动物细胞工程单克隆抗体的制备

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-06
动物细胞工程中,单克隆抗体的制备技术基于免疫反应、细胞融合和动物细胞培养等原理。首先,B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖,产生具有特异性抗体的能力。然而,B细胞的这种功能有限,通过与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,可解决这一问题。杂交瘤细胞结合了B细胞的特异性抗体产生能力和骨髓瘤细胞的无限增殖能力,通过克隆化技术,可以大量获得高效、单一的特异性抗体。

制作过程涉及免疫脾细胞的制备,选择纯系Balb/c小鼠进行免疫,方法多样,如脾内直接免疫法。接着,需要对骨髓瘤细胞进行筛选和培养,以确保其能在含8-AG的筛选培养基中生长。细胞融合的关键在于提供无菌环境和精确操作,以防止污染。融合后的阳性克隆需通过灵敏、准确的检测方法筛选,如RIA法、ELISA法或免疫荧光法,以确认其产生特异性抗体的能力。克隆化是通过有限稀释法等手段,从杂交瘤细胞中获得单一细胞系,确保稳定性和一致性。

制备后的单克隆抗体有着广泛的应用,如作为诊断工具,其特异性和灵敏度远超常规抗体。此外,它们还可用于治疗疾病,例如结合抗癌药物制成“生物导弹”,精准打击癌细胞。在生命科学研究和临床医疗中,单克隆抗体被用于沉淀反应、凝集实验、放射免疫学检测、细胞分型、免疫学检测、亲和层析等众多领域,为疾病诊断和治疗提供了强大工具。

  • 动物细胞工程单克隆抗体的制备
    答:克隆化是通过有限稀释法等手段,从杂交瘤细胞中获得单一细胞系,确保稳定性和一致性。制备后的单克隆抗体有着广泛的应用,如作为诊断工具,其特异性和灵敏度远超常规抗体。此外,它们还可用于治疗疾病,例如结合抗癌药物制成“生物导弹”,精准打击癌细胞。在生命科学研究和临床医疗中,单克隆抗体被用于沉淀...
  • 动物细胞工程:中的 两个过程,三个"一"分别是什么???
    答:1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-...
  • 如何用动物细胞工程制备疫苗
    答:要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨...
  • 单克隆抗体的制备问题
    答:一般在融合后7~14天内使用HAT培养液,然后改用HT培养液。融合后第2~3周进行换液,每次吸出培养孔旧液1/2换入新液,以后视克隆生长情况3~5天换液1次,连续2周。3~5天后未融合及自身融合的细胞逐渐死亡,1周左右可出现克隆,并不断增殖,当集落>3mm或布满孔底1/2时即可取上清作抗体活性检...
  • 什么?技术是单克隆抗体制备的基础
    答:最基础的是动物细胞培养,操作程序是先取浆细胞与骨髓瘤细胞单独,然后诱导融合,两次筛选后得到杂交瘤细胞最后在体内或者体外培养,提取单克隆抗体。新人教版选修三教材第52页中有介绍,动物细胞工程的常用技术有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体技术。其中动物细胞培养技术是动物细胞...
  • 下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体
    答:(1)由图中可看出,单克隆抗体的制备过程中,运用了动物细胞工程中动物细胞融合和动物细胞培养两大技术.(2)据图可知,向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低.与多克隆抗体相比,单...
  • 如图所示为单克隆抗体制备过程示意图.(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成...
    答:植物体细胞杂交过程中培养基是固体培养基,而且含有生长素和细胞分裂素.(4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原并与之结合,而绝不攻击任何正常细胞,故称为“生物导弹”,这是利用了抗原与抗体之间结合的高度特异性.(5)在单克隆抗体制备过程中,还应用了细胞工程中的动物细胞融合和 动物细胞培养...
  • 制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂
    答:制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。具体操作方法如下:(1)仙台病毒法融合:①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两 细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到...
  • 用动物细胞工程技术制备单克隆抗体,下列实验步骤中错误的...
    答:【答案】B 【答案解析】试题分析:淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导,氯化钙不能作为诱导剂,氯化钙的作用是在基因工程中用于增大细胞壁的通透性,便于重组质粒进入微生物的细胞内。考点:本题考查动物细胞工程的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。
  • ...关细胞工程的问题:科学家通过杂交瘤细胞培养生产单克隆抗体的...
    答:(1)制备单克隆抗体时,首先将抗原注入小鼠体内,使小鼠产生特异性免疫,之后从小鼠脾脏中获得已经免疫的B淋巴细胞.(2)因为B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖,所以直接培养经免疫过的B淋巴细胞不能生产单克隆抗体.因为骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下无限增殖的能力,所以B淋巴细胞与骨髓瘤细胞...