怎样人工配置植物组织培养用的培养皿
组培室标准操作程序
一 生产环境
1 工作人员进入组培室必须穿工作服，包括更换拖鞋、穿白大褂，接种人员还要带帽、带口罩。
2 所有人员在组培室内不准高声喧哗、打闹。
3 工作期间，各生产房间要关闭房门，尤其是接种间；工作人员出入要随手关门。
4 各种生产用品要安固定的位置排放整齐，不可乱拿乱放。
5 工作过程中所产生的垃圾要及时清理，尤其是接种间，其内垃圾停留时间不得超过4小时。
二 接种程序
1. 准备工作：接种人员在正式接种之前要做好准备工作，包括准备酒精灯、新洁尔灭、灭菌用脱脂棉以及准备接种工具、分取培养基、接种用苗和工作台灭菌等。
·酒精灯用工业酒精作燃料，而非75%酒精。
·工作台上用的新洁尔灭浓度是0.1%，而非0.01%。
·工作台灭菌包括两步：一是上台前用紫外灯照射30分钟，二是正式接种前再用新洁尔灭仔细擦一遍。
·培养皿的取放：从布包里取培养皿时，一定要注意，手不能接触培养皿的边沿，同时要尽可能减少与培养皿的接触面，一般规定只能用双手的拇指和食指取放。
·接种工具灭菌也分两步，一是用灭菌布包裹好，在高压锅里灭一次，这一步由灭菌人员负责完成；二是在工作台上，从布包里取出后，先用酒精擦拭一下，再放在酒精灯火焰上灼烤一遍，其要求是工具的每一点在火焰上灼烤时间不得少于5秒钟。在工具灭菌之前，工作人员的手部，包括手腕，都要用酒精仔细擦拭一遍。
2 接（转）苗：包括取苗、切苗和接苗三步。
·取苗：先解开培养瓶的瓶盖（封口膜），如果不能一次取出其内的全部材料，要先把封口膜（瓶盖）口对者风源放在酒精灯的左前方，然后把瓶口在酒精灯上烤7～10秒；正式取苗时，瓶口不要斜向外；一次取苗不可太多，以免风干。
·切苗：培养皿放在离风窗10～20厘米处，不可太往外；镊子和手术刀都不可太热，最好是凉的，且在操作过程中，刀和镊都要培养皿斜上方操作，不可在其正上方操作；在切苗过程中产生的垃圾可堆放在培养皿内的一侧位置上，若非迫不得已，不可弄到培养皿外。
·接苗：培养瓶盖（或封口膜）的放置方法和及瓶口灼烤方法与取苗时的相同，烤完瓶口后，要先倒掉瓶内多余的水分，然后在接苗；接苗时，镊子最好不要与瓶口接触，一瓶内一般接5～6棵苗，不要放得太多；组培苗在瓶内要排放均匀、整齐、美观。
·封口、记录：封口膜要及时捆绑，其松紧度以用手转不动为准；下台前要把品种代号、培养基类型、个人编号以及接种日期标示到瓶上。离开之前还要把工作台收拾干净，把接种过程中产生的垃圾清理掉，台上的物品也要摆放整齐。
三 组培苗的管理
1.瓶苗要整齐的摆放在自己的组培架上，不可乱放。
2.接种人员每天都要统计自己的接种数量，包括转前瓶数和转后瓶数。
3.值日人员要定时开灯、关灯，保证组培苗有足够的光照时间，但也不可过长，以每天14小时左右为宜。
四 接种用具的清洗
1.洗刷培养瓶、培养皿：第一步：把培养瓶培养皿放入洗洁净溶液里，先用毛刷清洗内部，再用钢丝球把外面的字清洗掉。第二步：把他们再用清水冲洗3-5遍。第三步：把瓶内的积水倒掉，倒放在准备台，准备台上要先放一层纱布。这一步的清洁标准是：凉干的瓶壁（器皿）内外无明显的斑点、污迹。
2.洗涮镊子：用洗洁精浸泡五分钟，用钢丝球打磨一下然后放入清水冲洗三遍。
五 灭菌
1.对污染苗灭菌：一经发现就随即灭菌处理，大量的进行高压灭菌，少量的加入工业酒精在室外进行处理。
2.室内空气灭菌：每四周用高锰酸钾和甲醛对室内空气灭一次菌。
3.室内地面：每2－3天用新洁尔灭拖一遍地。
4.卧式和手提式高压灭菌锅使用程序：严格按使用说明书操作。
硬件：建立一个植物组织实验室和一个植物组织培养室。实验室中要有超净工作台，可以在实验室中上方设置紫外灯消毒杀菌，超净工作台前要有凳子，酒精灯，镊子，手术刀，试管架（摆放手术刀和镊子），小剪子，酒精棉，75%酒精，封口膜，培养皿或培养瓶。组织培养室要有组织培养箱，要求控制光照，温度，湿度的。根据你们实验室的规模定数量，或者可以直接用架子和灯管建立一个简易组培室（个人建议资金够得情况下买培养箱较好）
另外，还可建立一个人工气候室，模拟大自然环境，将培养好的组织培养苗移栽摆放在人工气候是培养。
软件：人工清扫，管理，植物组织培养技术，实验人员对实验材料管理和照看，如果有人工气候室，需要有电脑和控制板，来控制人工气候室的光照，温度和湿度。
器材：超净工作台，培养箱，培养架，灯管（紫外和白炽灯），酒精灯，脱脂棉，酒精，镊子，剪刀，手术刀，试管架，培养皿，培养瓶。
人力管理：设置责任制，主要管理清洁，消毒，植物组织照看过程（时刻观察是否染菌，生长情况，即使更换培养基，或者移栽），技术人员对植物组织实验的实验周期，（植物组培是一个不断重复的过程，所以需要实验人员做大量的实验才能大到效果）。
如果觉得不够直观，我可以给你几张照片看看，祝你好运！
吲哚乙酸（ IAA） 或 2 ，4 – D （生长素类似物）。
氯化汞（升汞）或次氯酸钠。
6- 苄基氨基腺嘌呤（ 6-BA ）
MS 培养基
0.1 mol/L NaOH与 0.1 mol/L HCl
配制培养基
（1 ）愈伤组织诱导培养基： MS 培养基（蔗糖含量为 10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L 琼脂 10g/L ）。
（ 2 ）试验培养基：在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。
吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。
仪器设备
培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（ 100mL ），烧杯，量筒，培养皿，棉线，接种箱或超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮纸。
培养基灭菌
