乳糖发酵检验大肠菌有时只产酸不产气是怎么回事?
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-08-23
用乳糖初步发酵天然水，结果产酸产气，是否说明一定有大肠杆菌污染，为什么？
大肠菌群是一群需氧和兼性厌氧的，能在37℃培养24h内使乳糖发酵产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，包括埃希氏菌属（Escherichia）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、肠杆菌属（Enterobacte）、克雷伯氏菌属（Klebsiella）等，又称总大肠菌群（total coliform）。它们随粪便进入水体后，某些菌株可适应新环境而发生后继繁殖，成为天然菌系的一部分。为把它们与粪便中的大肠菌群区分开来，将培养温度提高至44.5℃±0.2℃，在该温度下仍能生长并发酵乳糖产酸产气的称为粪大肠菌（feacal coliform）。
二、步骤和方法
检测大肠菌群的标准方法有多管发酵法和膜滤法。
（一）多管发酵法（即最大可能数法，most probable number，简称MPN法）
于一系列发酵管中接种一定量水样，根据乳糖发酵产酸产气的阳性管数，测知水样含大肠菌群数。
1．总大肠菌群
（1）初发酵试验 以无菌操作术向各乳糖蛋白陈培养液发酵管（瓶）内注入一定量水样，混匀后置37℃温箱培养24h。产酸产气者为阳性。阴性者继续培养24h±3h再行检查。混浊而无气泡者，轻摇试管，注意观察有无小气泡上浮。有小气泡不断上浮，表示发酵正活跃，否则判为阴性。
接种水样量、平行管（瓶）数参考如下：
饮用水100ml，2瓶；10ml 10管
未污染水10ml、1ml、0.1ml各5管
受污染水0.1ml、0.01ml、0.001ml各5管
污水0.001ml、0.0001ml、0.00001ml各5管
这里，0.1ml即稀释10倍的水样1ml，余类推。接种水样量大（10ml、100ml）的管（瓶）内培养液应是浓缩液，使其在加入水样后为单倍浓度（普通浓度）。
（2）平板分离 轻摇初发酵试验阳性管，用接种环或一端挠起的接种针以无菌操作术取上述各阳性管的培养物，分别在伊红美兰平板上划线接种，平板倒置于37℃温箱培养18h～24h。呈深紫红色、有或无金属光泽的菌落，为典型大肠菌菌落，粉红色、粘液状、不透明的为非典型菌落，其他状态的均为阴性菌落。
（3）复发酵试验 取典型或非典型菌落（无典型菌落时取非典型菌落）的部分培养物作涂片，革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则取该菌落的另一部分培养物再接种于普通浓度的乳糖蛋白胨发酵管内，每管可接种分离自同一初发酵管的最典型菌落1个～3个。置37℃温箱培养24h，产酸产气者证实有总大肠菌群存在。
（4）报告 根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数，查表（见表5－1），并按初发酵试验接种水样量换算后，报告每升水样的总大肠菌群数。对表中未能列入的组合，以及当试管数和稀释情况不同时，可利用托马斯（Thomas）氏公式来计算：
你的问题很有意思,能不能简单介绍一下实验原理.我不是搞微生物的,但我学过.这应该是食品工程的实验吧!我个人认为如果奶粉中有大肠杆菌那么一定是产CO2气体的.不产气就不对.很可能是空气中染菌了.至于红色球菌我就不知道了!
红色球菌，的产生原因：一个 是温度没控制好。二是空气污染严重
不明白,得到答案也给我发个,我的邮箱:dixyxs@yahoo.com.cn
感觉是杂菌,可能是环境空气洁净级别太低,混进去的杂菌.
你还是用IMViC实验吧．．．
大肠菌群检测时只变色而未产生气泡,是怎么回事
答：如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36c，24h＋－2h 。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）13，取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中 ，然后再培养36c＋－1c，24h＋＋－...
痢疾杆菌分解乳糖产酸产气吗
答：产酸不产气。根据查询?猿搜题APP显示，痢疾杆菌的乳糖酶活性在不同菌株之间差异较大，菌株则能够产生乳酸，但不产气。
哪些菌可以发酵乳糖?哪些菌可以发酵葡萄糖?
答：不同的微生物具有发酵不同糖（醇）的酶类,所以发酵途径及发酵产物各不相同.例如：大肠杆菌能使乳糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则不能；大肠杆菌能使葡萄糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则只产酸,不产气.绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能...
如何判断大肠杆菌产酸产气
答：液体培养基中加入小导管和指示剂，产气的话，在小导管内会有气体存在，产酸的话液体会变色。
粪大肠菌群检验,如何判断已经产酸或者产气?
答：用乳糖胆盐发酵实验(发酵24小时,36度)，发酵管只变黄色(产酸),而液面上及小导管中有气泡(产气)
乳糖胆盐发酵培养后产酸产气就一定是大肠菌群吗?
