HUVEC细胞培养攻略

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-02


揭秘HUVEC的细胞世界:从营养到生长策略




人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC),作为血管构建的关键细胞,其在实验中的角色举足轻重。在选择细胞模型时,科学家们通常青睐于使用这种细胞,而非其他类型的内皮细胞。通过慢病毒转染,永生化的HUVEC会被赋予RFP或GFP基因,便于观察和追踪。




精心喂养的“挑剔”细胞


HUVEC的营养需求堪称“挑剔”,它们钟爱营养丰富的F12培养基,加上必不可少的胎牛血清(具体成分见表1)。同时,肝素和血管内皮生长因子是它们健康的保证。健康的HUVEC,如图1所示,呈现出鹅卵石般的美丽纹理,铺展均匀,通常在2-3天内即可完成初次传代。




警惕空泡化:细胞健康的小信号


换液后的第二天,若发现无限细胞系出现空泡化,如图3所示,这可能预示着问题。空泡化可能是细胞凋亡的标志,或是环境因素影响(如pH失衡或血清问题)。解决方法包括监测培养液的pH值,确保其在7.2-7.4的理想范围内,或定期更换新鲜的血清和培养基。




贴壁英雄:预防聚团的小妙招


当培养瓶的亲水性不足或血清促贴壁因子缺乏时,细胞聚团问题便会出现。解决之道在于使用明胶包被,如图4所示的均匀贴壁。T25培养瓶的包被方法是:加入5ml明胶,37℃静置30分钟,然后吸出多余液体。




细胞培养的全方位关怀


每个细胞形态的异常都可能揭示着独特的信号。通过观察和细致的处理,我们为您的细胞提供“望、闻、问、切”的全面诊断,确保它们在培养过程中健康成长。




下一站,探索更多细胞世界


我们期待与您分享更多细胞培养的策略。您的想法和问题,欢迎留言讨论。对于细胞培养的任何疑问,扫一扫加我微信,一起解决。




注:所有图片仅供参考,版权归属网络和客户,学习之用。



  • 请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好
    答:请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好 原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下...
  • WEHI细胞是什么细胞
    答:10% 胎牛血清 HL-60 成淋巴细胞 人 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清 HT-1080 上皮细胞 人 纤维肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和NEAA HT-29 上皮细胞 人 结肠腺癌 McCoy's 5A, 10% 胎牛血清 HUVEC 内皮细胞 人 脐带 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ ml I-10 ...
  • 导致细胞污染原因的有哪些?
    答:博凌科为生物科技-为你解答:养细胞就像养孩子,甚至比养孩子还难。忘记是谁这么说了。上次一次性死了14瓶细胞,前后分析都是培养基污染了。然后换了新培养基,换了新的种子, 开始长得不错,但今天看了一下,又污染了,培养基变浑浊。我养的是HUVEC,8月4日从一个老师处取种子(8月3日复苏)...
  • NF-kappaB细胞信号传导通路NF-kappaB对ICAM-1表达的调节作用
    答:研究目标聚焦于NF-kappaB对粘附分子ICAM-1表达调控的研究。实验设计如下:首先,从原代培养的HUVECs中获取细胞,采用100 ng.ml-1的LPS刺激,设定不同的时间点,包括1小时、4小时、8小时和24小时。在4小时时,先用NF-κB抑制剂PDTC(1 mmol.L-1)处理细胞15分钟,然后分别进行核蛋白提取并使用...
  • NF-kappaB细胞信号传导通路的调节作用
    答:目的:研究NF-kappaB对粘附分子ICAM-1表达的调控作用。方法:原代培养HUVECs,用LPS(100 ng.ml-1)刺激不同时间(1、4、8、24 h)后,其中于4 h处预先用NF-κB抑制剂PDTC(1 mmol.L-1)处理15 min,再分别提取核蛋白进行凝胶电泳迁移改变分析(Electrophoretical Mobility Shift Assay EMSA)法测定NF-...
  • 有哪位高手能详细指导一下用transwell板做细胞趋化实验的具体方法和步...
    答:尤其是细胞为圆形的时候,就会分辨不出是穿过去的细胞还是没穿过去的细胞,对于长梭形细胞来说,穿过去的细胞为长梭形,没穿过去的细胞多为圆形。2. 4 苏木素染色 上室浸泡在新苏木素中的时间为1 min ,用过多次的苏木素为2 min。在研究粉防己碱对HUVEC 人类脐静脉内皮细胞迁移能力的抑制作用没有将...
  • 可以用非肿瘤细胞做体内肿瘤转移实验吗
    答:HUVEC在体外迁移什么的是很好的,但是体内生存环境不同,接种后survival都是问题何况转移了;建议采集临床卡波氏肉瘤标本进行动物接种和传代,如果能够生长,再进行分离培养和荧光素酶标记,进行体内研究。难度比较大,但如果做出来了会很有开创价值。
  • 特定细胞是怎么提取的?
    答:免疫细胞从外周血的提取,经过离心、分离及细胞收集,特定的免疫细胞可以通过流式进行分选。
  • 细胞培养为什么选择24、48和72小时?
    答:细胞培养周期为什么选择24小时,48小时和72小时?因为这就是一个细胞的生产周期,可以最大限度的看出细胞是否有分类啊。
  • 问一下关于细胞培养的问题
    答:是的,这是细胞衰老造成的,这个问题现今无法得到解决,有两种说法:1,细胞不断分裂产生自由基攻击自身结构,导致细胞功能异常,无法分裂;2,染色体末端有一种叫端粒的碱基序列,每次分裂都会缩短,最后导致细胞无法分裂。而无限细胞系是因为癌变产生的,可以无限增殖 ...