原生质体的固液结合培养法是怎样做的？

固体培养法又叫平板培养法，指将一定体积的原生质体按照一定密度与等体积的琼脂培养基混合，在培养皿内制成薄层固体平板，进而进行原生质体培养的方法。该方法使原生质体位置固定，避免其游动，便于定点观察。

诱导融合的方法大体可以分为物理的和化学的两类。前者是利用显微操作、灌流吸管、离心或振动等机械以促使原生质体融合，这种方法目前多与诱导剂结合起来使用，化学融合法是用不同的试剂作诱导剂，促使原生质体融合，形成异核体（heterokaryons）。
目前常用的较有效的是高pH—高钙法、NaNOsubscript3subscript和聚二乙醇法。
图3-1：原生质体融合方法

最简便的固液结合培养方法是在培养皿的底部先铺一薄层含凝胶剂的固体培养基，再在其上进行原生质体的液体浅层培养。

这样，固体培养基中的营养成分可以慢慢地向液体中释放，以补充氮培养物对营养的消耗，培养物所产生的一些有害物质，也会被固体部分吸收，对培养物的生长更有利。已证明这种方法对烟草和矮牵牛原生质体的再生细胞起到了促进分裂的作用。

考虑到有效地吸附培养物所产生的有害物质，在下层固体培养基中添加活性炭，结果使原生质体形成细胞团的数量提高了23倍。