答：写的多并不一定有用，乳糖胆盐发酵培养基验证大肠菌群主要是判定阴性还是阳性的，而不是验证有无大肠菌群的。是通过产酸产气来判定的，但产酸产气并不能判定直接判定，第一次单料培养如果不产酸产气，则一定为阴性。在食品检验中可以直接报告，如过产酸产气则要接种进行双料培养，双料培养不产酸产...
怎样判断微生物是否发酵和产酸产气
答：24士2) h.如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠杆菌群阴性 复发酵证实试验 在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1一2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置（36士1)℃恒温箱内培养（24士2) h,观察产气情况.凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌,即可报告为大肠菌群阳性.
检测大肠杆菌,9管发酵管只有一管产酸产气说明有大肠杆菌吗?
答：有可能。只要产酸产气，就得继续做鉴定，直到复发酵管也产酸产气后，才能鉴定有大肠杆菌。
食品中的大肠杆菌的检测方法
答：培养基配置 检样、稀释 乳糖胆盐发酵管观察：（36摄氏度24小时）3.1不产气 大肠杆菌阴性 3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板 3.2.1G染色，G阳性，说明大肠杆菌阴性 3.2.2乳糖发酵管（36摄氏度24小时），同样不产气，大肠杆菌阴性
大肠杆菌在三糖铁上的现象
答：大肠杆菌在三糖铁上的现象：大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸产气，使斜面与底层均呈黄色、且底层有气泡。伤寒杆菌、痢疾杆菌只能发酵葡萄糖而不分解乳糖，分懈葡萄糖产酸使pH降低，因此，斜面和底层先都呈黄色，但因葡萄糖含量较少。所生成少量的酸可因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖较盛，分解...
大肠菌群可以发酵乳糖产酸产气，反过来说就不合适了，更不能确定是大肠杆菌吧！可以参照国标继续培养以确认
本方法采用乳糖胆盐培养基，是具有选择性作用的培养基。其中胆盐具有抑制革兰氏阳性菌的作用。胆盐的品种来源及用量不同，其抑菌效果也不同。目前国内常见的胆盐有国产的生检7号和3号胆盐，进口的Difco和Oxoid,No.3胆盐，以及牛胆盐、羊胆盐、猪胆盐，免胆盐和家禽胆盐等。
有时因某种胆盐不易购得，需用其他胆盐代替时，应重新测定抑菌的有效剂量，这些情况给使用者带来不便。经实验观察，猪、牛、羊三种胆盐对大肠菌群的检验效果无明显、差异，可互相替代；而其他胆盐的检验效果则不一致。不宜相互代替。在胆盐用量上，实验表明l％、0.5％和0.25％三个剂量间无何差异，所以本方法采用的胆盐剂量（0.5％）是适宜的，在称量时稍有误差，亦不致影响大肠菌群的检出。
（2）乳糖发酵试验
乳糖发酵试验使用乳糖胆盐发酵培养基，细菌分解糖类是依靠细菌细胞所产生的各种酶类的作用，细菌产生的分解糖的酶随细菌种类不同而异，可以此鉴别细菌。
大肠杆菌能分解乳糖而产生酸，使培养基的pH降低（指示剂变色）。这一现象可作为观察结果的指标。大肠杆菌细胞在酸性环境中，由于甲酸脱氢酶的作用，可使甲酸分解成C02和H2，在培养基中产生大量气体而进入倒管中，以观察产气。
在乳糖发酵试验中，经常可以看到在发酵倒管内有极微量的气泡，类似这样的情况能否算产气阴性？一般来说产气量与大肠菌群检出率呈正相关，但产气量小不一定大肠菌群都是阴性，因此应慎重处理。
对这种产气量小或倒管内虽无气泡，糊液面及管壁可看到缓缓上浮的小气泡的情况时，均应作进一步观察与鉴别。
是否可以解决您的问题？
大肠菌群是一群需氧和兼性厌氧的，能在37℃培养24h内使乳糖发酵产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，包括埃希氏菌属（Escherichia）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、肠杆菌属（Enterobacte）、克雷伯氏菌属（Klebsiella）等，又称总大肠菌群（total coliform）。它们随粪便进入水体后，某些菌株可适应新环境而发生后继繁殖，成为天然菌系的一部分。为把它们与粪便中的大肠菌群区分开来，将培养温度提高至44.5℃±0.2℃，在该温度下仍能生长并发酵乳糖产酸产气的称为粪大肠菌（feacal coliform）。
二、步骤和方法
检测大肠菌群的标准方法有多管发酵法和膜滤法。
（一）多管发酵法（即最大可能数法，most probable number，简称MPN法）
于一系列发酵管中接种一定量水样，根据乳糖发酵产酸产气的阳性管数，测知水样含大肠菌群数。
1．总大肠菌群
（1）初发酵试验 以无菌操作术向各乳糖蛋白陈培养液发酵管（瓶）内注入一定量水样，混匀后置37℃温箱培养24h。产酸产气者为阳性。阴性者继续培养24h±3h再行检查。混浊而无气泡者，轻摇试管，注意观察有无小气泡上浮。有小气泡不断上浮，表示发酵正活跃，否则判为阴性。
接种水样量、平行管（瓶）数参考如下：
饮用水100ml，2瓶；10ml 10管
未污染水10ml、1ml、0.1ml各5管
