Didymin调控M1→M2巨噬细胞分化以改善脂肪酸氧化所致的溃疡性结肠炎。
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-28
大家好，我是小燕同学，本次为大家介绍一篇关于枳实香蜂草苷Didymin治疗溃疡性结肠炎的文章，题目为“ Didymin switches M1-like toward M2-like macrophage to ameliorate ulcerative colitis via fatty acid oxidation”，该文由南京中医药大学胡立宏、张毅楠教授团队在2021年4月12日发表于 Pharmacological Research ，JCR分区：Q1，IF=5.893，原文链接：Lv Q, Xing Y, Liu Y, Chen Q, Xu J, Hu L, Zhang Y. Didymin switches M1-like toward M2-like macrophage to ameliorate ulcerative colitis via fatty acid oxidation. Pharmacol Res. 2021 Apr 27;169:105613. doi: 10.1016/j.phrs.2021.105613. Epub ahead of print. PMID: 33915297.
研究背景
溃疡性结肠炎（UC）作为一种慢性多发性消化道炎症性疾病，发作时肠道微生物通过受损的上皮屏障进入肠粘膜，激活以中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞等多种免疫细胞主导的炎症反应。恢复巨噬细胞极化平衡是缓解UC活动期过度炎症反应的有效策略。
香蜂草苷（didymin）作为枳实中提取的天然产物，可通过抑制NF-kB信号通路的活化从而缓解LPS诱导的炎症反应，减少前炎因子TNF-α和IL-6等的表达，被证实具有抗炎、抗肿瘤和抗氧化等多种生物活性。
科学问题
1）Didymin与巨噬细胞极化之间是否有联系？
2）Didymin是否通过调节巨噬细胞极化来行使抗炎功能？
3）其发挥功能的分子机制是怎样的？
实验思路
1. 小分子化合物药效评价：证明 Didymin 能明显减轻急性、慢性溃疡性结肠炎小鼠症状。
（1）DSS构建UC小鼠模型，模型关键指标测定、评价，确定成功造模。
（ 2 ）组别设置、给药
（ 3 ）药效学评价
（ 4 ）药物安全性评价
2. 小分子化合物调节巨噬细胞分化失衡的机制研究：证明 Didymin 能 UC 小鼠巨噬细胞 M1/M2 平衡。
（ 1 ） Didymin 对 UC 小鼠 M1/M2 失衡的逆转。
①流式细胞术
②免疫荧光法
③RT-qPCR
（ 2 ） Didymin 参与 M1 → M2 极化的转变，非 CD8+ 、 CD4+ T 细胞， CD19+ B 及 Th17 细胞。
① 流式细胞分析以排除CD8+、CD4+ T、CD19+ B细胞的影响；
②RT-qPCR分析Th17-associated transcription factor Rorc 和 Th17-associated factor Il17a 表达以排除Th17细胞产生的影响；
③体外巨噬细胞极化模型（macrophage polarization model in vitro）建立，在原代细胞上探索Didymin对巨噬细胞分化影响。
（3）Didymin 靶向 Hadhb 介导的 FAO 途径调控 M1 → M2 分化，而非 PI3K/AKT, MAPK 、 NF-κB 信号通路和糖酵解（ glycolysis ）途径。
① 给予信号通路抑制剂处理
②细胞代谢水平探究：前期文献调研，获得Warburg aerobic glycolysis参与M1极化→glycolysis 指标测定。
③继续文献调研，获得FAO 和 OXPHOS增加，促使M2表型产生→FAO测定→筛选到介导FAO的潜在靶标—Hadhb→AAV-Hadhb shRNA干预， 细胞模型 基因干扰、 动物模型 基因干扰。
3. 综上， didymin 通过选择性促进 Hadhb 表达，激活脂肪酸氧化过程，促进巨噬细胞由 M1 型转化为 M2 型，恢复肠道内巨噬细胞 M1/M2 平衡，调节肠道免疫，为 UC 的临床治疗提供新思路。
Didymin调控M1→M2巨噬细胞分化以改善脂肪酸氧化所致的溃疡性结肠炎...
