请教白血病细胞集落的培养方法和操作步骤

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-04
请教细胞做RT-PCR的详细步骤

到生物秀上看看,或是找找文献。

白血病确诊是什么类型的?如果要化疗的话,必须把身体调理好,至少要控制感染,确保不会出现出血的状况。而且化疗后是不能立即出院的,要在医院观察15-20天,因为这段时间处于骨髓抑制期,有可能出先感染和出血。

博凌科为生物科技-为你解答:白血病细胞集落的培养 白血病细胞集落的培养可应用于白血病细胞药物敏感试验以及白血病细胞体外净化效果的研究。根据白血病类型不同,其集落培养体系也有所不同。主要分为急性髓 细胞白血病集落(CFU-AML)和急性淋巴细胞白血病集落(CFU-ALL)两种. (1) CFU-AML的培养由于CFU-AML的培养体系同时也促进T淋巴细胞集落(CFU-T)的生长,为了避免后者对结果的影响,一般在CFU-AML的培 养时应去除T淋巴细胞,尤其是在白血病的缓解期,方法如下。 制备克脑迷(AET)处理的1%绵羊红细胞。 常规分离单个核细胞,调整细胞浓度为1X10^7个/ml。 单个核细胞中加入等量的经AET处理的1%绵羊红细胞,再加入10%FBS,混匀,37℃孵育15min,再500r/min离心5min,置4℃2h。 混匀上述细胞,缓慢加至淋巴细胞分离液上,1500r/min离心20min,吸取界面细胞,PBS洗涤2次,用含10%FBSde IMDM洗涤2次,调整适当的细胞浓度备用。 将上述体系滴加至直径为35mm的培养皿或6孔培养板中,37℃、5%CO2以及饱和湿度环境下培养8天使进行集落计数。在琼脂培养体系中50个细胞以上的细胞团即为一个CFU-AML,而在甲基纤维素培养体系中20个细胞以上的细胞 团即为一个CFU-AML。 (2)CFU-ALL的培养CFU-ALL的培养可采用双层半固体培养法以及无血清培养法。但是,分离的耽搁核细胞需去除T细胞。去除T细胞可采用E-玫瑰花结法、尼龙棉法、以及补体融解法 等。 双层培养法。底层饲养层一般用2X10^5个/ml正常人外周血单个核细胞接种于含15%胎牛血清,0.5%琼脂的McCoy-5A培养基中。上层为2X10^5个/mlALL去T细胞的单个核细胞,接种于含15%胎牛血清,25U/ml IL-2,2.5%PHA,7.5X10-5mol/La- ME,0.8%甲基纤维素的McCoy-5A培养基中。上述体系培养于直径为35妈妈的培养皿或6孔培养瓶中,37℃、5%CO2以及饱和湿度环境下培养7天使进行集落计数,50个细胞以上的细胞团即为一个 CFU-ALL。 无血清培养法。将2X10^5个/mlALL去T细胞的单个核细胞,接种于含10mg/mlBSA,1ug /ml人转铁蛋白,8ug/ml胰岛素,10%PHA-LCM以及0.8%甲基纤维素的IMDM培养基中。细胞一般培养于直径为35mm的培养皿或6孔培 养板中,37℃、5%CO2以及饱和湿度环境下培养7天使进行集落计数,50个细胞以上的细胞团即为一个CFU-ALL。

  • 请教白血病细胞集落的培养方法和操作步骤
    答:去除T细胞可采用E-玫瑰花结法、尼龙棉法、以及补体融解法 等。 双层培养法。底层饲养层一般用2X10^5个/ml正常人外周血单个核细胞接种于含15%胎牛血清,0.5%琼脂的McCoy-5A培养基中。上层为2X10^5个/mlALL去T细胞的单个核细胞,接种于含15%胎牛血清,25U/ml IL-2,2.5%PHA,7.5X10-5mol/L...
  • 试述造血祖细胞培养在急性白血病的诊断、疗效观察、预后估计及预示复发...
    答:预后估计方面,在化疗致骨髓抑制时,若反复骨髓细胞培养均无集落形成者多数死于感染或出血;若只有白血病性集落生长者,且细胞丛/集落数的比值异常,提示疗效较差;若集落生长型恢复正常,多数可获得完全缓解。在缓解期,若生长型和集落大小都正常,多提示继续缓解;若集落消失而出现细胞丛型,常预示1~4周...
  • 对于白血病患者自体外周血干细胞移植的细胞指的是什么细胞?
    答:外周血干细胞移植的细胞,是使用粒细胞集落刺激因子后促进骨髓中的造血干细胞进入边缘池即外周血后,于外周血采集到的单个核细胞。其中造血干细胞含量较常态明显升高,但距骨髓含量还有一定差距。
  • 细胞集落刺激因子
    答:一种药物。集落刺激因子分为GCSF(重组改购人集落细胞刺激因子)或者GMCSF(重组改构人巨噬细胞集落刺激因子)两种,而GMCSF目前已经淘汰,市场上现在在使用的都是GCSF,主要的治疗方向是肿瘤放化疗或者白血病化疗后针对白细胞减少的症状,刺激白细胞的上升,减少放化疗后因身体抵抗力下降而产生感染危险。
  • 慢性粒细胞白血病求治
    答:⑤CFU-GM培养:集落和集簇较正常明显增加。指导意见:中医认为慢性粒细胞白血病属于“虚劳”、“积聚”、“血证”的范畴。我院的龟鹿生血汤”,“犀角地黄素”、“青黄散”等,肾、脾、骨髓三经同治通过“清毒换髓”、“祛瘀生新”和“滋补肝肾”修复损伤的骨髓造血干细胞,改善造血微环境,防止造血...
  • 集落刺激因子概述
    答:例如,红细胞生成素(Erythropoietin, Epo)负责刺激红细胞的生成,干细胞因子(SCF)则对造血干细胞的增殖和分化起作用。还有白血病抑制因子(LIF),它能影响胚胎干细胞并具有集落刺激效应。值得注意的是,CSF不仅作用于未成熟的造血干细胞,也能够影响多种已成熟的细胞,展现出其多功能性,促进它们的正常功能...
  • 继发性白血病的检查
    答:6.原始细胞的体外培养 继发性白血病患者的原始细胞培养示CFU-GM集落生成减少或不生成而集簇数目增多,与原发性白血病患者相似,认为白血病前期的髓系集落形成率降低具有诊断和预后意义,但对临床治疗价值有限。 大多数患者确诊时一般情况较差机体抵抗力较弱免疫功能较低既往反复的细胞毒性药物治疗使患者的骨髓造血储备能力...
  • 集落刺激因子特性介绍
    答:同时,EPO,即红细胞生成素,主要刺激红系造血祖细胞,对于血液生成有着显著影响。IL-5则被称为嗜酸性粒细胞集落刺激因子(Eo-CSF),它在某些白血病细胞株的分化中起到促进作用。而IL-1、IL-6和IL-11在骨髓多能干细胞早期分化中也有着不可或缺的作用,共同维护了造血系统的正常运作。
  • 老年人急性非淋巴细胞白血病检查
    答:3. 细胞化学和血液生化:高尿酸血症常见于一半的ANLL病例,可能是白血病细胞破坏时的表现。溶菌酶增高在M4和M5单核细胞白血病中常见,可能导致肾小管损害。ANLL患者更容易并发弥散性血管内凝血(DIC),相关检查显示血小板减少、纤维蛋白原降低、凝血酶原时间延长等。4. 细胞集落形成:白血病细胞集落形成有五...