怎样测定果实中的可溶性糖、还原糖和蔗糖？
从还原糖的预测定中可以大致得到与20毫升铁氰化钾溶液作用时糖的消耗量，正式滴定时，在20毫升铁氰化钾和5毫升氢氧化钠溶液中，先加入比上述糖用量少0.5毫升的糖液煮沸1分钟，加指示剂1滴，边加热边逐滴滴入糖液，每加1滴都要充分摇动，直到终点为止。
可溶性还原糖的鉴定原理
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红色（沉淀）。
蛋白质的鉴定原理
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01 g／mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与铜离子作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
用于鉴定可溶性还原糖的实验材料准备
植物组织是常用的实验材料，但必须加以选择。在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储藏在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料，有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的可溶性单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。
本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官），而且组织的颜色较浅，或近于白色的，如苹果和梨的果实。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
用于鉴定脂肪的实验材料准备
实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4 h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。
做鉴定脂肪的实验，教师可根据本地区的情况选用苏丹III或苏丹IV染液。苏丹III染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹IV染液遇脂肪的颜色反应为红色。因苏丹IV染液与脂肪的亲和力比较强，所以，染色的时间应比较短，一般为1 min左右。
用于鉴定蛋白质的实验材料准备
实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋（卵白）。如用大豆，必须提前浸泡1～2 h，这样容易研磨成浆。有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可用小型的榨汁机制取。利用豆浆作实验材料，可以节约实验时间。
如果用稀释的卵白作实验材料，效果会更好。
所有的水果果实都含有葡萄糖和果糖，大部分也含有蔗糖，少数果实，如葡萄不含蔗糖。3种糖以果糖最甜，蔗糖次之，葡萄糖较差，甜度之比为100∶66∶45。
苹果的分析结果通常为：可溶性糖为9%～14%（一般为11%～12%），还原糖7%～10%（一般为9%～10%），蔗糖为0.7%～5%（一般为2%～3%）。梨的可溶性糖为7%～14%，（一般为8%～10%），还原糖6%～9%，蔗糖为0.6%～5%。仁果类（苹果、梨）的果糖含量较高，而核果类（桃、李、杏）中葡萄糖稍高于果糖。
（1）方法原理
铁氰化钾在碱性溶液中可氧化还原糖，用糖的浸出液滴定已知浓度一定量的铁氰化钾溶液时，铁氰化钾即被还原成亚铁氰化钾，还原糖被氧化成糖酸。溶液中有铁氰化钾存在时，溶液呈现指示剂的颜色。当铁氰化钾全部还原为亚铁氰化钾时，再多滴一滴糖液，指示剂就被还原成土黄色的三酚甲烷化合物，根据所消耗的糖液体积，计算糖的含量。
（2）试剂配制
①1%铁氰化钾溶液：准确称取105℃烘干100克分析纯的K3Fe（CN）6于300毫升烧杯中，加去离子水溶解，转移于1升容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，过滤后贮于棕色瓶中备用。
②2.50摩尔/升氢氧化钠（NaOH）溶液：在小烧杯中，称取NaOH（分析纯）105克，溶于水中，冷却后用水稀释至1升（A液）。摇匀后从A液中吸取5毫升，加水至100毫升（B液）。吸取B液10～15毫升，用0.1摩尔/升标准酸标定其浓度。B液浓度乘以20即为A液浓度。要求A液恰为20.50摩尔/升。
