土壤分离纯化真菌失败的原因

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-16
答:土壤分离纯化真菌失败的原因是在自然条件下,微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性,或者大量培养和利用某一种微生物,必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株,获得纯培养。获得纯培养的方法称为微生物的纯种分离法。这一过程称为微生物的分离纯化。本文将提取泥土中所包含的微生物,并且分离、纯化,最后对其微生物种类进行鉴定。

土壤分离纯化真菌失败的原因有:没有良好的培养基,环境不适应生物的生长,环境对生物具有选择作用。操作有误,需重新实验。培养的温度和培养时间不够充足。

土壤真菌的分离
实验目的:掌握从土壤中初步分离培养真菌的方法,从而获得真菌纯培养技能;了解基本接种技
术。建立严格的无菌操作概念,掌握无菌操作技术。
实验原理:十壤是微生物生活的大本营,是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。直
菌在十壤中的数量仅次于细菌和放线菌,主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性十壤中较多。分离十
壤中的真菌并不难,但由于其菌落大,容易扩展,技术准确性较低。本实验采用加有链毒素(或氯霉
素、庆大霉素)和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数土壤中的真菌。在此培养基上,放线菌和细菌
被链霉素和孟加拉红所抑制,但大多数直菌能够生存,目其菌落受孟加拉红的抑制而较小,从而避免
了某些直菌的扩散募延而带来的数量上的误差。实验器材和材料:
(1)器材:台秤、电子秤、烧杯、试管、三角瓶、量筒、酒精灯、移液管、移液枪、1mL无菌
吸管、无菌培养皿、接种环。
(2)材料:新鲜土样、无菌水、马丁-孟加拉红培养基。试验方法和步骤: 1.培养基的制备
(1)配方: 葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、琼脂 20g、K2HPO4
1.0g、MgSO4·7H2O 0.5q、1/3000孟加拉红水溶液100mL、0.03%链霉素稀释液100mL、自来水800mL。(2)操作步骤:
1)用搪瓷杯量取自来水500mL置小铝锅中,在电炉上加热。2)按配方分别称取各种药品,加
入自来水中,边加边搅拌,然后量取100mL1/3000孟加拉红水溶液加入。3)加入20g浸洗过的琼脂
煮沸至溶化。4)总体积定容至900mL,无需调节pH值。
5)趁热分装于18mmx180mm试管,每管15mL,塞好棉塞,贴好标签,装入小铁丝筐,并用日报纸将棉基部分包好。6)高压杰汽火案,121c火宝30min。注意:
1)取国产链毒素1g/瓶,用无菌吸管吸入10mL无菌水溶解,得到10%链霉素溶液。取0.3mL该
溶液定容于100mL灭菌容量瓶即可得到0.03%链毒素溶液。
2)使用前,将上述培养基熔化冷却至55~60℃,按每10mL培养基加入1mL0.03%链霉素溶
液,即可使每毫升培养基含30ug链毒素。2.土壤稀释液的制备
用“稀释平板计数法”中的方法进行,将土样稀释至10-5。称取土样10g放入盛90mL无菌水的三
角瓶中,振摇约20分钟,使土与水充分混合,将菌分散。在无菌操作条件下,用1mL无菌移液

  • 土壤分离纯化真菌失败的原因
    答:答:土壤分离纯化真菌失败的原因是在自然条件下,微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性,或者大量培养和利用某一种微生物,必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株,获得纯培养。获得纯培养的方法称为微生物的纯种分离法。这一过程称为微生物的分离纯化。本文将提取泥土中所...
  • 土壤微生物的分离和纯化实验中PDA上的菌落一定是霉菌吗?
    答:一是土壤中毕竟细菌最多,因此分离纯化的菌落还是细菌多,也包括霉菌、放线菌、酵母菌等,很多其他微生物也可以生长。二是细菌种类很多,代谢条件、营养条件要求都不一样,PDA培养基营养条件比较差,多数细菌无法正常生长,但是依然有少量细菌是可以生长的。
  • 怎样分离真菌病原物并对病原菌进行纯化?
    答:1.1 清洁环境:分离工作严格说应在无菌条件下进行,无菌室或无菌箱是分离不可缺少的设施。1.2 若限于条件实验只能在普通房间进行时,必须对房间进行彻底扫除,清洁环境、搞好卫生。地上多洒些水,以消除室内尘埃,工作台上铺好湿毛巾,点燃酒精灯。1.3 分离工作开始前最好将所需的一切用品都准备好,...
  • 如何从土壤中分离得到一株对链霉素有抗性的芽孢杆菌
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  • 为什么在用马丁式培养基培养真菌时会出现细菌?
    答:链霉素对葡萄球菌属等革兰阳性球菌的作用差。用罩子把细菌罩住,让真菌长出来,都要无菌操作。
  • 如何进一步分离纯化所需的真菌
    答:稀释平板法。挑单菌落接种。一般都比较纯。
  • 纯培养物
    答:1、采集样品、稀释和接种:从环境中或患者体内采集含有微生物的样品,如土壤、水样、血液等。将样品进行适当的稀释,然后将其接种到含有适宜营养物的培养基上。2、分离、纯化、鉴定:通过稀释涂布法、涂布法、分离法等方法,将微生物分离成单个菌落。从单个菌落中挑选出一个菌落,将其转移到新的培养基上...
  • 请教有关微生物分离与纯化的问题
    答:用划线培养的方法,用挑针沾有含有要分离的菌株的培养液,在培养皿上划线,到入培养基培养,张成菌落后再用上述方法分离一次,直到菌落单一,就行了,这是微生物学里的内容,建议找课本和试验指导看看
  • 真菌代谢产物的分离纯化
    答:一、酶是微生物(真菌是其中的一种)的代谢产物。提出方法如下:1、酶的分离纯化需了解细胞制酶的流程、分离方法、以及酶制剂的保存。酶的种类繁多,性质各异,分离纯化方法不尽相同,即便是同一种酶,也因其来源不同、酶的用途不同,而使分离纯化的步骤不一样。工业上的用酶一般无须高度纯化,如...
  • 酵素菌的技术简介
    答:1、 同于长期使用化肥、农药,造成了土壤状况的恶习性循环,最突出的是土壤板结,通透性差,所施化肥农作物只能吸收三分之一,另三分之二的N P K及作物所需的微量元素被土壤固化,而施用酵素菌能使土壤疏松,通透性好,形成土壤的团粒结构,保水保肥,抗旱耐涝,增强作物的适应能z力,从而使地方肥效提高,产量稳定增加,...