将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至 pH 5.8 ，趁热分装于 100 mL 三角烧瓶中，每瓶约 20 mL 。待培养基冷却凝固后，用一层称量纸和一层牛皮纸包扎瓶（管）口，并用棉线扎牢，然后在高压灭菌锅中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。
植物组织培养步骤
第一步，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放人为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。
第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下，待酒精蒸发后再剥除外层，取用内部材料。
第三步是用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多，可根据情况选取1—2种使用见表。第四步是用无菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，视采用的消毒液种类，涮洗3-l0次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意：①酒精渗透性强，幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料，特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些，如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿，所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08—0.12%的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面的张力，达到更好的消毒效果。
答：（ 2 ）试验培养基：在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（ 100mL ），烧杯，量筒，培养皿，...
答：植物组织培养方法 1 MS培养基的配制包括以下步骤.培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液.这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加...
答：1.洗刷培养瓶、培养皿：第一步：把培养瓶培养皿放入洗洁净溶液里，先用毛刷清洗内部，再用钢丝球把外面的字清洗掉。第二步：把他们再用清水冲洗3-5遍。第三步：把瓶内的积水倒掉，倒放在准备台，准备台上要先放一层纱布。这一步的清洁标准是：凉干的瓶壁（器皿）内外无明显的斑点、污迹。2.洗...
答：1、培养方法 (1)固体培养法 即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单,易行,但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。 (2)液体培养法 即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少,所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保...
答：取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解 剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种 5小片,一共接种6瓶.接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同 样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观 察...
答：以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作:1.先在烧杯中放入一些蒸馏水。2.分别取上面八种母液10ml倒入。3.一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。4.加蒸馏水用量筒定溶至1L。5.按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差...
答：接种和培养 (一)接种在无菌坏境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种1-2个,以防止交叉污染。(二)封口接种后,瓶、管用无菌药棉或盖封口,培养皿用无菌胶带封口。 (三)温度培养基大多应保持在25℃左右,但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。增殖外植体的增殖是组培的关键阶段,在新梢等形成后为了...
答：组培设备与条件 开展植物组织培养工作需要一个比较合理实用的场所，一套适宜的设备和提供必要的实验环境条件，这是首先要考虑到的。根据科学、合理的原则，一个较为理想的配置应该包括：1、化学药品室。2、配培养基室。3、灭菌室。4、接种室。5、无菌培养室。基本仪器设备与用品 1、仪器设备 超净工作...
答：1. 在无菌环境中，立即将外植体接种到培养基上，每瓶接种4至10个外植体。2. 接种后，用无菌药棉或封口膜封口，培养皿则用无菌胶带密封。3. 培养基的温度通常保持在25℃左右，但需根据花卉种类和材料部位调整。4. 外植体的增殖是关键步骤，需要继代培养。将材料分株或切段转入增殖培养基中，该培养基...
