细胞DNA的提取一般用什么方法

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-26
一般有试剂盒提取可以用大牌的Qiagen,BIOG,上面都有详细说明书或者也可以用氯仿法提取方法如下:
l. 样品加入等体积和酚或酚/氯仿(1:1)混合液.
2. 上下颠倒很匀.
3. 室温,12000转/分钟,离心5分钟.如蛋白质较多或分界不清时,可离心10分钟。

4. 吸取上层(水层)移置另一新的离心管中.

5. 加入等体积酚/氯仿/异戊酸(25:24:1)溶液.重复步骤2、 3、 4.

6. 加入等体积氯仿/异戊酸(24:1)溶液.重复步骤2、3、 4。

7. 乙醇沉淀核酸(见核酸的沉淀纯化).

  • 细胞DNA的提取一般用什么方法
    答:一般有试剂盒提取可以用大牌的Qiagen,BIOG,上面都有详细说明书或者也可以用氯仿法提取方法如下:l. 样品加入等体积和酚或酚/氯仿(1:1)混合液.2. 上下颠倒很匀.3. 室温,12000转/分钟,离心5分钟.如蛋白质较多或分界不清时,可离心10分钟。4. 吸取上层(水层)移置另一新的离心管中.5....
  • 如何从细胞中提取dna
    答:主要是CTAB方法,其他的方法还有1物理方式:玻璃珠法,超声波法,研磨法,冻融法。2化学方式:异硫氰酸胍法,碱裂解法3生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有:硅质材料、阴离子交换树脂等试验步骤:1、贴壁细胞用胰酶消化,离心收集。2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次,离心收集。试验步骤2再重新作一边。3、加入5mlD...
  • 分离DNA和RNA主要方法有哪些
    答::①取鸡血细胞液(其红细胞椭圆具核,除骆驼外,猪、羊、狗等哺乳动物红细胞无核),或取新鲜猪肝、菜花、洋葱等材料.虽然在细菌的转化实验中提取的是无核细胞中的DNA,但一般而言,均是从具核的生物材料中提取DNA.当然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞质DNA,即线粒体DNA和叶绿体DNA.值得推介的材料...
  • 如何提取DNA粗提和精提的方法
    答:一、DNA提取(粗提取)1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb 2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型...
  • dna的提取方法
    答:dna的提取方法为:浓盐法、SDS法、水抽提法等。一、浓盐法。1、根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同,可将二源源斗斗者源斗分离。2、常用1mol/LNaCl抽提,得到的DNP黏液中加入含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使之乳化,再离心,使蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA则位于上层水相中。3、...
  • DNA的提取方法有多少种
    答:DNA的提取方法有7种:酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒缠绕法、异丙醇沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制备、碱变性快速制备。DNA的提取原则 1、保证核酸一级结构的完整性;2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的...
  • 提取基因组DNA和细胞核DNA是用SDS法好些还是CTAB法好些?
    答:回答:基因组DNA提取一般用CTAB法 真核生物细胞核DNA一般用SDS法 细菌DNA提取用CTAB法 当然具体情况也许有些不同,在试验之前最好查找下相关的论文。
  • DNA实验室常用的DNA提取方法有哪些
    答:以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤,对比起来CTAB法好,在禾本科植物效果差不多!1、CTAB法 1)在所需量的CTAB抽提液中加入2-巯基乙醇,使终浓度达2%(v/v)。将此溶液预热至65℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要4ml的2-ME/CTAB抽提液。2)用液氮(-196℃)或干冰(-78℃)...
  • 请教:细菌DNA的提取
    答:CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。三、盐析法 介于方法一...
  • 细胞DNA提取试剂的选择
    答:一般先提取105-106的细胞量(最好不超过107 Cell,可用细胞计数方法进行细胞计数),如结果不理想可考虑增加细胞量。但如果增加细胞量还不能得到满意结果,应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的细胞DNA提取试剂有国外品牌Q,国产品牌Biog和T等。根据我们的经验,Q细胞DNA的提取得率,一般107细胞样本在40-...