制备石蜡切片的步骤是什么?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-03

(1)二甲苯(Ⅰ) 15min
(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min
(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min
(4)100%乙醇(Ⅰ) 5min
(5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min
(6)80%乙醇 5min
(7)蒸馏水 5 min
(8)苏木精液染色 5 min
(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s
(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s
(11) 稍水洗 10-30 s
(12)蒸馏水过洗 1-2 s
(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(16) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s
(17) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s
(18) 无水乙醇 5-10 min
(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(20) 二甲苯(Ⅰ) 2 min
(21) 二甲苯(Ⅱ) 2 min
(22) 二甲苯(Ⅲ) 2 min
(23) 中性树胶封固
注:①第(11)、(12)步可省去,(13)步冲水时间需延长至20-30min。
②第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。 (1)冰冻切片固定 10~30 s
(2)稍水洗 1~2 s
(3)苏木精液染色(60℃) 30~60 s
(4)流水洗去苏木精液 5~10 s
(5)1%盐酸乙醇 1~3 s
(6)稍水洗 1~2 s
(7)促蓝液返蓝 5~10 s
(8)流水冲洗 15~30 s
(9)0.5%曙红液染色 30~60 s
(10)蒸馏水稍洗 1~2 s
(11)80%乙醇 1~2 s
(12)95%乙醇 1~2 s
(13)无水乙醇 1~2 s
(14)石炭酸二甲苯 2~3 s
(15)二甲苯(Ⅰ) 2~3 s
(16)二甲苯(Ⅱ) 2~3 s
(17)中性树胶封固。
注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 (1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;
(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。



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