受污染水0.1ml、0.01ml、0.001ml各5管
污水0.001ml、0.0001ml、0.00001ml各5管
这里，0.1ml即稀释10倍的水样1ml，余类推。接种水样量大（10ml、100ml）的管（瓶）内培养液应是浓缩液，使其在加入水样后为单倍浓度（普通浓度）。
（2）平板分离 轻摇初发酵试验阳性管，用接种环或一端挠起的接种针以无菌操作术取上述各阳性管的培养物，分别在伊红美兰平板上划线接种，平板倒置于37℃温箱培养18h～24h。呈深紫红色、有或无金属光泽的菌落，为典型大肠菌菌落，粉红色、粘液状、不透明的为非典型菌落，其他状态的均为阴性菌落。
（3）复发酵试验 取典型或非典型菌落（无典型菌落时取非典型菌落）的部分培养物作涂片，革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则取该菌落的另一部分培养物再接种于普通浓度的乳糖蛋白胨发酵管内，每管可接种分离自同一初发酵管的最典型菌落1个～3个。置37℃温箱培养24h，产酸产气者证实有总大肠菌群存在。
（4）报告 根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数，查表（见表5－1），并按初发酵试验接种水样量换算后，报告每升水样的总大肠菌群数。对表中未能列入的组合，以及当试管数和稀释情况不同时，可利用托马斯（Thomas）氏公式来计算：
你的问题很有意思,能不能简单介绍一下实验原理.我不是搞微生物的,但我学过.这应该是食品工程的实验吧!我个人认为如果奶粉中有大肠杆菌那么一定是产CO2气体的.不产气就不对.很可能是空气中染菌了.至于红色球菌我就不知道了!
红色球菌，的产生原因：一个 是温度没控制好。二是空气污染严重
不明白,得到答案也给我发个,我的邮箱:dixyxs@yahoo.com.cn
感觉是杂菌,可能是环境空气洁净级别太低,混进去的杂菌.
你还是用IMViC实验吧．．．
答：如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36c，24h＋－2h 。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）13，取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中 ，然后再培养36c＋－1c，24h＋＋－...
答：产酸不产气。根据查询?猿搜题APP显示，痢疾杆菌的乳糖酶活性在不同菌株之间差异较大，菌株则能够产生乳酸，但不产气。
答：不同的微生物具有发酵不同糖（醇）的酶类,所以发酵途径及发酵产物各不相同.例如：大肠杆菌能使乳糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则不能；大肠杆菌能使葡萄糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则只产酸,不产气.绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能...
答：液体培养基中加入小导管和指示剂，产气的话，在小导管内会有气体存在，产酸的话液体会变色。
答：用乳糖胆盐发酵实验(发酵24小时,36度)，发酵管只变黄色(产酸),而液面上及小导管中有气泡(产气)
答：写的多并不一定有用，乳糖胆盐发酵培养基验证大肠菌群主要是判定阴性还是阳性的，而不是验证有无大肠菌群的。是通过产酸产气来判定的，但产酸产气并不能判定直接判定，第一次单料培养如果不产酸产气，则一定为阴性。在食品检验中可以直接报告，如过产酸产气则要接种进行双料培养，双料培养不产酸产...
答：24士2) h.如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠杆菌群阴性 复发酵证实试验 在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1一2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置（36士1)℃恒温箱内培养（24士2) h,观察产气情况.凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌,即可报告为大肠菌群阳性.
答：有可能。只要产酸产气，就得继续做鉴定，直到复发酵管也产酸产气后，才能鉴定有大肠杆菌。
答：培养基配置 检样、稀释 乳糖胆盐发酵管观察：（36摄氏度24小时）3.1不产气 大肠杆菌阴性 3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板 3.2.1G染色，G阳性，说明大肠杆菌阴性 3.2.2乳糖发酵管（36摄氏度24小时），同样不产气，大肠杆菌阴性
答：大肠杆菌在三糖铁上的现象：大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸产气，使斜面与底层均呈黄色、且底层有气泡。伤寒杆菌、痢疾杆菌只能发酵葡萄糖而不分解乳糖，分懈葡萄糖产酸使pH降低，因此，斜面和底层先都呈黄色，但因葡萄糖含量较少。所生成少量的酸可因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖较盛，分解...
