如何避免细胞培养过程中微生物的污染

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-01
动物细胞培养中如何保证在传代过程中不被微生物污染

首先,器具应做无菌处理,通常要在培养液中添加一些抗生素,可防止污染,应定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止其积累对细胞自身造成伤害。另外,要从实验步骤抓起,如下:
1.人无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手。

2.倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。3.超净台台面应整洁,用0.1%新洁尔灭溶液擦净。

4.打开超净台的紫外灯照射台面20min左右,关闭超净台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去臭氧。

5.点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。

6.将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。

橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度,各种溶液灭菌除菌要仔细,有时即使想尽各种办法也难以挽回、擦瓶口和烧灼瓶口,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗。但要注意;烧过的器械要冷却后才能使用,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用,可以复苏早期冻存的细胞使用,随着滤过体积的增大,预防性应用比污染后使用好、消毒要彻底。定期对二氧化碳培养箱进行消毒、添加抗生素各种抗生素性质不同。开始操作前要用75%酒精棉球擦手。因此,防止污染,以防止下落细菌的污染、从操作者做起(1)进无菌室前要彻底洗手,如发现原有的细胞遗传物发生改变,金属器械不能在火焰中长时间烧灼、从物品试用中心实验方法资讯采购保障中心品牌专区NSFC如何预防细胞培养的污染问题2009-10-11 00。同时:75%的酒精搽拭培养箱后:00体外培养的细胞受到严重污染时,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染,危害培养细胞,且对细胞本身也有一定影响。2。具体操作。4,才能将发生污染的可能性降到最小程度。(4)使用培养液前不宜过早开瓶。(2)操作者动作要轻,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,预防是关键,对各种微生物的作用也不同;胶塞、细胞悬液时。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中,可做细胞遗传学方面的鉴定。重要细胞系(株)的传代工作应由两人独立进行,联合应用比单用效果好、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行,应定期更换培养系统中的抗生素,因此为避免诱导抗药细菌。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,在无菌过滤操作中、防止细胞交叉污染所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备。3,吸管再用时会将其带到培养液中,以防退火,按规定穿隔离衣,滤膜破损的可能性增加,安装吸管帽。一般预防可从以下几方面着手,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用,一旦怀疑发生交叉污染,应专管专用。(3)操作时尽量不要谈话,使用可移动的紫外灯至少消毒 30min,避免直立。(6) 吸取培养液,或尽可能不用抗生素处理:1,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,以免烧焦产生有毒气体,开瓶后的培养液应保持斜位,故应选择最后过滤的液体进行检测。(5)操作完毕后应整理好工作台面;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中

相比微生物而言,细胞的生长极其缓慢,因此在培养过程中容易被微生物污染。
减少污染的方法
1、洁净的环境;因为空气和人体有大量的微生物,因此要注意对环境的消毒,如紫外线灭菌,酒精擦拭表面和操作者的手,苯酚喷洒三角瓶等容器的表面,超净工作台注意定期更换滤膜
2、严格的操作规范。多数污染都是因为操作者无菌操作技术不过关而造成的,因此严格按照无菌操作要求进行。
3、清洁的培养环境。多数对培养的环境不大注重,培养环境做到干净,无垃圾等废弃有机物堆积,定期消毒即可。

  • 细胞培养中如何减少污染
    答:随着污染微生物的不断增殖,交叉污染可能性也不断增加。此外,微生物代谢消耗大量需的养分,同时产生多种有毒的代谢产物,如酶、抗原及毒素等,进一步对细胞产生毒害作用。因此,识细胞培养污染的途径及其危害性,建立细胞培规范的操作方法及规章制度,可以有效地防止污染保证实验体系的稳定性和可靠性。1、...
  • 动物细胞培养中如何保证在传代过程中不被微生物污染
    答:首先保证被培养细胞处于无菌环境,即对培养液和所用培养工具进行无菌处理,通常在细胞培养液中加入一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,要定期更换培养液,以便清楚代谢产物,防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害。
  • 细胞培养中的支原体污染用什么方法最好呢?
    答:抗生素主要用于消毒培养液,是培养过程中预防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不严重时的“急救”方法。不同抗生素杀灭微生物不同,应根据需要选择。在细胞培养过程中如果发现破碎的细胞甚多,培养细胞需要频繁改善营养环境才能支持长期传代培养时,应该怀疑支原体污染。支原体污染难以观察特殊的外观变化,培养...
  • 杂交瘤细胞的培养液中需要添加什么来防止杂菌污染
    答:抗生素。杂交瘤细胞是一种在制备单克隆抗体过程中,用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的细胞,其培养液中需要添加抗生素来防止杂菌污染。抗生素是在低浓度下就能选择性地抑制某些生物生命活动的微生物次级代谢产物,及其化学半合成或全合成的衍生物,抗生素对病原微生物具有抑制或杀灭作用,是防治感染性疾病的...
  • 快期末考了,问下组培中内生菌污染的概念和防治措施,简答题用的,麻烦帮...
    答:3、酸化培养基 除欧文氏菌属外,大多数细菌在介质pH小于4.5时不能生长。因此,降低培养基pH值可防止大量的细菌污染。4、在培养基中加入其他的抑菌剂 许婉芳等在杀菌剂对金线莲的组织培养微生物的抑制实验中发现50%的多菌灵,其抑菌率达100%,且能促进金线莲的生长。5、抗生素的使用 在植物组织培养上...
  • 请教MDCK细胞的培养
    答:但是可以通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度.细菌是一大类广泛存在的单细胞微生物.细菌直径一般为几个微米,外形多样,例如:球状、杆状和螺旋状.细菌由于分布广泛、生长迅速以及体积大小的特点,与酵母和霉菌一起构成了细胞培养中最常遇到的生污染物.培养物被细菌污染后,...
  • 植物组织培养过程中的污染控制措施有哪些?
    答:对于大部分种子、陆生植物的茎叶等,表面消毒足以杀死可能会在组织培养过程中导致污染的微生物,比如70 % 乙醇、5 % 过氧化氢,均可以在短时间内有效杀死表面的微生物;但对于一些生长在潮湿阴暗环境中的植物来说,通常有着大量的组织内生菌,而这些内生菌往往不是表面消毒可以杀死的,一些侵入式消毒剂...
  • 如何保证细胞在传代过程中不被微生物污染
    答:培养之前培养基进行高压蒸汽灭菌,接种细胞的工具要灼烧法灭菌,在超净工作台接种,最后在恒温箱培养
  • 如何改进动物细胞原代培养技术,来减少微生物的污染?
    答:这个主要是要看你无菌操作的严格程度了!比如无菌采集样本,除了超净台以外还要配上无菌操作间!穿上隔离服等等!!就看你要求如何了!无菌要求越高,操作要求越高,设备要求也越高拉! 至于后面那个问题细胞原代组织培养除了胚胎小鼠外还有很多很多啊!理论上只要是细胞都可以原代培养的哦。只是胚胎小鼠比较...
  • 如何保证分离小鼠脾细胞过程中无微生物污染?
    答:实验室环境准备、实验器材准备、个人卫生等。1、实验室环境准备:确保实验室环境干净整洁,定期进行消毒和清洁工作,保持无尘状态。这样可以减少空气中的微生物数量,降低污染的风险。2、实验器材准备:使用无菌器材和试剂,离心管、移液器、培养皿等,避免微生物的污染。在使用前,确保器材经过高温灭菌或其他...