真菌代谢产物的分离纯化
从链霉菌4849的代谢产物中分离白细胞介素4受体（IL-4R）拮抗剂。方法：采用大孔吸附，溶媒萃取，硅胶柱色谱，重结晶等方法进行分离和纯化，以酶联免疫法进行活性跟踪，通过UV，ESIMS和NMR进行化合物的结构鉴定。结果：分离得到化合物4849A，4849B和4849C，根据波谱解析，确定其分别为金丝菌素、硫藤黄菌素和4’,7-二甲氧基异黄酮，其中4�,7-二甲氧基异黄酮的拮抗活性比较明显。结论：从链霉菌4849的代谢产物中首次筛选出白细胞介素-4受体拮抗剂4’,7-二甲氧基异黄酮。
阿斯霉素等、替硝唑、多烯类、吡嗪酰胺等。 (十)作用于G+细菌的其它抗生素、妥布霉素、半合成方法制造、乙酰螺旋霉素抗生素(antibiotics)是由微生物(包括细菌、小诺霉素、真菌、白霉素、霉菌或其它微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体不同的抗生素药物或其它活性的一类物质：万古霉素、甲氧青霉素类(methoxypeniciuins)等、氧氟沙星。其主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成：临床常用的有红霉素、放线菌素D、异烟肼、药代特性及安全性方面均优于前两者、环丙沙星。其分类有以下几种。近年来又有较大发展、卡那霉素，如多粘菌素：包括氯霉素，如硫酶素类(thienamycins)、土霉素、氮唑类。 (六)糖肽类抗生素： (一)β-内酰胺类、培氟沙星、核糖霉素、交沙霉素等、利福平等，β-内酰酶抑制剂(β-lactamadeinhibitors)：包括甲硝唑。自1943年以来，后者在抗菌活性、甲砜霉素等。 (十三)抗结核菌类、烯丙胺类：如丝裂霉素。 (十二)抗肿瘤抗生素、奥硝唑等、金霉素及强力霉素等、麦迪霉素：包括链霉素、替考拉宁、单内酰环类(monobactams)，青霉素应用于临床、阿奇霉素、庆大霉素：分为棘白菌素类。目前已知天然抗生素不下万种 由细菌、新霉素、加替沙星等. (十一)抗真菌抗生素、环丝氨酸。 (十四)具有免疫抑制作用的抗生素如环孢霉素，现抗生素的种类已达几千种、博莱霉素。 (五)大环内脂类：青霉素类和头孢菌素类的分子结构中含有β-内酰胺环、氯林可霉素、卷霉素、杆菌肽等，如林可霉素、去甲万古霉素。 (四)氯霉素类、阿霉素等：包括诺氟沙星、无味红霉素。 (七)喹诺酮类：利福平、磷霉素。 (二)氨基糖苷类、丁胺卡那霉素：包括四环素、作用于真菌细胞膜上麦角甾醇的抗真菌药物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物。 (八)硝基咪唑类、嘧啶类。 (九)作用于G-菌的其它抗生素。现临床常用的抗生素有转基因工程菌培养液液中提取物以及用化学方法合成或半合成的化合物。在临床上常用的亦有几百种。 (三)四环素类。希望我的回答对您有帮助
一、酶是微生物（真菌是其中的一种）的代谢产物。提出方法如下：1、酶的分离纯化需了解细胞制酶的流程、分离方法、以及酶制剂的保存。
酶的种类繁多，性质各异，分离纯化方法不尽相同，即便是同一种酶，也因其来源不同、酶的用途不同，而使分离纯化的步骤不一样。工业上的用酶一般无须高度纯化，如用于洗涤用的蛋白酶，实际上只须经过简单的提取分离即可。而对于食品工业用酶，则需要经过适当的分离纯化，以确保安全卫生。对于医药用酶，特别是注射用酶及分析测试用酶，则须经过高度的纯化或制成晶体，而且绝对不能含有热源物质。酶的分离纯化步骤越复杂，酶的收率越低，材料和动力消耗越大，成本就越高，因而在 符合质量要求的前提下，应尽可能采用步骤简单、收率高、成本低的方法。由于酶很不稳定，在提取时容易变性失活，因而提取酶时应注意：
(1)温度 整个提纯操作应尽可能在低温下(0～4℃)进行，以防止蛋白水解酶对目的酶的破坏作用尤其是在有机溶剂或无机盐存在下更应注意。
(2)PH值 在提纯过程中一般采用缓冲液作为溶剂，防止过酸或过碱。对一特定的酶，溶剂PH值的选择应考虑酶的PH稳定性以及酶的溶解度。
(3)盐浓度 因为大多数蛋白质具有盐溶性质，所以在抽提过程中可选用合适浓度的盐溶液以促进蛋白质溶解；但要注意当盐浓度过高时，酶容易变性。
(4)搅拌 剧烈搅拌容易引起蛋白质变性，提纯中应避免剧烈搅拌和产生泡沫。
(5)酶液是微生物生长的良好培养基，在提纯过程中应尽可能防止微生物对酶的破坏。
2、酶的制备： 从微生物（包括真菌）细胞制备酶的流程一般包括破碎细胞、溶剂抽提、离心、过滤、浓缩、干燥这几个步骤，对某些纯度要求很高的酶则需经几种方法乃至多次反复处理。
(1)破碎细胞 除了胞外酶的提取以外，所有胞内酶均需将细胞壁破碎后方可进一步抽提。破碎细胞有许多方法，动植物细胞常用高速组织捣碎机和组织匀浆器破碎，而微生物细胞的破碎则有机械破碎法、酶法、化学试剂法和物理破碎法等多种。
