(2012?浦东新区二模)分析回答下列有关微生物的问题.【1】如图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-16
(2012?黄浦区二模)(七)回答下列有关微生物和基因工程问题.I大肠杆菌的培养基配方如下: 琼脂

(1)培养基中含有乳糖、蔗糖等有机碳源,说明大肠杆菌的营养类型是异养型;培养基中含有伊红和美蓝,说明该培养基属于选择培养基.(2)作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来.故选:ABC.(3)获取目的基因需要限制酶,限制酶能识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序列,并能切断其中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键.试管Ⅰ中进行的是基因表达载体的构建过程,还需要DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒.(4)PUC118质粒携带了氨苄青霉素抗性基因(标记基因),受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,这样才能在含有氨苄青霉素的培养基上筛选出导入重组质粒的受体大肠杆菌.(5)由第(4)问可知,培养基中还需加入氨苄青霉素以筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌.(6)lacZ基因中如果没有插入外源基因,便可表达出β-半乳糖苷酶.当培养基中含有A物质时,A物质便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的A物质不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落.如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体PUC118质粒已转入受体菌,但目的基因没有接入运载体或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌;如果长出白色菌落,说明重组质料已导入受体大肠杆菌.故答案:(1)异养型 选择 (2)A、B、C (2分)(3)限制性核酸内切酶 能识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序列,并能切断其中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键 DNA连接酶(4)便于筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌(5)氨苄青霉素(6)①如果长出蓝色菌落,说明运载体pUC118质粒已转入受体菌,但目的基因没有接入运载体(或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌)②如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌

(1)分析图中的平板可知,在②区出现了由1个细菌繁殖而来的单菌落;该培养基上划线接种的顺序是①③②.①由于此培养基中无有机碳源,故说明培养的微生物能利用无机碳源,只有硝化细菌符合此培养基,因为其是自养型生物,能利用二氧化碳.②自生固氮菌能自身固氮而获得氮源,但自身无法获得碳源,故应在此培养基中增加有机碳源,去除氮源(NH4)2SO4.③观察菌落形态应用固体培养基,因此应加入凝固剂琼脂,配置好的培养基用高压蒸汽灭菌.④要鉴别纤维素分解菌,可通过刚果红染色法(CR染色法)鉴定,观察是否有透明圈产生,要鉴别尿素分解菌,可在培养液中加入酚红指示剂观察是否变红.故答案为:(1)②一 ③→①→②(2)①B②增加碳源(如葡萄糖等),去除氮源(NH4)2SO4③琼脂 高压蒸气④CR染色法 酚红指示剂

【1】分析题图可知,本图是平板划线操作后的实验结果,②区出现了单个菌落,产生的菌落是由一个细菌生长繁殖而来的,分析培养基上细菌的 分布可知,①③②区菌落数越来越少,所以划线操作的顺序是①③②.
【2】(1)分析表格中培养基的配方可知,本培养基中无有机碳源,用该培养基培养的微生物应是自养微生物.
(2)由于自生固氮菌是异养微生物,且能利用利用空气中的氮气作为氮源,所以如果用此培养基培养自生固氮菌应去除培养基的②成分,加入有机碳源.
(3)若表中培养基用于观察菌落形态,应将培养基变成固体培养基,即加入凝固剂琼脂.
【3】如果充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,某些微生物仍然不能正常生长,这些微生物生长除了需要水、碳源、氮源、无机盐外还需要生长因子,如某些维生素、氨基酸、核苷酸等.
故答案应为:
【1】②1    ①③②
【2】(1)自养  无有机碳源
(2)去除培养基的②成分,加入有机碳源    自生固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源,但由于自生固氮菌是异养,培养基中还需加入有机碳源.
(3)琼脂
【3】生长因子   A、B

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