微生物（菌种筛选）

微生物菌种的筛选

我认为两者都可以用构建基因文库的方法来筛选出其相关的基因。
基因文库的构建，大致可分为5个步骤：
（1）染色体DNA的片段化 从某菌株中提取其染色体DNA，将其切割成一定大小的片段，插入噬菌体载体后被包装成噬菌体颗粒。
（2）载体DNA的制备 选择适当的噬菌体载体用限制酶切开，得到左、右两臂，以便分别与染色体DNA片段的两端连接。
（3）体外连接与包装 将染色体DNA片段与载体DNA片段用T4 DNA连接酶连接。然后重组体DNA与噬菌体包装蛋白在体外进行包装。
（4）重组噬菌体感染大肠杆菌 将包装得到的重组噬菌体在大肠杆菌内经增殖并裂解宿主细胞，产生的溶菌产物组成重组噬菌体克隆库，即基因文库。
（5）基因文库的鉴定和扩增 对于文库的鉴定，可以随机挑选一定数量的克隆，用限制酶切、PCR或其他方法分析其重组体DNA来进行。
仅供参考！！！

(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一炭源 高温(3)高压蒸汽灭菌 无菌(4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作；或用接种针划下一区域前接种针没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种针进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH

1.(1)从亚硝酸盐含量较高的环境中采集土样；（2)配置培养基，制备平板，一种仅以亚硝酸盐作为唯一氮源（A)，另一种不含任何氮源作为对照（B);(3)将样品适当稀释(十倍稀释法），涂布A平板；（4）将平板至于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生；（5）将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，至于相同温度条件下培养；（6）挑去在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用亚硝酸盐作为唯一氮源的微生物除培养
2.A将他们混合培养，在培养基上长出的菌落为重组菌株。B如果在混合培养期间加入DNAase，在培养基上无重组菌落出现这说明上述重组是因细胞间的接触转化所致；如果仍有重组菌落长生，说明可能是由于接合和转导所致。C利用只能持留细菌的滤板相隔的U型管进行试验，如果在基本培养基上不产生重组菌落，则判断为接合作用，如果产生重组菌落，则又有两种可能，即转化或转导。D利用能持留细菌和细菌病毒而不能持留DNA的滤板相隔的U型管进行试验，如果不产生重组菌落则为转导，如果仍产生重组菌落则为转化

1：为什么这个基本问题要问那么多次？麻烦下次提问前先搜索。用亚硝酸盐作为培养基中的唯一氮源就行了么。
2：转导容易，如果是转导混合后除了原型的菌落外还应该有一些微小的菌落。因为转导多是流产转导。不是转导的话设两株菌是A和B，取A的菌液破胞处理后和B菌液混合，如果能在基本培养基上生长，说明是转化，因为A菌都已经死亡，不可能结合；反过来B破胞和A混合再做一次，最后如果任何一种菌破胞都不能出现原型菌落，就说明是结合啦。

嗯，貌似我的方法更简单。

1,先设计培养基配方,用亚硝酸盐作唯一碳源就好.
然后配制培养基,配制样品溶液(各浓度),用平板涂布或混菌法接种,适宜条件下培养几天,观察菌落,再用亚硝酸盐特征反映观察亚硝酸盐利用情况,再用试管斜面分离纯培养物
2,用经典的U形管实验,遗传学讲的比较清楚

菌的筛选方法有哪些
答：菌的筛选方法包括纯种培养法、平板划线法、涂布平板法等。解释：1. 纯种培养法：这是通过分离单个细菌细胞并使其在特定条件下生长繁殖的方法。通过这种方式，可以确保得到的菌落是由单一菌种构成的，从而实现菌的筛选。这种方法常用于菌种鉴定和保存。2. 平板划线法：这种方法主要用于微生物的分离和纯化。...

菌种筛选的一般流程是什么
答：菌种筛选指将从自然界或实验室保藏的菌株中用不同方法选出具有特殊性能的菌株，如筛选抗生菌时可用能对其产生拮抗作用的菌作为筛选对象进行筛选，在筛选能利用烃类的菌时可用仅含烃类的培养基进行筛选。从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样，富集培养，纯种分离，性能测定。不同微生物的生存...

微生物(菌种筛选)
答：一种仅以亚硝酸盐作为唯一氮源（A)，另一种不含任何氮源作为对照（B);(3)将样品适当稀释(十倍稀释法），涂布A平板；（4）将平板至于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生；（5）将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，

分离筛选微生物菌种的基本程序
答：5 步骤 5.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选 （1）融化淀粉察氏培养基,稍冷后倒平板与斜面数个.（2）取种曲少许,加入10mL带玻璃球的无菌生理盐水的三角瓶中,用力振荡打散孢子团粒,使之形成均匀的孢子悬浮粒.然后将其用无菌纱布过滤于无菌试管中.（3）将上述滤液以10倍稀释法知释至10-7,取后3个稀释...

第8章 微生物菌种的筛选及鉴定
答：第8章食品微生物菌种的筛选及鉴定主讲惠明博士本节要点▪食品工业上典型的微生物菌种▪微生物菌种的分离筛选及鉴定▪微生物菌种的发酵条件优化一、典型工业微生物菌种细菌：枯草杆菌，短杆菌，大肠杆菌酵母：酿酒酵母（啤酒，葡萄酒），酒精酵母，假丝酵母霉菌：黑曲霉，土曲霉，米曲霉，...

简述菌种选育方法
答：一、简述菌种选育方法 1、自然选育 （1）没有经过人工处理，利用菌种的自然突变并筛选出理想菌种的过程便是自然选育。（2）在没有人工干预下的情况下，部分微生物所发生的突变便是自然突变，通常将自然突变分为正突变和负突变，其中对于生产有益的突变便是正突变，比如菌株生产性能提升了，而不希望在...

微生物菌种的筛选
答：我认为两者都可以用构建基因文库的方法来筛选出其相关的基因。基因文库的构建，大致可分为5个步骤：（1）染色体DNA的片段化 从某菌株中提取其染色体DNA，将其切割成一定大小的片段，插入噬菌体载体后被包装成噬菌体颗粒。（2）载体DNA的制备 选择适当的噬菌体载体用限制酶切开，得到左、右两臂，以便...

功能微生物筛选过程及应用价值
答：菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用。工业微生物产生菌的筛选一般包括两...

分离筛选微生物菌种的基本程序
答：5 步骤 5.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选 （1）融化淀粉察氏培养基，稍冷后倒平板与斜面数个。（2）取种曲少许，加入10mL带玻璃球的无菌生理盐水的三角瓶中，用力振荡打散孢子团粒，使之形成均匀的孢子悬浮粒。然后将其用无菌纱布过滤于无菌试管中。（3）将上述滤液以10倍稀释法知释至10-7，取后3...

论述从环境中筛选目标菌中的方法,一种就可以,详细点
答：由于抗生素分泌处于微生物生长后期,取出琼脂块可以避免各菌落所产生抗生素的相互干扰。典型的例子是春雷霉素生产菌的筛选,见图5.6.2。 5.6.2.3 摇瓶培养法 摇瓶培养法是将待测菌株的单菌落分别接种到三角瓶培养液中,振荡培养,然后,再对培养液进行分析测定。摇瓶与发酵罐的条件较为接近,所测得的数据就更有实际...