获取目的基因的方法有哪些

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-05

获取目的基因的方法主要有基因组文库法、cDNA的克隆、反转录法、人工合成法等。

从基因文库中获取这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了基因组文库法就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。

cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。

人工合成主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。

目的基因简介:

目的基因(geneofinterest),也称靶标基因,是指在实验中研究或操纵的特定基因。比如,转基因研究中转入到生物体内的外源的抗虫基因Bt或抗除草剂基因CP4-EPSPS等。

目的基因可以是生物体本身的,也可以是来自不同生物体的。比如Bt基因来自苏云金芽孢杆菌。

目的基因相关的操作包括目的基因鉴定、分离、克隆、转化及转化后鉴定和测试等。

当产生许多拷贝的目的基因后,可以通过酶切反应(或gataway系统),将目的基因酶促连接到构建载体中,然后将整个构建在细菌中表达,从报告基因选取阳性转化体,通常涉及含有插入DNA的菌落中的一些颜色变化。挑取阳性菌落,做液体培养,提取质粒DNA,进行酶切,切胶纯合。获得的DNA可用于后续的转化。



  • 获取目的基因的方法有哪些
    答:获取目的基因的方法主要有基因组文库法、cDNA的克隆、反转录法、人工合成法等。从基因文库中获取这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了基因组文库法就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆...
  • 下列不属于基因工程中获取目的基因的方法的是
    答:答案C 获取目的基因的常用方法有直接分离法和人工合成法。目前常用的方法主要有以下几种:从基因文库中获取目的基因;利用PCR技术扩增目的基因;通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成等等。直接分离法主要是利用限制酶在供体细胞中对DNA分子进行切割,然后再利用特定的方法进行筛选即可获得。
  • 基因工程中目的基因的获取方法
    答:分离出来的有时并非一个基因,但由于这种方法操作简便,所以现在仍然广泛采用.反转录法 这种方法是在核糖体合成多肽的旺盛时期,首先把含有目的基因的mRNA的多聚核糖体提取出来,分离出mRNA,然后以mRNA为模板,用反转录酶合成一个互补的DNA,即cDNA单链,再以此单链为模板合成出互补链,就成为双链DNA分子....
  • 制备目的基因的方法有哪些?
    答:能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列.从基因组含有生物生存、活动和繁殖的全部遗传信息的概念出发,基因组文库是具有生物种属特异性的.构建基因组文库,再用分子杂交等技术去钓取基因克隆的方法,称为鸟枪法或散弹射击法,意味着从含有众多的基因序列克隆群中去获取目的基因或序列.
  • 目前获取目的基因的主要途径有哪些
    答:又叫“散弹射击法"。另一种是人工合成基因。这种方法有两条途径。二是以目的基因转录的信使RNA为模板。反转录成互补的单链DNA。再在酶的作用下合成双链DNA。即目的基因。另一条途径是蛋白质的氨基酸序列。推测出信使RNA序列。再推测出结构基因的核苷酸序列,然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
  • 农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基...
    答:(1)抗病基因属于目的基因,获取目的基因的方法:从细胞中直接分离获得、化学方法人工合成等.将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法,即借助农杆菌中的Ti质粒.(2)构建基因表达载体时,需先用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子.含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA连接酶的作用下连接...
  • 目的基因概念 不同时期的都要 还有提取目的基因的方法
    答:目的基因是指准备导入受体细胞内的,以研究或应用为目的所需要的外源基因称目的基因。获得目的基因的方法很多,但也是十分困难的一步。目前获得目的基因有4条途径:1.从生物基因组群体中分离目的基因 原核生物基因组较小,基因容易定位,用限制性内切酶将基因组切成若干段后,用带有标记的核酸探针,从中...
  • 获得目的DNA片段的方法有哪些
    答:我们这里用的是人教版的教材,上面是这样说的,获得目的基因的方法有三种。一:从基因文库中获取;二:PCR扩增;三:人工合成。
  • ...A.鸟枪法B.DNA扩增技术C.人工合成基因的方法D.用限制性内
    答:A、用鸟枪法获得的目的基因含有不表达的内含子,A错误;B、DNA扩增技术是扩增目的基因的方法,而不是获取目的基因的方法,B错误;C、利用人工合成法合成的基因不含有内含子,是获取真核生物目的基因常用的方法,C正确;D、用限制性内切酶切割DNA片段所得的目的基因含有内含子,D错误.故选:C.
  • 获得原核细胞的目的基因可采用什么方法
    答:而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列(已在拼接过程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA为模板,逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。.2。从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来...