③中性醋酸铅溶液：称取300克醋酸铅［Pb（CH3COO）2·3H2O］和50克氧化铅（PbO）加水50毫升，在沸水浴上加热至白色或紫红色（约需2～3小时），然后边搅拌边加水950毫升，将此混合液倒入瓶中，盖好，放温暖处，直至溶液澄清。过滤后保存在密封的棕色瓶中备用。
④饱和硫酸钠（Na2SO4·10H2O）溶液：称取165克 Na2SO4·10H2O溶解于1升水中。
⑤次甲基蓝指示剂：1.0克次甲基蓝溶于100毫升水中。
⑥甲基红指示剂：0.2克甲基红溶于100毫升60%乙醇中。
⑦8%氢氧化钠溶液：8克氢氧化钠溶于水稀释至100毫升。
⑧稀氢氧化钠溶液：8%氢氧化钠溶液10毫升稀释至100毫升。
⑨浓盐酸（HCl）：比重1.19，分析纯。
（3）仪器设备
万分之一的天平。百分之一的天平、恒温水浴锅、高速组织捣碎机等。
样品的采集：在果园里按照不同处理取树冠外围中部有代表性的无病虫果实若干（不得少于10个），带回实验室，把取来的果实样品洗净擦干或用湿毛巾擦净果皮。分析苹果、梨、葡萄时，需带果皮。剥皮容易的桃样品则应去皮，柑橘要去掉外果皮和里面的白色网纹。西瓜、甜瓜则只取可食部分。葡萄、苹果、桃、李、杏、柑橘和西瓜的种子均弃去，苹果和梨还应去掉鳞片。
取样时，对苹果、梨、桃、西瓜、甜瓜等新鲜水果，取每个果实中部纵横各一片，用不锈钢刀切碎。柑橘取每个果实对角线的两瓣；浆果（葡萄）取每个果穗的上下左右各方面果实数粒。有时葡萄用汁液进行分析。
（4）测定方法
①糖液的提取：用400毫升烧杯，在受皿天平上称取切碎的样品150克，加150毫升去离子水，在高速组织捣碎机上搅拌3分钟。用小烧杯在工业天平上称取浆状物50克（相当于样品25克）用水洗至250毫升容量瓶中，使瓶内液体约为150毫升，用8%氢氧化钠溶液中和溶液中的有机酸，每加1～2滴，摇匀溶液，并用红石蕊试纸少许投入瓶中，当红石蕊试纸在溶液中明显变蓝为止。
将瓶放入80℃的水浴中30分钟，每隔5分钟摇动一次，同时注意调节水浴温度。从水浴中取出瓶，趁热逐滴加入中性醋酸铅，以沉淀其中的蛋白质和色素等，每加数滴，充分摇动瓶子，然后静止片刻，观察上层溶液是否清亮，如已清亮就不加醋酸铅，以防过量，反而使溶液变得混浊无法滤出清夜（据经验，25克元帅系苹果约需中性醋酸铅1.6～1.8毫升，酸多的苹果，如国光，用量稍多些；25克梨则需1.5～3.5毫升）放置数分钟，再加入醋酸铅用量3～4倍的饱和硫酸钠溶液，使多余的铅生成硫酸铅沉淀，将容量瓶放冷，加水至250毫升，摇匀，用滤纸过虑到250毫升的三角瓶中，这一糖液即可用来还原糖的测定。
②还原糖的测定：进行正式测定前，应先预测一次。在100毫升三角瓶中，用三个滴定管分别加入1%铁氰化钾溶液20毫升，2.50摩尔/升氢氧化钠溶液5毫升及糖液3毫升，将三角瓶放在有石棉铁丝网的300瓦小电炉上电热煮沸1分钟，加一滴次甲基蓝指示剂，随即变加热边用上述糖液继续滴定，滴定速度要慢，使溶液保持微沸，在接近终点时，每加一滴糖液，都要充分摇动。溶液颜色的变化：绿—红—蓝紫—紫—土黄，从紫色突变土黄即达到终点。消耗的总糖量（包括先加入的3毫升）在4～6毫升之间时，结果最精确。如果消耗糖液超过8毫升，表示糖的浓度过淡，可取10毫升铁氰化钾溶液及2.50摩尔/升氢氧化钠溶液2.5毫升与糖液重新滴定。如果煮沸1分钟，加次甲基蓝指示剂后溶液立即变蓝，说明糖液太浓，需要稀释一倍后再滴定。
正式滴定：从上述预测，即可大致得到与20毫升铁氰化钾溶液作用时糖的消耗量，正式滴定时，在20毫升铁氰化钾和5毫升氢氧化钠溶液中，先加入比上述糖用量少0.5毫升的糖液（例如，预测时消耗为5.00毫升，则先加入4.5毫升）煮沸1分钟，加指示剂1滴，边加热边逐滴滴入糖液，每加一滴都要充分摇动，直到终点为止。
③可溶性糖的测定：在还原糖的滴定中，溶液里虽然有蔗糖，但是它不能被铁氰化钾所氧化，所以只能滴定出还原糖的含量。如欲滴定蔗糖，则另取糖液加酸水解，转化成等量的葡萄糖和果糖后，再照上法滴定。
测定步骤：吸取糖的滤液50毫升，放入1容量瓶中，另取100毫升容量瓶，加50毫升水，插入温度计，以观察温度变化，将它们一并放入预先加热到70℃的水浴中，当瓶内温度升至60℃时，取出容量瓶，用滴定管准确加入3毫升盐酸（比重1.19），将容量瓶再放入水浴中（注意经常摇动），待瓶内温度升至70℃时，在68～70℃下保持准确8分钟，取出容量瓶迅速冷却，加甲基红指示剂2滴，用8%氢氧化钠溶液中和快到中性时，可改用稀氢氧化钠溶液直到溶液由红变为橙色。如果发现溶液变为黄色，并变混浊，说明加碱过多，要用稀盐酸调回至橙红色。水解好的糖液加水至100毫升，照还原糖的测定与20毫升铁氰化钾溶液进行标定。