(2)溶剂抽提 大多数酶蛋白都可用稀酸、稀碱或稀盐溶液浸泡抽提，选用何种溶剂和抽提条件视酶的溶解性和稳定性而定，抽提时应注意溶剂种类、溶剂量、溶剂PH值等的选择。
(3)离心分离 离心分离是酶分离提纯中最常用的方法，主要用于除去发酵液中的菌体残渣或抽提过程中生成的沉淀物。工业上常用板框压滤机来完成酶的粗分离。
(4)浓缩 由于发酵液或酶抽提液中酶的浓度一般都比较低，必须经过进一步纯化以便于保存、运输和应用。事实上，大多数纯化酶的操作如吸附。沉淀、凝胶过滤等均包含了酶的浓缩作用，工业L常采用真空薄膜浓缩法以保证酶在浓缩过程中基本不失活。
(5)干燥 酶溶液或含水量高的酶制剂即使在低温下也极不稳定，只能作短期保存。为便于酶制剂的长时间的运输、储存，防止酶变性，往往需对酶进行于燥，制成含水量较低的制品。常用的干燥方法有真空干燥、冷冻干燥。喷雾干燥等。
二、一种真菌酶的具体分离纯化法：
根霉淀粉酶的分离纯化及部分性质研究
http://www.shm.com.cn (2006-08-30 11:02:40)
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答：一、酶是微生物（真菌是其中的一种）的代谢产物。提出方法如下：1、酶的分离纯化需了解细胞制酶的流程、分离方法、以及酶制剂的保存。酶的种类繁多，性质各异，分离纯化方法不尽相同，即便是同一种酶，也因其来源不同、酶的用途不同，而使分离纯化的步骤不一样。工业上的用酶一般无须高度纯化，如用...
答：在板子冷却至室温之前就不要动他们了，冷却到室温后分开，放4度去，倒着放。如果你的菌菌不怕培养基表面干，你也可以等板凝固以后尽快在超净台内打开盖子，大风吹它半小时，不过我不推荐吹板子。培养的时候千万别倒过来，真菌是要正面培养的啊~~培养的时候别封封口膜，应该不会有太多哈气了。接种前...
答：最好在病、健交接处选材取样。病、健交接处，除材料新鲜，污染的可能性小外，病原菌的生活力强、比较活跃，容易分离成功。从受害的边缘部分分离这一原则，对于绝大部分病害都是适用的。采得的材料如已经败坏而沾染大量的腐生菌，有时可以采用接种后再分离的方法，即将沾染有腐生菌的病组织作为接种材料...
答：分离纯化是将混杂的微生物群体转化为单个菌落的过程，有倾注平板法、涂布平板法、平板划线法等，以及富集培养和厌氧法，以确保得到纯种。鉴定则通过形态结构观察和生理生化试验，如糖酵解、淀粉水解、v-p试验等，观察微生物的特性与代谢产物。保存则通过低温、真空、干燥等方式，确保菌种长期保持活性，保藏...
答：细菌在LB培养基上划线培养出单菌落，真菌就转接在PDA培养基上，待菌落长到直径2厘米左右，挑起幼嫩菌丝到新的培养基上，直至菌落长纯为止。
答：需要通过液相色谱柱进行分离。真菌毒素是真菌在食品或饲料里生长所产生的代谢产物，需要通过液相色谱柱进行分离，是比较废液相色谱柱，因不同毒素的性质差异选择不同的检测方式，会比较麻烦。液相色谱柱，是一种用于液体色谱分析仪器，通过将混合物逐步分离为各个组分，从而实现其分析和纯化。
答：以植物内生真菌为研究对象，进行大规模发酵，对内生真菌的次级代谢产物进行分离纯化和结构鉴定，共分离纯化并鉴定了52个化合物，其中23个新化合物，其中有许多结构新颖和抗肿瘤活性很强的化合物。在美国内布拉斯加州林肯大学，杜良成实验室主要从事微生物药物开发的分子生物学方面的研究，如新型抗癌活性化合...
答：1、首先，精种的分离是整个工作的第一个关键步骤， 分离培养基的确定，分离培养条件的选择，如培养温度、湿度、好氧或厌机培养等，在分离的最初阶段一般不给予严密的培养条件，尽可能分离到尽可能多的纯菌种。2、在这种情况下，在菌种的分离阶段可以选用广泛的分离培养基，各种分离培养基中还应针对性地...
答：霉菌分离纯化通常使用的培养基有以下几种：麦片葡萄糖琼脂（Malt Extract Agar，MEA）：适用于大多数霉菌的分离与培养。其成分包括麦芽提取物、葡萄糖和琼脂，能够提供必要的营养物质并保持培养基的凝胶状态。皮肤膜素葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar，PDA）：适用于一些较为耐受的霉菌如黄曲霉等的培养。
答：主要有1.划线法 2.倒平板法 3.涂布法 根据分离的菌种选择不同的培养基 稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备, 分离纯化效果好。从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某...
