细胞原代培养实验中怎样克服污染?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-28
如何避免原代培养细胞时,取材过程的污染

建议:处死小鼠后, 用70%乙醇好好清洗和消毒, 去掉最上层细胞,取下层细胞.(也就是取一点点内部点的组织)


原代细胞产品专家齐氏生物提醒,原代细胞培养注意事项,供参考:
1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。
2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。
3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。
贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。
4、培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同,根据所分离细胞的特性选择。

死小鼠后,将口腔完全翻开如何?用70%乙醇好好清洗+消毒.去掉最上层细胞,取下层细胞.(也就是取一点点内部点的组织)原代细胞培养,起始细胞尽量少,用双抗培养基应该能得到目的培养物.

首先外植体 用具都要严格依照实验操作要求杀毒灭菌。
实验超净工作台先开半个小时以上,还要用酒精消毒擦拭工作台面。镊子 手术刀都要用酒精灯烧炙杀菌,禁止手过多的在已消毒的器皿上空晃动,禁止手接触已消毒器具。把外植体植入培养基里的时候,尽量快,不能让镊子接触瓶口和瓶内壁,也不能接触到培养基。一般情况下将外植体45度角插入培养基。
切记勿让消毒用的升汞接触皮肤!

首先在采样过程中,必须做好无菌工作,将待采样动物用75%酒精消毒;采样中所要用到的器械都在高压灭菌,玻璃器皿要泡酸;采样过程做无菌操作。

  • 动物细胞的原代培养实验中为克服微生物污染采取了哪些措施
    答:开始操作前要用75%酒精棉球擦手。因此,防止污染,以防止下落细菌的污染、从操作者做起(1)进无菌室前要彻底洗手,如发现原有的细胞遗传物发生改变,金属器械不能在火焰中长时间烧灼、从物品试用中心实验方法资讯采购保障中心品牌专区NSFC如何预防细胞培养的污染问题2009-10-11 00。同时:75%的酒精搽拭...
  • 如何防止细胞培养出现污染
    答:防止细胞培养出现污染的方法如下:1、从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前,准备好所有实验所需物品,以减...
  • 细胞原代培养实验中怎样克服污染?
    答:首先外植体 用具都要严格依照实验操作要求杀毒灭菌。实验超净工作台先开半个小时以上,还要用酒精消毒擦拭工作台面。镊子 手术刀都要用酒精灯烧炙杀菌,禁止手过多的在已消毒的器皿上空晃动,禁止手接触已消毒器具。把外植体植入培养基里的时候,尽量快,不能让镊子接触瓶口和瓶内壁,也不能接触到培养基。
  • 如何在细胞培养操作时减少污染现象
    答:宁可手套酒精味多一些。拿培养瓶和培养液时候请托下面拿,切忌不要拿瓶颈部位。最后是每天实验开始时候,超净台/实验间照20分钟紫外是不错的选择。有一点要注意的是,超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染。尽量避免操作时候说话,尤其是严禁细胞房打闹说笑。每天观察细胞状态,不要总想...
  • 如何避免原代培养细胞时,取材过程的污染
    答:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4、...
  • 原代培养的注意事项
    答:一、注意污染1、严格进行动物皮肤消毒,使用三套器械取材。新生动物皮肤先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、严格进行无菌操作,防止细菌、霉菌、支原体污染,避免化学物质污染。3、吸取液体前,瓶口和吸管进行火焰消毒;吸取液体时,避免瓶口和吸管碰撞。4、离心管入台前,管...
  • 如何预防和去除细胞培养过程中的污染
    答:因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过...
  • 细胞培养过程中污染是如何发生的?要怎么有效避免培养箱污染呢?
    答:做好实验规划,减少培养箱门开关的频率,取放细胞时需佩戴洁净的手套,并用少量的 70% 医用酒精(过多会导致培养箱中残留乙醇蒸汽)擦拭培养瓶/皿表面,从而降低细胞培养箱污染的风险。3、定期维护和灭菌,预防污染 定期清洁维护,培养箱内用水灭菌后使用并定期更换,一旦发生污染,及时灭菌。选择培养箱...
  • 在细胞培养的过程中避免污染的关键环节有哪些
    答:1、实验人员的操作 2、细胞培养体系 3、细胞培养环境 4、细胞来源也会有所影响 为了减少污染对细胞培养的影响,必须建立细胞冻存库。细胞冻存库应该分主细胞库和工作细胞库,当需要做实验时从主细胞库中复苏细胞建立工作细胞库。每一个冻存标本都应明确记录细胞的性质、代数及有无污染。同时还应建立...
  • 细胞培养污染如何防止?
    答:细胞培养防止污染的操作方法:1、准备工作:准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。2、取材:在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后...