请问植物组织培养中GS培养基的配方?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-05
请问植物组织培养中KT培养基的配方

由吐温、蛋白、烟酸和0.3 %水解酪蛋白氨基酸组成,用于皮炎芽生菌转相(为酵母相)培养时使用。

植物组织培养:1.培养基固体
培养基成分蔗糖、氨基酸、维生素、水、矿物质
2.植物组培的培养基中特有植物激素

动物细胞培养的培养基中特有动物血清。

成分 分子量 使用浓度(mg/L)
大量元素 硝酸钾 KNO3 101.11 1900
硝酸铵 NH4NO3 80.04 160
磷酸二氢钾 KH2PO4 136.09 170
硫酸镁 MgSO4.7H2O 246.47 370
氯化钙 CaCl2.2H2O 147.02 220

微量元素 碘化钾 KI 166.01 0.83
硼酸 H3BO3 61.83 6.2
硫酸锰 MnSO4.4H2O 223.01 22.3
硫酸锌 ZnSO4.7 H2O 287.54 8.6
钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O 241.95 0.25
硫酸铜 CuSO4.5 H2O 249.68 0.025
氯化钴 CoCl2.62 237.93 0.025

铁盐 乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA 372.25 37.3
硫酸亚铁 FeSO24.7H2O 278.03 27.8

有机成分 肌醇 100
甘氨酸 2
盐酸硫胺素 VB1 0.1
盐酸吡哆醇 VB6 0.5
烟酸 VB5或VPP 0.5

蔗糖 sucrose 342.31 30g/L

琼脂 agar 7 g/L

实际上GS培养基就是把MS培养基的硝酸铵还有氯化钙的量调整了。

一、实验目的

1.了解配制培养基的原理,并掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2.学习几种常用培养基的配制、分装和灭菌的操作方法.

3.进一步熟练掌握手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法。

二、实验器材

1.药品及试剂:

可溶性淀粉,KNO3,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2O,1mol/L NaOH,琼脂,牛肉膏,蛋白胨,NaCl

2.仪器及其它

试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸(5.5-9.0) 、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、干燥箱、培养皿、涂布棒、吸管(1ml)、玻璃珠、PH试纸

三、实验内容

1.分组配制高氏一号培养基300ml。

配方:

可溶性淀粉20g NaCl 0.5g KNO3 1g

K2HPO4·3H2O 0.5g MgSO4·7H2O 0.5g

FeSO4·7H2O 0.01g 琼脂 15-25g

水 1000ml pH 7.4-7.6

2.配制牛肉膏蛋白胨培养基

配方:

牛肉膏3g 蛋白胨10g NaCl 5g 水1000ml PH 7.4-7.6

3.每组制备玻璃珠无菌水(45ml)三角瓶2个。

4.每组制备无菌水试管(4.5ml/管)10支。

5.每组包9cm培养皿24套,6套为一包。

6.每组包1ml吸管5支,玻璃刮铲4个。

四、方法步骤

(一)培养基的制备与分装

1.称量 按培养基配方比例依次准确地称取药品。可溶性淀粉先用少量热水溶化后再加入其他成份,补足所需水分,混匀后加入琼脂。

2.熔化 在沸水浴锅中加热熔化。

3.调pH 用1mol/L NaOH调pH至7.4-7.6。

4.过滤 趁热用多层纱布过滤(本实验勿需过滤)

5.分装 将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,注意管口不要沾上培养基。液体分装装量不超过试管的1/4,固体分装装量不超过试管的1/5,分装三角瓶的量不超过三角瓶容积的一半,半固体分装装量为试管的1/3,灭菌后垂直待凝。

6.加棉塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角瓶口塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能,然后包扎一层牛皮纸。试管应先捆成一捆后再于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。

