高中生物:单克隆抗体的制备中,为什么不让浆细胞一直分裂,然后筛选出其中癌变的细胞进行增殖产生抗体?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-01
高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么

高二生物上课:动物细胞工程之筛选杂交瘤细胞的原理和方法

已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径,但一般不分裂增殖,培养后可剔除。
鼠骨髓瘤细胞中没有S途径,加氨基嘌呤阻断D途径后也可除去。只有杂交瘤细胞在加氨基嘌呤阻断D途径后还有S途径,因此可继续分裂。

小鼠腹腔细胞含有巨噬细胞,除具有饲养作用外,还可清除死亡破碎细胞及微生物。取8~10周龄同系小鼠,断颈处死后,无菌操作腹腔内注射10~15ml完全培养液,用消毒拇指轻揉腹部数次后, 吸回腹腔液体,调整细胞浓度为1×105/ml。 一般一只小鼠腹腔液可获取细胞3~5×106,可供一次融合用。亦可取两只小鼠腹腔巨噬细胞混合使用。此外,同系小鼠脾细胞和胸腺细胞亦可作为饲养细胞。

选择性培养 两种亲本细胞经PEG处理后,可形成多种细胞成分的混合体,包括未融合的游离亲本细胞、骨髓瘤细胞间的融合、免疫B细胞间的融合以及骨髓瘤细胞与免疫B细胞间融合的异核细胞,仅后者可形成杂交瘤,应予以筛选出来克隆培养。通常应用HAT培养液,其中含有次黄嘌呤H、氨基喋呤A和胸腺嘧啶核苷T。

大多数实验室在融合当天就加入HAT培养液,也可次日加入。一般在融合后7~14天内使用HAT培养液,然后改用HT培养液。融合后第2~3周进行换液,每次吸出培养孔旧液1/2换入新液,以后视克隆生长情况3~5天换液1次,连续2周。3~5天后未融合及自身融合的细胞逐渐死亡,1周左右可出现克隆,并不断增殖,当集落>3mm或布满孔底1/2时即可取上清作抗体活性检测,同时补加新鲜HT培养液。在一次较好的融合试验中,约70~80%孔有克隆生长。所有生长克隆的孔都需要取培养上清液进行抗体活性检测。培养3周后即可改用普通完全培养液。

单克隆抗体的制备先让以免疫的B细胞也就是浆细胞与骨髓瘤细胞融合,然后筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能够无限增殖,也能够产生特异性抗体。

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    答:单克隆抗体的制备先让以免疫的B细胞也就是浆细胞与骨髓瘤细胞融合,然后筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能够无限增殖,也能够产生特异性抗体。
  • 高中生物单克隆抗体制备 为什么要用羊的红细胞注射小鼠来获取淋巴B细 ...
    答:因为你要获取的是抗羊红细胞的抗体,所以要用羊的红细胞注射小鼠啦
  • 高中生物!制备单克隆抗体原理?要准确
    答:单克隆抗体的优点是:特异性强、灵敏度高,并可大量制备
  • 高中生物!制备单克隆抗体原理?
    答:制备单克隆抗体的原理是杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又能分泌一种特异性抗体
  • 高中生物问题解释!在线等!
    答:选A ,原因:你这不是新课标的题吧,现在没有效应B这个说法了,叫浆细胞,单克隆抗体的制备,第一步就要先注射抗原,产生对应的浆细胞,然后与骨髓瘤细胞融合,生成杂交瘤细胞,两次培养,第一次是为了选出杂交瘤,第二次是得到单克隆抗体的培养,小鼠腹水和体外培养都行,这个题的关键是没有免疫过...
  • 单克隆抗体的制备为什么选择雌性小鼠
    答:主要是雌性小鼠个子小,容易操作,性情温柔。在免疫过程中是没有什么优势的。另外,用来做融合的骨髓瘤细胞最初都是从雌性小鼠身上得到的,为了更好地兼容,所以免疫也用雌鼠。
  • 进行单克隆抗体的制备时是使用的B淋巴细胞还是效应B细胞呀?为什么?_百...
    答:既然是要制备单克隆抗体,必须是效应B细胞.因为效应B细胞分泌的抗体是只针对一种抗原表位的,即单克隆的.如果是B淋巴细胞,又会分化成不同效应B细胞,分泌的抗体就不专一了.
  • 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义?
    答:7)大规模单克隆抗体的制备 选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备,因为融合细胞随培养时间延长,发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的...
  • 在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
    答:(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。)(2)筛选方法:抗体检测( 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等,实际上是利用稀释法,在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养,然后检查每孔中产生特定抗体的能力)。(3)筛选结果:产生专一性抗体的杂交瘤细胞。
  • 单克隆抗体的制备过程中,检验阳性是什么意思?
    答:单抗的制备中,经筛选后的杂交瘤细胞产生的抗体是不一样的,其中有些是我们所需要的单克隆抗体,所以要把筛选后的杂交瘤细胞在多孔板上培养,每个小孔中只有一个细胞,然后用抗原去试,呈阳性的就是能产生特定抗体的杂交瘤细胞。