sf9细胞培养攻略!

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-30
昆虫细胞在现代农业生物技术领域扮演着重要角色,它们是真核细胞的精华,能够通过培养为病毒制造平台,这些病毒对昆虫具有毁灭性,但对人类和动植物却无害,从而成为高效的生物杀虫工具。sf9,这个备受科研者青睐的细胞,是Spodoptera frugiperda的细胞简称,即草地贪夜蛾细胞,以其高效性和广泛应用而闻名。其他常用的昆虫细胞如LD652Y、sf21和High Five,各有其独特优势。

源自美国农业部昆虫病理实验室的sf9细胞系,是杆状病毒表达的理想选择,源自秋蝇蛹卵巢组织的IPLBSF-21细胞系。这种细胞的独特之处在于其规则的球形结构,既可悬浮培养,也可贴壁生长,最适宜的生长条件是pH6.2,温度保持在27~28℃,3天左右进行一次传代。

sf9细胞的特点在于它的多功能性:易于形成单层或悬浮培养,适用无血清培养基,而且是转染、纯化和表达高滴度病毒的理想平台,还能进行重组蛋白的表达。这种系统的优势在于其高表达水平、快速生长速度和接近哺乳动物细胞的蛋白糖基化,便于蛋白结构测定,且病毒纯化过程简便,无需繁琐的空斑分析。

尽管如此,sf9-杆状病毒表达系统并非没有局限。它依赖于病毒启动子调控蛋白表达,细胞在病毒感染后期可能面临死亡风险。此外,培养过程中的高昂成本和病毒需求量大,以及病毒侵染可能导致细胞裂解和蛋白降解,都是需要考虑的挑战。

在操作上,sf9细胞的贴壁培养需谨慎处理,贴壁细胞在含有10%胎牛血清的培养基中生长,传代时需轻轻吹打而不需胰酶消化。而细胞冻存和复苏过程则要求精确计数、调整细胞密度和加入适当比例的DMSO以保护细胞活性。

最后,对于昆虫细胞培养,需特别注意环境条件、专用培养基的选择、细胞密度的控制,以及在悬浮和贴壁培养间的转换策略。每个步骤都关乎细胞的健康和表达效果,因此,科学而细致的操作是成功的关键。

  • sf9细胞培养攻略!
    答:在操作上,sf9细胞的贴壁培养需谨慎处理,贴壁细胞在含有10%胎牛血清的培养基中生长,传代时需轻轻吹打而不需胰酶消化。而细胞冻存和复苏过程则要求精确计数、调整细胞密度和加入适当比例的DMSO以保护细胞活性。最后,对于昆虫细胞培养,需特别注意环境条件、专用培养基的选择、细胞密度的控制,以及在悬浮和...
  • 昆虫细胞培养手册
    答:温度掌控:Sf9细胞的理想生长温度在26~28℃,低于此值生长减缓,但升温后会逐渐恢复;过高温度则造成不可逆损害。培养体系适应:Sf9细胞可适应多种培养基,如Grace's Insect Medium、SF900 II等,可根据实验需求选择合适的体系。培养注意事项 传代、冻存复苏需遵循哺乳动物细胞的操作原则,但要注意昆虫细...
  • SF9昆虫细胞的大小
    答:koh调ph到6.2-6.4过滤除菌,4℃保存。完整培养液在使用前加入10%热灭活的胎牛血清。传代:用吸液管吹洗细胞使其悬浮,或用手从侧面拍打细胞培养瓶(当用大细胞培养瓶时)重悬细胞。(当用来接种的细胞重悬前就有很多细胞漂浮,要吸掉漂浮细胞及旧培养液,加入新培养液重悬细胞。按合适比例传代细胞到...
  • 重组蛋白制备过程中用到哪些化学试剂
    答:1. 在悬浮培养液中培养Sf9细胞,并使之适应无血清培养液。2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增Sf9细胞,将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂,另用一平盖接在另一侧臂。将一段短管(约6英寸或15 cm)装在通气孔中,末端连接一滤器,借助张力器用管索将管子与通气孔和滤器固牢。3. ...
  • 我需要知道昆虫细胞培养的相关实用技术和操作
    答:我们实验室养的sf9和BmN细胞。所用培养基为TC-100(粉末,按配方调成澄清溶液,灭菌,分装备用),分装时按10%比例加入灭活小牛血清,4度保存备用。细胞26度培养,每4天换一次培养基。具体还想知道什么,可以联系我!
  • 用sf900系列培养基培养sf9细胞时需要加血清吗
    答:用sf900系列培养基培养sf9细胞时需要加血清 SF培养基需要具体产品具体分析,一般它与grace培养基的区别就是需不需要另行添加血清组分。grace培养基 Grace’s Insect Cell Culture Medium 是无血清培养基,使用时需要补充血清,从而为细胞提供必要的营养因子。SF培养基这个名字很常见,举例,义翘的SF培养基(...
  • sf9细胞培养早期可以频繁换液吗
    答:一般细胞培养早期(刚复苏),不推荐频繁操作,并且细胞接种密度不能太低,否则细胞不容易长起来,推荐1.0*10e6。如果在后期需要用无血清培养基培养,推荐用义翘的SIM SF培养基。
  • 细胞冻存液的组成是 DMSO DMEM 和血清,请问这个比例是多少呢?_百度知 ...
    答:冻存液就用新鲜的细胞培养基,加DSMO至终浓度达5—20%。
  • 有关SF9细胞培养是否出现污染
    答:个体细小,有增多趋势。镜下看时,要将培养瓶用酒精棉球擦干净,以防止与瓶外尤其瓶底外面生长的菌丝相混淆。真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物,最小直径0.2μm,一般过滤除菌无法去除它,光镜下难以看清它的...
  • sf9细胞怎么邮寄
    答:sf9细胞可以通过以下步骤邮寄:1. 将sf9细胞的培养液放进快递盒子。2. 在盒子四周铺设5-10kg干冰。3. 将盒子蜜蜂,下单邮寄,要选择快件运输,并确保在1-2天内到达。sf9细胞需要比较特殊的处理和运输,建议选择专业的物流公司或者使用特殊的配送服务来确保细胞在运输过程中安全且保持活性。