(二)无菌水的制备

7.用量筒量取45ml水于带玻璃珠三角瓶中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。

8.用5ml吸管取4.5ml水于试管中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。

(三)器皿的准备

9.培养皿的包装 每6套一包,用旧报纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里,加盖扣严)。

10.吸管的包装 首先在吸管的上端塞上一小段棉花,用长纸条包扎、打结。

11.玻璃涂布棒的包装方法同吸管的包装。

(四)培养基、无菌水、器皿的灭菌

12.将培养基、无菌水放入高压蒸汽灭菌锅内,1.05kg/cm2压力,121.3℃,20min湿热灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。

13.灭菌完毕,将试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞搁在玻棒(或木棍)上,搁成斜面,搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。

14.将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24~48h,以检查灭菌是否彻底。

15.器皿放入干热灭菌箱内,加热灭菌。

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  • 请问植物组织培养中GS培养基的配方?
    答:琼脂 agar 7 g/L 实际上GS培养基就是把MS培养基的硝酸铵还有氯化钙的量调整了。
  • 植物的组织培养基怎么做?
    答:一般来说,植物培养使用固体培养基,所以里面需要加入琼脂,一般每升加入6到8克琼脂粉即可(培养基pH会影响琼脂凝固效果,低了不易凝固,高了则过硬,一般在5-8之前问题不是太大)。此外,培养基中需要加入碳源,一般使用蔗糖或者葡萄糖。最后,植物培养基中还需要无机物,比如钙离子,钾离子等等,也有...
  • 植物组织培养基的组成成分有哪几种类型?
    答:植物组织培养基成分主要有5类,分别是无机营养物、碳源、维生素、有机附加物、生长调节物质。1、无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成。大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
  • 植物组织培养的培养基成分是什么(高考生物)
    答:植物组织培养的培养基成分主要包括无机营养,氨基酸,糖类,琼脂,有机附加物,维生素,植物生长调节物质,其他成分和水等。
  • 植物组织培养基的成分
    答:植物组织培养:1.培养基固体 培养基成分蔗糖、氨基酸、维生素、水、矿物质 2.植物组培的培养基中特有植物激素 动物细胞培养的培养基中特有动物血清。
  • 需要植物组织培养配方
    答:不同植物有不同配方的,组培过程中还要分脱分化诱导培养基和再分化诱导培养基 这个是常用的MS培养基,脱分化再分化都可以用,但植物激素要另外加 MS培养基(配制1L培养基的用量):硝酸铵1650mg,硝酸钾1900mg,磷酸二氢钾170mg,七水硫酸镁370mg,氯化钙440mg,四水硫酸锰22.3mg,七水硫酸亚铁27....
  • 植物组织培养怎样进行技术操作?
    答:(2) 培养基的配方:植物组织培养的成功与培养基的选择有很大关系。常用的培养基营养成分如表6-13所示。(3) 培养基的制备程序:首先吸取各种药液混合,然后将蔗糖加入溶化的琼脂中,搅拌均匀后调节pH,分装于三角瓶等容器中,封口后进行灭菌。灭菌后冷却凝固备用。3. 接种:为了得到无菌材料,需对植物...
  • 组织植物的培养技术(只要给我培养液的配制以及克隆植物的方法)
    答:在培养液的配制中,通过精确控制阴离子态氮源与阳离子态氮源的比例,通常在2-7∶1的范围,优选4-5∶1,可以维持培养液pH值在5-7之间,这对大多数植物的生长至关重要。当培养液pH值偏离正常范围时,可以通过调整氮源比例来恢复平衡。这种培养基的配方可有效模拟土壤溶液的缓冲特性,促进植物健康成长...
  • 组培培养基的配方
    答:组培培养基的配方如下:1、培养基中的糖类主要是蔗糖,少数情况下使用葡萄糖。大量生产可使用蔗糖。糖在培养基中的作用是提供碳源,同时用于维持渗透平衡,琼脂是固体培养基中的成分,作为固化剂支持。培养物在培养基的成本消耗中,琼脂占有相当大的比例,培养基中琼脂的加入量为4-7g。2、在组织培养生产...
  • 植物组织培养方法的配制方法
    答:MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH...