革兰染色法
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-30
试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定.2）草酸铵结晶紫染1分钟.3）自来水冲洗.4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.5）水洗，用吸水纸吸去水分.6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分.7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗.干燥，镜检. 具体试验 流程 1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）.涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂. 2、 涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀. 3、 晾干：让涂片在空气中自然干燥. 4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）. 5、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min. 6、 水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态. 7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗. 8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗. 9、 复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗.至此，革兰氏染色结束. 结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色. 其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素；而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖，两者的致病作用不同.。
革兰氏染色时,初染前能加碘液吗？乙醇脱色后复染前,革兰氏阳性菌
不可以.因为革兰氏碘液（媒染剂）的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落.改变顺序可能会对效果有影响，所以最好按步骤做.脱色后复染前，理论上革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色.复染的目的就是增加无色阴性菌与背景的反差，以便区别于紫色的阳性菌革兰氏阳性菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红复染后呈红色.革兰氏染色步骤：1.涂片，火焰固定2.结晶紫1min，使菌体着上紫色3.水洗4.碘液1min，碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内5.水洗6.酒精脱色30s，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应.7.水洗8.番红复染1min，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌.9.以吸水纸吸干，油镜观察。
革兰氏染色法的原理
革兰氏染色法的原理： 简单来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。
具体来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色； 而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。
扩展资料：革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法，属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。
革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。
经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。 操作流程：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： （1）载玻片固定。
在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 （2）草酸铵结晶紫染1分钟。
（3）自来水冲洗，去掉浮色。 （4） 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。
（5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。
（6）用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
参考链接：百度百科-革兰氏染色法。
革兰氏染色的详细步骤
革兰氏染色
一、 目的：在细胞发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测，判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
二、 原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
三、实验用品准备：
灭菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul灭菌移液吸头、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器
四、 操作：
1 涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2 干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
3 固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。
4 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
5 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
6 媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
7 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
8 脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。
9 复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
10 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
11 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌
要得到正确的革兰氏染色结果注意哪些操作,哪一步是关键步骤
革兰氏染色：（1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同.（2）晾干：与简单染色法相同.（3）固定，与简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟.（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗.（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min.(7)水洗：用水洗去碘液.（8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗.（9）复染：滴加蕃红复染5min.(10)水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液.（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干.（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性.（13）实验完毕后的处理：①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去.b.用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次.c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2—3次.注意擦镜头时向一个方向擦拭.②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净.1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色.如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定.2.染色过程中勿使染色液干涸.用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果.3.选用幼龄的细菌.G+菌培养12h-16h,E.coli培养24h.若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应.。
革兰氏染色的过程是怎样的?
答：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1)涂片固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)蒸馏水冲洗。 4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5)水洗,用吸水纸吸去水分。 6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。 7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,...
属于革兰氏染色法正确的步骤是()
答：【答案解析】革兰氏染色法的步骤：细菌玻片涂片经结晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脱色→复红复染。凡未被95%乙醇脱色，菌体被结晶紫和复红染成紫色者为革兰氏阳性菌，而经乙醇脱色后，被复红染成红色者为革兰氏阴性菌。
什么是革兰氏染色法?主要步骤是?关键步骤?
答：（2）初染。滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）染色1-2min，水洗。（3）媒染。用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1min，水洗。（4）脱色。用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节：脱...
革兰氏染色的步骤和原理
答：(七)复染 蕃红染色液染色10 s后， 自来水冲洗。(八)干燥，镜检 染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
什么是革兰染色法?
答：4。 染色：将固定好的涂片放于报纸上，每次滴加一滴染液进行染色。注意：乙醇脱色时滴加乙醇至流出液为无色立即进行水洗；蕃红复染由于时间较长，应在染液干燥前补加染液；镜检时吸水注意不要擦标本。革兰染色的实验现象 如果将细菌做革兰染色，凡染后菌体呈蓝紫色的，称为“革兰阳性菌”；菌体是伊...
革兰染色法
答：试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义 一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定.2)草酸铵结晶紫染1分钟.3)自来水冲洗.4)加碘液覆盖涂面染约1分钟.5)水洗,用吸水纸吸去水分.6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,自来水...
简述革兰氏染色的步骤和结果
答：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易...
观察细菌形态时为何要用染色法?常用的染色法有几类
答：革兰氏染色法是由丹麦医生 Hans Christian Gram于 1884 年创立。它是细菌学中很重要的鉴 别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G + ）和革兰氏阴性菌（G － ）两大 类。革兰氏染色过程：涂片→固定→结晶紫初染（1min）→碘液媒染（1min）→乙醇脱色（95% 酒精,30s）→...
革兰氏染色法是什么?
答：1884年丹麦科学家革兰姆创造了一种复染法，就是先用结晶紫液加碘液染色，再用酒精脱色，然后用稀复红液染色。经过这样的处理，可以把细菌分成两大类，凡能染成紫色的，叫革兰氏阳性菌；凡被染成红色的，叫革兰氏阴性菌。这两类细菌在生活习性和细胞组成上有很大差别，医生常依据细菌的革兰氏染色来...
革兰氏染色步骤是什么?
