dna提取方法
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-30
dna提取主要是CTAB方法，其它的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb。
二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
四.异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)。
五.表面活性剂快速制备法：用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
七.碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。
如何提取基因?
答：去除细胞内的蛋白质，包括与DNA结合的组蛋白，通过加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚／氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA，如实验不严密，可省略此步。沉淀DNA，需在冷乙醇或异丙醇中沉淀，放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结: DNA提取方法有下面⑦种 一....
dna提取实验步骤是什么?
答：分别用66%，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤，最后在空气中干燥，既得DNA样品。此法提取的DNA中蛋白质含量较高，故一般不用。为除蛋白可将此法加以改良，在提取过程中加入SDS。一般学校实验室较为简单的教学就用这个方法。提取原则 1、保证核酸一级结构的完整性；2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有...
细菌DNA的提取方法有哪些
答：接着用等体积的Tris饱和苯酚抽提2次，苯酚/氯仿/异戊醇抽提一次，氯仿抽提一次后，乙醇沉淀DNA，用自动移液器吸管头将絮状DNA沉淀块吸附到Ep管中，70%乙醇洗2次，干燥后溶于适当1×TE或ddH2O中。3 1) 细菌培养：细菌接种于5ml液体培养基中，37℃摇床（300rpm）培养过液。2) 细菌收集：取1ml培养...
DNA实验室常用的DNA提取方法有哪些
答：反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤，对比起来CTAB法好，在禾本科植物效果差不多！1、CTAB法 1）在所需量的CTAB抽提液中加入2－巯基乙醇，使终浓度达2％（v/v）。将此溶液预热至65℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要4ml的2－ME/CTAB抽提液。2）用...
提取基因组DNA的方法有哪些?各有何优缺点?
答：2、离心柱法 离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高，有利于RNA保护，而且能进行微量操作，以其低廉的价格和相对便捷的操作，渐逐取代了传统DNA提取方法，被高校科研所等市场普遍接受。离心柱法DNA提取的缺点是需要较多的样本，耗材多，对于珍稀样本无能为力，特别是在法医、考古等领域...
动物基因组dna提取运用什么方法
答：提取动物基因组DNA的方法有：酚抽提法、盐洗法、水煮法、甲酰胺解聚法、盐酸胍裂解法等等。
质粒DNA的提取方法总共有哪些,回答的全给高分
答：碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,...
请教:细菌DNA的提取
答：CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高，蛋白杂质较少，保存时间长，编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候，这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些，得到的DNA可用于Southern blot。注意：长时间保存DNA可放于-20℃，但要尽量减少反复冻融，否则影响DNA质量。三、盐析法 介于方法一...
dna提取基本步骤
答：dna提取基本步骤如下：一、步骤：1、细胞裂解与细胞裂解缓冲液裂解细胞膜。2、脂质被洗涤剂和表面活性剂分解。3、通过添加蛋白酶消化蛋白质。4、通过添加RNase，消化RNA。5、通过加入浓盐然后离心分离细胞碎片、消化蛋白质、脂质和 RNA。6、用冰冷的乙醇或异丙醇乙醇沉淀 DNA。 醋酸钠的离子强度可用于...
植物的基因怎样提取??
答：植物DNA提取方法 方法一：1.取两片幼嫩新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入适量液氮，迅速研磨成粉末状，随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇，继续研磨成略有流动性的糊状或粥状，转入1.5ml的离心管中，于65℃水浴锅中保温约60min。2.待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI（...
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb。
二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
四.异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)。
五.表面活性剂快速制备法：用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
七.碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。
答：去除细胞内的蛋白质，包括与DNA结合的组蛋白，通过加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚／氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA，如实验不严密，可省略此步。沉淀DNA，需在冷乙醇或异丙醇中沉淀，放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结: DNA提取方法有下面⑦种 一....
答：分别用66%，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤，最后在空气中干燥，既得DNA样品。此法提取的DNA中蛋白质含量较高，故一般不用。为除蛋白可将此法加以改良，在提取过程中加入SDS。一般学校实验室较为简单的教学就用这个方法。提取原则 1、保证核酸一级结构的完整性；2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有...
答：接着用等体积的Tris饱和苯酚抽提2次，苯酚/氯仿/异戊醇抽提一次，氯仿抽提一次后，乙醇沉淀DNA，用自动移液器吸管头将絮状DNA沉淀块吸附到Ep管中，70%乙醇洗2次，干燥后溶于适当1×TE或ddH2O中。3 1) 细菌培养：细菌接种于5ml液体培养基中，37℃摇床（300rpm）培养过液。2) 细菌收集：取1ml培养...
答：反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤，对比起来CTAB法好，在禾本科植物效果差不多！1、CTAB法 1）在所需量的CTAB抽提液中加入2－巯基乙醇，使终浓度达2％（v/v）。将此溶液预热至65℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要4ml的2－ME/CTAB抽提液。2）用...
答：2、离心柱法 离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高，有利于RNA保护，而且能进行微量操作，以其低廉的价格和相对便捷的操作，渐逐取代了传统DNA提取方法，被高校科研所等市场普遍接受。离心柱法DNA提取的缺点是需要较多的样本，耗材多，对于珍稀样本无能为力，特别是在法医、考古等领域...
答：提取动物基因组DNA的方法有：酚抽提法、盐洗法、水煮法、甲酰胺解聚法、盐酸胍裂解法等等。
答：碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,...
答：CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高，蛋白杂质较少，保存时间长，编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候，这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些，得到的DNA可用于Southern blot。注意：长时间保存DNA可放于-20℃，但要尽量减少反复冻融，否则影响DNA质量。三、盐析法 介于方法一...
答：dna提取基本步骤如下：一、步骤：1、细胞裂解与细胞裂解缓冲液裂解细胞膜。2、脂质被洗涤剂和表面活性剂分解。3、通过添加蛋白酶消化蛋白质。4、通过添加RNase，消化RNA。5、通过加入浓盐然后离心分离细胞碎片、消化蛋白质、脂质和 RNA。6、用冰冷的乙醇或异丙醇乙醇沉淀 DNA。 醋酸钠的离子强度可用于...
答：植物DNA提取方法 方法一：1.取两片幼嫩新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入适量液氮，迅速研磨成粉末状，随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇，继续研磨成略有流动性的糊状或粥状，转入1.5ml的离心管中，于65℃水浴锅中保温约60min。2.待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI（...
