纯化大肠杆菌的实验方案
1、纯化大肠杆菌在一定意义上来说就是细菌(大肠杆菌)培养的一种。
2、纯化是细菌培养的一步。在为培养基接种菌种后,在其繁殖到一定条件时使用一定的药剂,杀死杂菌,得到目的细菌(可能说细胞更准确,因为在很多培养试验中都需要纯化)。为培养基接种,除非接种的是经过纯化的菌种,否则都会有杂菌,而杂菌会影响目的菌繁殖或影响收集产物。如要得到耐药大肠杆菌,就需要对接种大肠杆菌的培养基加抗生素,杀死不耐药的大肠杆菌,得到耐药大肠杆菌。
3、英文: Bacteria purification
4、相关资料:
(1)此外还应用电子显微镜对分离纯化的病原细菌进行了超微结构观察。
In addition, the ultrastructure of the isolated pathogenic bacteria was observed by TEM.
(2)另外,研究发现,自然界粘细菌中绝大多数为未培养粘细菌,因此分离纯化新的粘细菌是具有潜力并且十分迫切的一项工作。
In addition, the previous study bears evidence of the majority of the myxobacteria in nature being uncultured . Isolation and purification of novel myxobacteria is a potential and urgent work.
(3)从海水和养殖对虾体表及体内分离纯化得到223株细菌。
Isolates 223 strains of bacteria from sea and surface and coelom of cultured shrimp.
扩展资料:
纯化的注意事项:(以蛋白质为例)
1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。
2、不要太稀,蛋白浓度维持在μg/mL~mg/mL。
3、合适的pH,除非是进行聚焦层析,所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同,防止蛋白质的沉淀。
4、使用蛋白酶抑制剂,防止蛋白酶对目标蛋白的降解;在纯化细胞中的蛋白质时,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA对蛋白的污染。
5、避免样品反复冻融和剧烈搅动,以防蛋白质的变性。
6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。
7、在缓冲溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫苏糖醇)(或β-巯基乙醇),防止蛋白质的氧化。
8、加1~10mmol/LEDTA金属螯合剂,防止重金属对目标蛋白的破坏。
9、使用灭菌溶液,防止微生物生长。
参考资料来源:百度百科 - 蛋白质纯化
参考资料来源:百度百科 - 大肠杆菌
无法解答
1.原理:稀释或划线分离,出现单菌落,根据菌株菌落状态挑取所需菌株。2.实验材料:待分离菌株,各种药品
3.用具接种环,培养皿,试管,灭菌锅,超净工作台,酒精灯,恒温培养箱
4.步骤:配制大肠杆菌琼脂培养基,灭菌,倒平板,取出待分离菌株,在超净台,挑取划线至培养皿,平板倒置于培养箱培养,37摄氏度,一般2天左右。待长出单菌落,挑取所需菌株至斜面培养基,冰箱保藏。
5.价值:分离纯化或复壮菌种。
答:1.原理:稀释或划线分离,出现单菌落,根据菌株菌落状态挑取所需菌株。2.实验材料:待分离菌株,各种药品 3.用具接种环,培养皿,试管,灭菌锅,超净工作台,酒精灯,恒温培养箱 4.步骤:配制大肠杆菌琼脂培养基,灭菌,倒平板,取出待分离菌株,在超净台,挑取划线至培养皿,平板倒置于培养箱培养,37...
答:大肠杆菌的实验室诊断方案包括以下几种方法:1. 血清学检查:包括凝集试验、补体结合试验、间接血凝试验等,可以检测患者血清中是否含有大肠杆菌抗体,如果结果呈现阳性,说明可能含有大肠杆菌,如果结果呈现阴性,说明可能不含有大肠杆菌。2. 气相色谱法(GC):主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后,...
答:挑取单菌落。⑤原始样品用无菌水稀释后,加富培养基中添加15%的乙醇,然后接种样品,置于30℃培养2~3天。长出的菌为酿酒酵母。酿酒酵母是已知的唯一乙醇浓度可以耐受到15%以上的微生物。根据这个特点将它从样品中分离。望采纳
答:从原液中吸取一毫升加入第一支试管混匀,从第一支试管吸取一毫升加入第二支试管……依次往下。每加一次就是稀释十倍,一般稀释到1000倍即可。(就是到达第三个试管就可以)吸取稀释后的菌液微量在平板培养基中,用L棒涂抹均匀,在超净台中操作,待干了之后放在37度培养箱培养过夜,24小时后观察有无...
答:根据不同的纯化标签对应的亲和层析色谱可以分离出表达的目的蛋白 亲和色谱是将与某一组蛋白对应的特异性配基结合到色谱基质上,蛋白质因为有纯化标签可以与其特异性的配基结合,并且这种结合是可逆的。这样可以很轻松提取分离出表达的目的蛋白。下图是一些可以特异性结合的配基 ...
答:】,实验方案,所需仪器,材料,用具和药品,温度和时间,【防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。】,【1.取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。3、在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。】,避免混淆,【注明...
答:用的水是无菌水吗?如果严格灭过菌的话,一般不需要没划线的板了,你再核实一下实验方案
答:在大肠杆菌中,当外源蛋白高水平表达的时候,极易形成包涵体,为蛋白纯化等下游工作带来很大的麻烦.下面是一些可以参考的有助于提高目的蛋白可溶性表达的实验方案:1.降低蛋白合成的速度.可以通过以下方法实现:a.降低培养温度 b.使用弱启动子 c.使用低拷贝数的质粒表达载体 d.降低诱导物的浓度2.改变培养基...
答:我的见解如下:1。先要获得野生型大肠杆菌的纯培养物 2。诱变:可以选择各种诱变法,如紫外线诱变法,将一定浓度的菌液(可分成好几等分分别做实验)放在一定强度的紫外灯下照射,那分成的几等分可以分别照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太浓,这个操作应该在黑暗的条件下进行,...
答:培养皿,固体培养基,大肠杆菌 方案:两个培养皿内加入适量的固体培养基,高温灭菌处理,分别命名为AB.引入等量的大肠杆菌.A加入抗生素,B加等量蒸馏水.放在恒温箱中培养一定时间,取出,观察菌落大小.结果1:AB菌落大小相同,则该抗生素对大肠杆菌无效 2A的菌落明显大于B,则该抗生素对该细菌有杀死或抑制作用 ...