细胞怎么做成石蜡切片
如何制作共聚焦显微镜的细胞切片
石蜡切片法 ：
石蜡切片法是以石蜡作包埋剂,用旋转切片机将材料切成薄片,经一系列处理制成永久制片的方法.在研究植物的细胞,组织,胚胎以及形态等方面石蜡切片法是最理想的制片方法.
石蜡切片法的一般流程为:取材→固定→抽气→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→切片→粘片→染色→封片.
取材
用锋利的刀片切取新鲜的植物材料,选定适宜的材料,立即固定.
取材的注意事项如下:
(1)取材料要新鲜.动作要迅速,以免挤压损坏组织;取病理材料时,应设置对照材料.
(2)所取材料大小要适当:根和茎一般直径≤5mm,切取成5-10mm小段;叶片一般取过中脉处,切成2-5mm宽,5-8mm长.在切材料时,必须注意刀片与中轴成直角,两切面平行,否则制成的切片细胞是斜的. 雌,雄蕊一般不需分割.
(3)取材时间可根据切片要求有所区别.如:在进行植物发育的研究过程时,需要找到细胞分裂相,一般在晴天的早晨9:00-10:00时取材,此时植物细胞分裂活动较明显.
(4)取材不易过老,否则制片有难度(过老的材料须在滑走切片机上进行);对纵切的材料适当多取材,如根尖,茎尖等,因为切到材料正中的概率较低.
(二)固定
将已切好的材料尽快地浸入相当于材料10-15倍体积的固定液中.借助固定液的作用,使细胞的新陈代谢瞬时停止,并保持细胞或组织的形态构造及其内含物的状态不发生变化.从而达到使组织变硬从而便于切片,增强内含物的折光度,令细胞易于着色的目的,同时具有防腐作用.以新鲜配制固定液效果较好.固定的时间依材料的种类,性质,大小等而定.材料固定完毕,保存于加盖的容器内,贴上标签.
良好的固定剂,应是穿透力强,使细胞立刻致死,原生质全部凝固;不发生任何变形,增强折光率,并且不妨碍染色.
常用固定液:
简单固定液 以一种化学药品配制的固定液.
用于光镜观察的石蜡切片厚度一般是5～10μm。
活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构。
因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。
扩展资料
优点：
1、组织细胞形态清晰
2、切片可长期保存，供教学、科研及病理诊断及复察，并可利用蜡块作其他项目的回顾性研究。
3、可以切（2～3微米）的薄片，片子薄而均匀，无皱褶。
缺点：
1、石蜡制片程序及环节繁多，需数日才能完成1个周期。
2、制片过程中很易造成组织内抗原性的丧失，在用于免疫组化染色时影响结果的敏感性。
1．冰冻切片
是免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法.其最突出的优点是能够较完好地保存多种抗原的免疫活性,尤其是细胞表面抗原更应采用冰冻切片.新鲜的组织及已固定的组织均可作冰冻切片.
冰冻时,组织中水份易形成冰晶,往往影响抗原定位.一般认为冰晶少而大时,影响较小,冰晶小而多时,对组织结构损害较大,在含水量较多的组织中上述现象更易发生.冰晶的大小与其生长速率成正比,而与成核率（形成速率）成反比,即冰晶形成的数量愈多则愈小,对组织结构影响愈严重.因此,应尽量降低冰晶的数量.fish认为冰冻开始时,冰晶成核率较慢,以后逐渐增加,其临界温度为-33.c,从-30.c降至-43.c之间,成核率急剧增加达1018,然后再减慢.基于上述理论可采取以下措施减少冰晶的形成
2．石蜡切片
其优点是组织结构保存良好,在病理和回顾性研究中有较大的实用价值,能切连续薄片,组织结构清晰,抗原定位准确.用于免疫组化技术的石蜡切片制备与常规制片略有不同：①脱水、透明等过程应在4℃.c下进行,以尽量减少组织抗原的损失.②组织块大小应限于2cm×1.5cm×0.2cm,使组织充分脱水、透明、浸蜡.③浸蜡、包埋过程中,石蜡应保持在60℃以下,以溶点低的软蜡最好（即低温石蜡包埋）.
制作石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱
水、透明、封片等步骤，你具体哪一步不会啊？？
答：揭秘石蜡切片的精密艺术：详细操作指南 在微观世界的探索中，石蜡切片扮演着关键角色，尤其在光学显微镜的应用中。虽然看似复杂，但只要遵循每一步的精细化操作，你就能揭示出组织的神秘面纱。首先，让我们深入理解这个过程的各个环节。采集与切割的艺术: 选择具有代表性的样本，务必保持其完整性，无损伤切割...
答：苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色...
答：石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。石蜡切片制作基本技术 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，但标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。
答：Triton X-100作为细胞通透剂和去污剂，同时具有抗氧化作用，为后续步骤打下了良好的基础。在脱水过程中，需谨慎去除组织中的水分，确保二甲苯处理后的组织达到透明状态，同时观察组织的透明度。包埋环节是石蜡切片的关键步骤，选择50-60℃的石蜡，温度、硬度和切片厚度都需根据具体条件进行调整。冰冻切片虽然...
答：二甲苯透明后，迅速擦去材料周围多余液体，滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，以免出现气泡，封片后即制成永久性玻片标本，在光镜下可长期反复观察。注意有些染料需特定厂家生产的产品。根据各种染色方法、组织类别及切片厚度，掌握适宜的染色时间，才能达到较好的染色效果。石蜡制片程序...
答：TCT剩余的细胞做石蜡，还没有试过。但是经常高速离心胸水，腹水等体液的时候，因为脓性组织很多，要收集那种接近组织样的组织，是比较容易的。而且，也经常收集这些标本，用病理切片的方法来诊断，效果确实比普通的涂片方法来诊断要好很多。但是TCT的剩余细胞，用石蜡切片的方法来做，好像有点不大适合实际...
答：1迅速阻止组织、细胞的死后变化，防止自溶与腐败，使之尽量保持生前的状态与结构。2使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其原有状态。3使组织内各种物质成分产生不同的折光率，以便染色后易于鉴别和观察。4使组织块硬化，从而在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏。5使...
答：(1)二甲苯（Ⅰ） 15min(2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min（3）二甲苯：无水乙醇=1:1 2min(4)100%乙醇（Ⅰ） 5min(5)100%乙醇（Ⅱ） 5 min(6)80%乙醇 5min(7)蒸馏水 5 min(8)苏木精液染色 5 min(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s(11) 稍水洗 10-30 s(12)...
答：[1]请教丁老师如何制作皮肤的石蜡切片 一 皮肤组织标本制作及常用染色方法概述 皮肤组织标本常规以福尔马林固定，石蜡包埋，苏木素－伊红(Hematoxylin eosin HE)染色。皮肤组织的制片及染色技术与普通病理相同：标本固定－水洗－硬化、脱水－透明－包埋－切片－染色。但皮肤组织亦有其自身特点，如表皮细胞层次...
答：小心谨慎可以使得烟草完整。在共聚焦显微镜中石蜡切片法是最理想的制片方法， 石蜡切片法是以石蜡作包埋剂，用旋转切片机将材料切成薄片，经一系列处理制成永久制片的方法.在研究植物的细胞，组织，胚胎以及形态等方面。石蜡切片法的一般流程为：取材→固定→抽气→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→...