答：革兰氏染色一般包括初染、媒染、脱色、复染等方法是：1）涂片固定。2）草酸铵1分钟。3）蒸馏水冲洗。4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。5）水洗，用吸水纸吸去水分。6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定.2）草酸铵结晶紫染1分钟.3）自来水冲洗.4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.5）水洗，用吸水纸吸去水分.6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分.7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗.干燥，镜检. 具体试验 流程 1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）.涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂. 2、 涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀. 3、 晾干：让涂片在空气中自然干燥. 4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）. 5、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min. 6、 水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态. 7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗. 8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗. 9、 复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗.至此，革兰氏染色结束. 结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色. 其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素；而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖，两者的致病作用不同.。
革兰氏染色时,初染前能加碘液吗？乙醇脱色后复染前,革兰氏阳性菌
不可以.因为革兰氏碘液（媒染剂）的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落.改变顺序可能会对效果有影响，所以最好按步骤做.脱色后复染前，理论上革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色.复染的目的就是增加无色阴性菌与背景的反差，以便区别于紫色的阳性菌革兰氏阳性菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红复染后呈红色.革兰氏染色步骤：1.涂片，火焰固定2.结晶紫1min，使菌体着上紫色3.水洗4.碘液1min，碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内5.水洗6.酒精脱色30s，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应.7.水洗8.番红复染1min，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌.9.以吸水纸吸干，油镜观察。
革兰氏染色法的原理
革兰氏染色法的原理： 简单来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。
具体来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色； 而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。
扩展资料：革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法，属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。
革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。
经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。 操作流程：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： （1）载玻片固定。
在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 （2）草酸铵结晶紫染1分钟。
（3）自来水冲洗，去掉浮色。 （4） 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。
（5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。
（6）用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
参考链接：百度百科-革兰氏染色法。
革兰氏染色的详细步骤
革兰氏染色
一、 目的：在细胞发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测，判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
二、 原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
三、实验用品准备：
灭菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul灭菌移液吸头、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器
四、 操作：
1 涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2 干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
3 固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。
4 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
5 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
6 媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
7 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
8 脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。
9 复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
10 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
11 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌
要得到正确的革兰氏染色结果注意哪些操作,哪一步是关键步骤
革兰氏染色：（1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同.（2）晾干：与简单染色法相同.（3）固定，与简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟.（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗.（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min.(7)水洗：用水洗去碘液.（8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗.（9）复染：滴加蕃红复染5min.(10)水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液.（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干.（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性.（13）实验完毕后的处理：①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去.b.用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次.c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2—3次.注意擦镜头时向一个方向擦拭.②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净.1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色.如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定.2.染色过程中勿使染色液干涸.用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果.3.选用幼龄的细菌.G+菌培养12h-16h,E.coli培养24h.若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应.。
答：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1)涂片固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)蒸馏水冲洗。 4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5)水洗,用吸水纸吸去水分。 6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。 7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,...
答：【答案解析】革兰氏染色法的步骤：细菌玻片涂片经结晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脱色→复红复染。凡未被95%乙醇脱色，菌体被结晶紫和复红染成紫色者为革兰氏阳性菌，而经乙醇脱色后，被复红染成红色者为革兰氏阴性菌。
答：（2）初染。滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）染色1-2min，水洗。（3）媒染。用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1min，水洗。（4）脱色。用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节：脱...
答：(七)复染 蕃红染色液染色10 s后， 自来水冲洗。(八)干燥，镜检 染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
答：4。 染色：将固定好的涂片放于报纸上，每次滴加一滴染液进行染色。注意：乙醇脱色时滴加乙醇至流出液为无色立即进行水洗；蕃红复染由于时间较长，应在染液干燥前补加染液；镜检时吸水注意不要擦标本。革兰染色的实验现象 如果将细菌做革兰染色，凡染后菌体呈蓝紫色的，称为“革兰阳性菌”；菌体是伊...
答：试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义 一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定.2)草酸铵结晶紫染1分钟.3)自来水冲洗.4)加碘液覆盖涂面染约1分钟.5)水洗,用吸水纸吸去水分.6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,自来水...
答：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易...
答：革兰氏染色法是由丹麦医生 Hans Christian Gram于 1884 年创立。它是细菌学中很重要的鉴 别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G + ）和革兰氏阴性菌（G － ）两大 类。革兰氏染色过程：涂片→固定→结晶紫初染（1min）→碘液媒染（1min）→乙醇脱色（95% 酒精,30s）→...
答：1884年丹麦科学家革兰姆创造了一种复染法，就是先用结晶紫液加碘液染色，再用酒精脱色，然后用稀复红液染色。经过这样的处理，可以把细菌分成两大类，凡能染成紫色的，叫革兰氏阳性菌；凡被染成红色的，叫革兰氏阴性菌。这两类细菌在生活习性和细胞组成上有很大差别，医生常依据细菌的革兰氏染色来...
答：革兰氏染色一般包括初染、媒染、脱色、复染等方法是：1）涂片固定。2）草酸铵1分钟。3）蒸馏水冲洗。4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。5）水洗，用吸水纸吸去水分。6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。
