin
答：2、特殊细胞的染色方法：在消化或吹打时,有些细胞（如神经元细胞）很容易受到损伤,导致晚期凋亡或坏死比例非常高,不能反映真实结果.实验的解决方法：先低速离心,吸取细胞培养板中的液体,留少许液体,加入适量PI和Annexin-V染色10min后,将漂浮细胞吸至离心管中,离心洗涤两次,用PBS漂洗贴壁细胞两次,加胰酶...
如何用流式检测细胞凋亡
答：2. 为什么必须收集细胞上清？因为凋亡的细胞可能会脱壁，悬浮于培养基，所以必须收集上清再离心取沉淀，合并胰酶消化下来的细胞，不然检测出来的凋亡比例可能会减少。3. 为什么在染色后1h内就要上机检测？由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析；PI受时间的影响很大，因标记了PI...
细胞凋亡的检测
答：1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都适用),可与DNA染料...
植物细胞悬浮培养过程中为什么要控制细胞的密度
答：实验原理:植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养，在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并在振荡条件下培养一段时间后，可形成分散县浮培养物。良好的县浮培养物应具备以下特征：（1）主要有单细胞...
因为是诱导凋亡的实验，细胞加药处理后，贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮，而这部分细胞正是你需要的，所以加药处理完后要收集全部培养上清，少量PBS洗瓶内剩下的细胞，洗的PBS与之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完毕用之前收集的培养基中止消化。离心后PBS再洗一遍。离心，弃上清，细胞沉淀中加入70%
4度预冷的乙醇（PBS配制），4度放置不少于1小时（有的文献说是不少于15分钟）。之后离心去乙醇，PBS洗一遍后加入PI和DNAse，终浓度50
ug/ml，混匀，避光室温放置30
min后即可上流式细胞仪测定。
诱导凋亡实验细胞加药处理贴壁细胞力丧失脱壁漂浮部细胞需要所加药处理完要收集全部培养清少量PBS洗瓶内剩细胞洗PBS与前收集清合并胰酶消化消化完毕用前收集培养基止消化离PBS再洗遍离弃清细胞沉淀加入70% 4度预冷乙醇（PBS配制）4度放置少于1（文献说少于15钟）离乙醇PBS洗遍加入PIDNAse终浓度50 ug/ml混匀避光室温放置30 min即流式细胞仪测定
因为是诱导凋亡的实验，细胞加药处理后，贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮，而这部分细胞正是你需要的，所以加药处理完后要收集全部培养上清，少量PBS洗瓶内剩下的细胞，洗的PBS与之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完毕用之前收集的培养基中止消化。离心后PBS再洗一遍。离心，弃上清，细胞沉淀中加入70% 4度预冷的乙醇（PBS配制），4度放置不少于1小时（有的文献说是不少于15分钟）。之后离心去乙醇，PBS洗一遍后加入PI和DNAse，终浓度50 ug/ml，混匀，避光室温放置30 min后即可上流式细胞仪测定。答：PI染液的使用在细胞凋亡率测定中尤为重要，通过RNaseA、PBS配制并去除DNase活性，Triton X-100非固定剂则适用于-20℃乙醇固定。实验过程中，对照设置可根据研究需求调整，确保数据的准确性。最后，流式检测技术的细节不容忽视，RNA酶的处理时间通常在37度30分钟后再转移到4度30分钟，荧光染料低温染色可...
答：在心血管临床中报道细胞凋亡较早者是其与心律失常的关系。James曾从形态学上总结了自己近30年来对心脏传导系紊乱研究的病例,指出心脏电活动的紊乱有许多源于先天性,而且在多发性浦肯野细胞瘤、房室结先天性良 心血管系统性多囊瘤、某些类型的先天性心脏传导阻滞、房室结和希氏束在出生后的形态发生、Wolff-Parkinson...
答：有核细胞与无核细胞每天都有死亡，不能确定是否是细胞凋亡，B错误；C、从培养第2天到第3天，无核细胞死亡很多，不能说明主要与实验中细胞膜损伤有关，因为缺乏相应的对照实验，C错误；D、从培养第4天到第10天，有核细胞每天只有少量死亡，其原因可能与细胞凋亡有关，D正确．故选：D．
答：指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。如：二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下可传30～50代，相当于150～300个细胞增殖周期，能维持一年左右的生命，细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段1.原代培养期(primary c...
答：首先衰肿瘤细胞尽管能增殖仍保留着代谢力产具抑制促进肿瘤性蛋白质能够旁泌形式影响邻近肿瘤细胞增殖促进肿瘤其衰细胞往往具凋亡抗性能够通度表达Bcl2抵抗凋亡故容易清除体期存肿瘤细胞组织培养占核位置首先癌细胞比较容易培养细胞前建立细胞系癌细胞系另外肿瘤类威胁疾病肿瘤细胞培养研究癌变机理、抗癌药检测、癌物极其重要...
答：测细胞凋亡，贴壁细胞dapi染色，最好是固定。DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。DAPI溶液使用步骤：固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，...
答：2、特殊细胞的染色方法：在消化或吹打时,有些细胞（如神经元细胞）很容易受到损伤,导致晚期凋亡或坏死比例非常高,不能反映真实结果.实验的解决方法：先低速离心,吸取细胞培养板中的液体,留少许液体,加入适量PI和Annexin-V染色10min后,将漂浮细胞吸至离心管中,离心洗涤两次,用PBS漂洗贴壁细胞两次,加胰酶...
答：2. 为什么必须收集细胞上清？因为凋亡的细胞可能会脱壁，悬浮于培养基，所以必须收集上清再离心取沉淀，合并胰酶消化下来的细胞，不然检测出来的凋亡比例可能会减少。3. 为什么在染色后1h内就要上机检测？由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析；PI受时间的影响很大，因标记了PI...
答：1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都适用),可与DNA染料...
答：实验原理:植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养，在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并在振荡条件下培养一段时间后，可形成分散县浮培养物。良好的县浮培养物应具备以下特征：（1）主要有单细胞...
