PCR中产生的引物二聚体大概是多少bp?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-01
怎样区分引物二聚体和100bp 的PCR产物

不能正常作答

不会

一般是低于100bp的~通常用DL2000的MARKER,则一般出现在最下面,100bp的条带以下~

  • PCR中产生的引物二聚体大概是多少bp?
    答:一般是低于100bp的~通常用DL2000的MARKER,则一般出现在最下面,100bp的条带以下~
  • PCR的引物二聚体怎么判断
    答:这个不好说:一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.
  • 引物浓度对PCR的影响
    答:引物的作用是帮助游离的碱基结合到DNA单链上去,在一定范围内,引物浓度越大DNA复制越快,超过一定浓度,达到饱和状态,对PCR影响减弱,此时DNA的复制速度与底物浓度成正相关。
  • 在pcr实验中,引物的设计一般有哪些要求
    答:长度: 18~30 bp, 20 bp左右最为常用。引物过短易导致非特异性打增;较长引物特异性强,但退火效率低,且易形成二级结构,从而导致PCR产量少。二级结构:引物二聚体及发夹结构的能值过高(大于4.5 kcal/mol )易导致产生引物二聚体带,并且降低有效引物浓度,使PCR反应不能正常进行。引物扩增跨...
  • 引物二聚体是什么?我知道是怎么产生的,但是请附带图说明它是什么特点吧...
    答:具体见图,在PCR的过程中会跟你想要的PCR产物竞争,而且一般效率都会很高,因为primer dimer的size很小 图片来自英文维基 图暂时手头没有,就是大概大小在20-30bp的一条band,经常跟真正的产物一样亮甚至更亮,比较容易区分的方法就是如果在你的水control里面就看到的话就很可能有primer dimer ...
  • pcr引物的设计有哪些要求
    答:1.长度 ,至少要16bp,通常为18-30bp 2.解链温度(Tm值)3.避免引物 内部 或引物之间存在互补序列(3个碱基),从而减少 引物二聚体 的形成以及引物内部 二级结构 的形成 4.G+C含量尽量控制在40%-60%之间。4钟碱基的分布应尽可能均匀。尽量避免 嘌呤 或 嘧啶 的连续排列,以及T在3'末端的...
  • 引物设计原则
    答:7、引物二聚体及发卡结构的能量的绝对值一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体而且会降低引物浓度从而导致PCR不能正常发生。8、3'端最好不要是连续碱基,GGG或CCC会导致错误的引发,同时3'端最后一个碱基最好不要是A或T,若是,会导致错配。9、以公式Tm=4*(G+C)+2*(A+T)-5计算Tm...
  • 如何进行引物设计?
    答:(2)引物二聚体及发夹结构的能量一般不要超过4.5kcal/mol,否则容易产生引物二聚体带而且会降低引物浓度从而导致PCR正常反应不能进行。引物5’端和中间G值应该相对较高,而3’端值较低。引物3’端的A/G值过高,容易在错配位点形成双链结构并引发DNA聚合。6、3’端:引物3’端是引发延伸的起点,...
  • PCR扩增的引物问题
    答:首先你应该确定的是引物对1和引物对2在16S RNA上的位置,如果没有办法确定,那么凭你现有的实验结果说明这两段扩增产物应该是重叠的,当然也不排除产生非特异扩增的可能性
  • 引物2OD或者5OD是什么概念
    答:引物的量。5OD引物其实是很多的,2 OD引物一般情况下可以做2000个PCR反应。为了确定引物浓度,可以在260nm(OD260)测量光密度值。然后使用光吸收值和微摩消光系数的倒数(nmol/OD),通过Beers法则计算引物浓度。1个OD值的合成DNA的重量约为33ug。1 OD260= 33 ug/ml. 。