铁氰化钾液浓度的确定：准确称取在110℃烘过2小时的分析纯葡萄糖0.2000克溶于水，稀释至100毫升。用此溶液与100毫升铁氰化钾液滴定，方法同上，记下糖液用量。
（5）结果计算
10毫升铁氰化钾溶液相当于葡萄糖的克数（G）为：
G＝M×V/100
还原糖（%）＝2G×V1×100/W×V2
可溶性糖（%）＝2G×V1×2×100/W×V3
蔗糖（%）＝［可溶性糖（%）-还原糖（%）］×95%
式中：M——葡萄糖的重量（克）：
V——滴定10毫升铁氰化钾溶液所用的标准葡萄糖溶液的体积（毫升）；
V1——糖浸出液定容体积（毫升）；
V2——还原糖测定中20毫升铁氰化钾溶液消耗的待测糖溶液的体积（毫升）；
V3——可溶性糖测定中20毫升铁氰化钾溶液消耗的水解后待测糖溶液的体积（毫升）；
W——样品的鲜重（克）；
2——在可溶性糖的测定中吸出50毫升滤液，水解后定容至100毫升即将原来糖液稀释了一倍。
答：苹果的分析结果通常为:可溶性糖为9%～14%(一般为11%～12%),还原糖7%～10%(一般为9%～10%),蔗糖为0.7%～5%(一般为2%～3%)。梨的可溶性糖为7%～14%,(一般为8%～10%),还原糖6%～9%,蔗糖为0.6%～5%。仁果类(苹果、梨)的果糖含量较高,而核果类(桃、李、杏)中葡萄糖稍高于果糖。(1)方法原理铁氰化...
答：不同的是测定之前需要进行样品处理,既是用淀粉酶酶解或酸水解使不溶性糖或淀粉水解为还原糖然后再测定.
答：1.蒽酮法测定可溶性糖 2.苯酚法测定可溶性糖 3.3 ,5 –二硝基水杨酸比色法测定还原糖 4.斐林试剂比色法测定还原糖 斐林试剂比色法测定还原糖步骤 一、原理 植物组织中的可溶性糖可分为还原糖（主要是葡萄糖和果糖）和非还原糖（主要是蔗糖）两类。还原糖具有醛基和酮基，在碱性溶液中煮沸，能把...
答：①是可溶性糖含量的变化．（2）检测还原糖的方法是用斐林试剂，斐林试剂的使用方法是将质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL CuSO4溶液等量混合后，再滴入被检测的溶液中，某同学向b、d两试管中分别加入质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液1mL摇匀，...
答：【实验原理】本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量。糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。该实验方法简便，但没有专一性，绝大...
答：可溶性还原糖的鉴定原理 生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性...
答：称取一定量的样品，捣碎，用50ML水分次溶解样品并洗入250MI容量瓶中，摇匀后慢慢加入5MI中性醋酸铅溶液，加水至刻度，摇匀，静置30MIN。用干燥滤纸过滤，弃初滤液，滤液备用。然后用直接滴定法测定还原糖的量
答：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，该试剂与细胞内可溶性糖中的还原性糖如葡萄糖或其它的还原糖发生反应，在水浴加热的条件下，形成砖红色色沉淀．（2）“质壁分离”中的“质”指的是原生质层，“壁”指的是细胞壁．（3）在“验证 DNA 和 RNA 的分布实验”中，用质量分数为0.9%的NaCl溶液的目的...
答：大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。斐林试剂是含Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后能生成单质银，发生“银镜反应”。分子结构中含有还原性基团（如游离醛基或游离酮基）的糖，叫还原糖。如葡萄糖。果糖含有游离的酮基，所以果糖也属于还原糖。以上内容参考：百度百科-...
答：本方法测定的是一大类具有还原性的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结果用葡萄糖或其他转化糖表示而已。本法是国家标准分析方法，适用于所有食品中还原糖的快速测定。检出限0.1mg。高锰酸钾滴定法：样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被...