答：③体外巨噬细胞极化模型（macrophage polarization model in vitro）建立，在原代细胞上探索Didymin对巨噬细胞分化影响。（3）Didymin 靶向 Hadhb 介导的 FAO 途径调控 M1 → M2 分化，而非 PI3K/AKT, MAPK 、 NF-κB 信号通路和糖酵解（ glycolysis ）途径。① 给予信号通路抑...
研究背景
溃疡性结肠炎（UC）作为一种慢性多发性消化道炎症性疾病，发作时肠道微生物通过受损的上皮屏障进入肠粘膜，激活以中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞等多种免疫细胞主导的炎症反应。恢复巨噬细胞极化平衡是缓解UC活动期过度炎症反应的有效策略。
香蜂草苷（didymin）作为枳实中提取的天然产物，可通过抑制NF-kB信号通路的活化从而缓解LPS诱导的炎症反应，减少前炎因子TNF-α和IL-6等的表达，被证实具有抗炎、抗肿瘤和抗氧化等多种生物活性。
科学问题
1）Didymin与巨噬细胞极化之间是否有联系？
2）Didymin是否通过调节巨噬细胞极化来行使抗炎功能？
3）其发挥功能的分子机制是怎样的？
实验思路
1. 小分子化合物药效评价：证明 Didymin 能明显减轻急性、慢性溃疡性结肠炎小鼠症状。
（1）DSS构建UC小鼠模型，模型关键指标测定、评价，确定成功造模。
（ 2 ）组别设置、给药
（ 3 ）药效学评价
（ 4 ）药物安全性评价
2. 小分子化合物调节巨噬细胞分化失衡的机制研究：证明 Didymin 能 UC 小鼠巨噬细胞 M1/M2 平衡。
（ 1 ） Didymin 对 UC 小鼠 M1/M2 失衡的逆转。
①流式细胞术
②免疫荧光法
③RT-qPCR
（ 2 ） Didymin 参与 M1 → M2 极化的转变，非 CD8+ 、 CD4+ T 细胞， CD19+ B 及 Th17 细胞。
① 流式细胞分析以排除CD8+、CD4+ T、CD19+ B细胞的影响；
②RT-qPCR分析Th17-associated transcription factor Rorc 和 Th17-associated factor Il17a 表达以排除Th17细胞产生的影响；
③体外巨噬细胞极化模型（macrophage polarization model in vitro）建立，在原代细胞上探索Didymin对巨噬细胞分化影响。
（3）Didymin 靶向 Hadhb 介导的 FAO 途径调控 M1 → M2 分化，而非 PI3K/AKT, MAPK 、 NF-κB 信号通路和糖酵解（ glycolysis ）途径。
① 给予信号通路抑制剂处理
②细胞代谢水平探究：前期文献调研，获得Warburg aerobic glycolysis参与M1极化→glycolysis 指标测定。
③继续文献调研，获得FAO 和 OXPHOS增加，促使M2表型产生→FAO测定→筛选到介导FAO的潜在靶标—Hadhb→AAV-Hadhb shRNA干预， 细胞模型 基因干扰、 动物模型 基因干扰。
3. 综上， didymin 通过选择性促进 Hadhb 表达，激活脂肪酸氧化过程，促进巨噬细胞由 M1 型转化为 M2 型，恢复肠道内巨噬细胞 M1/M2 平衡，调节肠道免疫，为 UC 的临床治疗提供新思路。
答：③体外巨噬细胞极化模型（macrophage polarization model in vitro）建立，在原代细胞上探索Didymin对巨噬细胞分化影响。（3）Didymin 靶向 Hadhb 介导的 FAO 途径调控 M1 → M2 分化，而非 PI3K/AKT, MAPK 、 NF-κB 信号通路和糖酵解（ glycolysis ）途径。① 给予信号通路抑...
