检测核酸纯度方法

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-06
如何判定核酸样品的纯度

您好!
① 如果是看DNA或者RNA的纯度,可以通过OD260/OD280比值来衡量,DNA OD260/OD280比值在1.8-2.0;RNA >2.0。如果比值<1.8,说明有蛋白质残留。
② 如果是多个核酸样品混合物,则通过电泳来看目的条带在混合物中比例。

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片碱纯度检测方法:
片碱与盐酸衬映发生干冰气态,可以加入足量盐酸,没有气态发生说明纯度较大;
如果没有杂质,结果是在加足量的水后无不溶物;这里用到了氢氧化钙不溶于水的特性。
加入碳酸钠溶液观察是否有沉积,如果有说明片碱纯度高。
将其溶于酸,纯度高的会放出气态二氧化碳;

扩展资料:
测量片碱纯度值的方法:
在分析天平上准确称取片碱样品1.5-2.0g于250ml烧杯中,加水(无二氧化碳)溶解后定量转入250ml容量瓶中,用水稀释至刻度、摇匀。
移取试液25.00ml(3份)于250ml锥形瓶中,各加入两滴酚酞指示剂,C(HCl)=0.1mo/l标准溶液滴定至溶液由红色变为无色为终点,记下所消耗HCl标准溶液的体积V1。
加两滴甲基橙指示剂,继续用上述盐酸标准溶液滴定至溶液由黄色变为橙色,即为终点。记下所消耗的HCl标准溶液的体积V2。
通过定量的测量,可以准确的计算出其中片碱的含量、杂质的含量以及它的纯度值。
片碱的纯度值会下降原因是制作完成后参有少量的杂质,我们在今后的购买时要想知道它的纯度我们可以采取方法进行测量,测量时保持严谨避免出现数据上的差错。
参考资料来源:百度百科-片碱

紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法。

原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链

寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值

(OD260/OD280),估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除

尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度

大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。

试剂与仪器: 提取的质粒DNA,紫外分光光度仪。

操作步骤:
1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。
2) 取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中。
3) 在260nm和280nm分别读出样品光密度值。如果样品浓度单位为μg/μl,则样品DNA浓度为OD 值的10倍,即如

OD<SUB>260</SUB>=0.1,则样品浓度即为1μg/μl。
4) 若OD<SUB>260</SUB>/OD<SUB>280</SUB>大于1.8,说明仍有RNA,可以考虑用RNA酶处理样品,若小于1.8,说

明样品中含有蛋白质或酚,应再用酚/氯仿抽提,以乙醇沉淀纯化DNA。

  • 核酸的纯度是什么意思呀
    答:检测核酸纯度的方法有很多种,其中比较常用的有光谱法和凝胶电泳法。光谱法是通过分析核酸溶液的光谱,确定其中的核酸含量和纯度,其优点是无需破坏样本,对小样本或微量核酸溶液检测效果较好;凝胶电泳法是通过将样品在凝胶中进行分离和检测,确定其中核酸的含量和分子量,其优点是适用于大样本体积和高浓度...
  • 检测核酸纯度方法
    答:大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。试剂与仪器: 提取的质粒DNA,紫外分光光度仪。操作步骤:1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。2) 取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中。3) 在260nm和280nm分别读出样品光密...
  • 如何判断核酸样品的纯度以及是否为天然双链分子
    答:单双链的确定测定吸光度就可以了,逐渐加热核酸样品到90度,在这一过程中测A260或A280,如果发现吸光度上升了,说明是双链,因为双链解旋会造成吸光度上升
  • 如何判定核酸样品的纯度
    答:您好!① 如果是看DNA或者RNA的纯度,可以通过OD260/OD280比值来衡量,DNA OD260/OD280比值在1.8-2.0;RNA >2.0。如果比值<1.8,说明有蛋白质残留。② 如果是多个核酸样品混合物,则通过电泳来看目的条带在混合物中比例。百度教育团队【海纳百川团】为您解答。 感谢您的采纳 O(∩_∩)O 。如有疑问,欢迎追问。本回...
  • 如何判断提取质粒DNA的纯度
    答:可以通过紫外吸收检测。因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD值的比值,估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1....
  • 通常用来鉴定核酸样品纯度的指标是( )。
    答:A项,实验中常利用260nm与280nm的吸光度比值(A260/A280)还可以判断从生物样品中提取的核酸样品的纯度。DNA纯品的A260/A280的比值应为1.8;而RNA纯品的A260/A280的比值应为2.0。BD两项,DNA的Tm值与DNA长短以及碱基的GC含量相关。GC的含量越高,Tm值越高;离子强度越高,Tm值也越高。Tm值...
  • 核酸纯度的指示剂是什么?
    答:纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下OD260 / OD280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。OD230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物、盐(胍盐)等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 ...
  • 测dna和rna用什么方法比较好?
    答:A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物、盐(胍盐)等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。当 0.5%BSA蛋白质污染...
  • 核酸的纯度是什么意思啊
    答:提高核酸的纯度是实验工作者不可避免的任务。有很多种方法可以提高核酸的纯度,比如利用各种纯化技术,如酚酞萃取法、柱层析法、离心扫描电镜等。这些方法可以有效地去除样品中的杂质和产物,从而提高样品的纯度和稳定性。实验工作者需要斟酌不同纯化方法的优缺点,并根据实验要求选取合适的方法,以提高实验...
  • 检测核酸纯度方法
    答:所以,当我们检测260/280后,如果比值在1.8-2.0之间时,我们可以说其纯度可以,那OD260的值就有效。否则,OD260的值判为无效。你说的嘌噙与嘧啶的吸光值,确实没错。但一般情况下,我们测的都是基因组、tRNA,mRNA、cDNA,所以其CG含量都比较均匀。都适用于这种方法。然而,在测某些CG含量明显不...