昆虫细胞培养手册
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-28
昆虫细胞培养，打开生物工程新领域
自1915年昆虫细胞培养诞生以来，历经百年的探索与发展，如今在生物工程领域中占据着重要地位。特别是在昆虫杆状病毒表达载体系统（BEVS）的推动下，昆虫体外培养日益受到科研人员的青睐。其中，草地贪夜蛾的Sf9和Sf21细胞株，以及粉纹夜蛾的Tn5B1-4（商业名High Five）细胞株，是最常用的实验伙伴。
Sf9细胞的培养要点揭秘
以Sf9细胞为例，它的生长特性尤为关键。这种昆虫细胞来源于雌性草地贪夜蛾卵巢，是杆状病毒表达系统中的理想宿主。传统的静置培养需在非贴壁环境中进行，而Sf9细胞则可适应悬浮生长，这得益于它们对温度的高度敏感性。
细胞特性
- 温度掌控：Sf9细胞的理想生长温度在26~28℃，低于此值生长减缓，但升温后会逐渐恢复；过高温度则造成不可逆损害。
- 培养体系适应：Sf9细胞可适应多种培养基，如Grace's Insect Medium、SF900 II等，可根据实验需求选择合适的体系。
培养注意事项
- 传代、冻存复苏需遵循哺乳动物细胞的操作原则，但要注意昆虫细胞对环境和操作条件的特殊要求，如非湿化环境和无CO2培养。
- 选择专用培养基，关注细胞密度和生长阶段，以确保最佳生长状态。
- 悬浮培养时，要温和处理，避免机械损伤。
知识拓展：褐飞虱原代细胞培养法
在常规昆虫细胞培养之外，褐飞虱细胞培养提供了独特的研究平台。许益鹏等人的方法中，首先通过精细的操作获取3-4天发育的褐飞虱胚胎，然后配制特制的细胞培养基，通过消化法分离胚胎组织，再进行原代培养，整个过程均需严格遵循无菌操作。
声明：以上内容引自许益鹏等人的专利，尊重知识产权。欲了解更多详情，可参考其发明专利。
探索昆虫细胞的奥秘，从培养开始
答：自1915年昆虫细胞培养诞生以来，历经百年的探索与发展，如今在生物工程领域中占据着重要地位。特别是在昆虫杆状病毒表达载体系统（BEVS）的推动下，昆虫体外培养日益受到科研人员的青睐。其中，草地贪夜蛾的Sf9和Sf21细胞株，以及粉纹夜蛾的Tn5B1-4（商业名High Five）细胞株，是最常用的实验伙伴。Sf9细胞...
答：在操作上，sf9细胞的贴壁培养需谨慎处理，贴壁细胞在含有10%胎牛血清的培养基中生长，传代时需轻轻吹打而不需胰酶消化。而细胞冻存和复苏过程则要求精确计数、调整细胞密度和加入适当比例的DMSO以保护细胞活性。最后，对于昆虫细胞培养，需特别注意环境条件、专用培养基的选择、细胞密度的控制，以及在悬浮和...
答：取昆虫血淋巴液，与抗凝剂混匀后离心，去上清，用含15％犊牛血清及100U／mL青霉素，100μg／mL链霉素的L－15培养液悬浮血淋巴细胞，移至培养瓶，（28±1）℃培养，细胞于12h内贴壁，形态不一，可见透明细胞，小颗粒细胞及大颗粒细胞3种类型多数不分裂，可维持15d以上。上述方法重复至少25次，结果稳定...
答：细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。液体培养基用于大规模的工业生产以及生理代谢等基本理论的研究工作。液体培养基中加入一定的凝固剂(如琼脂)或固体培养物(如麸皮、大米等)便成为固体培 培养基 养基。固体培养基为细...
答：我们实验室养的sf9和BmN细胞。所用培养基为TC-100（粉末，按配方调成澄清溶液，灭菌，分装备用），分装时按10%比例加入灭活小牛血清，4度保存备用。细胞26度培养，每4天换一次培养基。具体还想知道什么，可以联系我！
答：1. 不需要普通细胞那么高级的培养箱，不需要CO2，温度为27度。2. 养细菌的培养箱就可以养昆虫细胞。当然，细胞培养箱也可以用。3. 昆虫细胞液会贴壁，不过贴得不牢。4. 要无菌操作，要超净工作台。5. 不知道融合基因标签是不是指tag，如His-tag、flag-tag 6-10个氨基酸序列，便于纯化和检测。&...
答：昆虫细胞生物技术目录涵盖了多个关键领域，以下是其中的主要内容概述：1. 昆虫细胞培养技术详细阐述了细胞的基本概念，包括细胞形态、生长和增殖过程，以及环境因素对增殖的影响。培养过程包括基本操作，如原代培养、传代培养，以及细胞冻存与复苏。研究方法主要包括细胞形态观察、动力学研究、活力测定、克隆分析...
答：大规模昆虫细胞培养技术及其在工业生产中的应用，为生物技术产业开辟了新的可能。最后，昆虫细胞在苏云金杆菌毒素研究中的应用，展现了其在生物农药和生物防治策略中的关键作用。这本著作对于生物学专业、农林院校植物保护专业的教师、研究生和相关研究人员来说，是一份极具实用价值的参考资料。
答：TNM-FH 无血清培养基 (液体) 改进的GRACE培养基,特别适用于培养richoplusia ni细胞.若加入10%的昆虫专用特级胎牛血清(SH30070I),可用于多种昆虫细胞的培养,尤其适用于专用无血清培养基SFX-Insect之前细胞的前期培养.
答：4到5天。杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统，培养4到5天。昆虫细胞表达系统（即杆状病毒表达系统）独特的生物学特性，日益受到人们的重视。昆虫细胞培养及操作较简便，成本低，因此被广泛用于生产基因工程。
