配制培养基的原则

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-07
配置培养基的原则有哪些

配置培养基的原则有:
1、选择适宜的营养物质:
所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
2、营养物质浓度及配比合适:
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。
3、控制pH条件:
培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。
4、控制氧化还原电位:
不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。
5、原料来源的选择:
在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。
6、灭菌处理:
要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。


扩展资料:
液体培养基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。
固体培养基:一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。
半固体培养基:指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。
脱水培养基:又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。
特殊培养基:
1、选择性培养基:选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。
2、酵母菌富集培养基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1%,七水合硫酸铁0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉红0.003%,pH4.5。
3、Ashby无氮培养基:富集好氧自生固氮菌,甘露醇1%,磷酸二氢钾0.02%,七水合硫酸镁0.02%,氯化钠0.02%,二水合硫酸钙0.01%,碳酸钙0.5%。
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:
1、确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分是否被污染,均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。
2、其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。
3、另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。
参考资料来源:百度百科——培养基

还是很多的。
培养基配制应遵循的原则
1、 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、 注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压 。
3、 将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、 经济节约的原则。在所选培养基成分能满足微生物培养要求的前提下,尽可能选用价格低廉,资源丰富的材料作培养基成分。
5、控制氧化还原电位。对厌氧的微生物尤其重要。
6、培养基应无菌。故在培养基配制后应彻底杀死培养基中的杂菌 。

1. 选择适宜的营养物质 总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。例如,培养化能自养型的氧化硫硫杆菌 的培养基组成见。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的co2为氧化硫硫杆菌提供碳源。 培养其他化能自养型微生物与上述培养基成分基本类似,只是能源物质有所改变。对光能自养型微生物而言,除需要各类营养物质外,还需光照提供能源。培养异养型微生物需要在培养基中添加有机物,而且不同类型异养型微生物的营养要求差别很大,因此其培养基组成也相差很远。例如,培养大肠杆菌的培养基组成比较简单,而有些异养型微生物的培养基的成份非常复杂,如肠膜明串珠菌需要生长因子,若配制培养它的合成培养基时,需要在培养基中添加的生长因子多达33种,因此通常采用天然有机物来为它提供生长所需的生长因子。 就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏1号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,它是将麦芽粉与4倍水混匀,在58~65℃条件下保温3~4小时至完全糖化,调整糖液浓度为10о巴林, 煮沸后用纱布过滤,调ph为6.0配制而成。麦芽粉组成复杂,能为酵母菌提供足够的营养物质;培养霉菌则一般用查氏合成培养基。培养基的ph必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适ph条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在ph7~7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在ph4.5~6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基ph发生变化,若不对培养基ph条件进行控制,往往导致微生物生长速度或(和)代谢产物产量降低。因此,为了维持培养基ph的相对恒定,通常在培养基中加入ph缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如k2hpo4和kh2po4)组成的混合物。k2hpo4溶液呈碱性, kh2po4溶液呈酸性,两种物质的等克分子混合溶液的ph值为6.8。当培养基中酸性物质积累导致h 浓度增加时, h 与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基ph不会过度降低;如果培养基中oh-浓度增加, oh-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基ph也不会过度升高。 但k2hpo4/kh2po4缓冲系统只能在一定的ph范围(ph6.4~7.2)内起调节作用。有些微生物,如乳酸菌能大量产酸,上述缓冲系统就难以起到缓冲作用,此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐(如caco3)来进行调节, caco3难溶于水,不会使培养基ph过度升高,但它可以不断中和微生物产生的酸,同时释放出co2,将培养基ph控制在一定范围内。  在培养基中还存在一些天然的缓冲系统,如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质,也可起到缓冲剂的作用。</P<>

  • 配制培养基的原则
    答:在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的co2为氧化硫硫杆菌提供碳源。 培养其他化能自养型微生物与上述培养基成分基本类似,只是能源物质有所改变。对光能自养型微生物而言,除需要各类营养物质外,还需光照提供能源。培养异养型微生物需要在培养基中添加有机物,而且不同...
  • 培养基的制备原则和要求是什么?
    答:鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时,应掌握如下原则和要求:(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净,称取的份量务必准确。(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2~7.6,呈弱碱性。
  • 简述配制培养基应遵循的几个原则?
    答:测定氧化还原电势除用电位计外,还可在培养基中加入化学指示剂刃天青(resazurin)进行间接测定。刃天青在无氧条件下呈无色(Eh=-40 mV);在有氧条件下,其颜色与溶液的pH相关;(中性——紫色;碱性——蓝色;酸性——红色);在微量氧时,它呈粉红色。4.经济节约 配制培养基时应尽量利用廉价且...
  • 在配置培养基的操作过程中应注意哪些问题,为什么
    答:培养基的配置要注意如下几点原则:1)营养成分的配比碳源和氮源的比例要适当。2)适宜的酸碱度配制培养基时PH值的调节。3)渗透压营养物质要有适合的浓度。4)培养基不能反复高温灭菌。5)称不溶性固形物时应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装。操作细节上则要注意:1)称药品...
  • 什么是培养基?制备培养基的基本原则是什么
    答:它是培养环境中最重要的成分,因为它提供细胞生长所需的营养物质、生长因子和激素,并调节培养物的 pH 值和渗透压。制备培养基的基本原则包括:选择适宜的营养物质:培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净,称取的份量务必准确。营养物质浓度及配比合适:培养基中营养物质浓度...
  • 培养基配方不对
    答:A、培养基配制的原则一是目的要明确,弄清培养基的所属类型,二是营养要协调,符合目的微生物的生长需求,三是pH要适宜,A正确;B、有的微生物对营养物质具有特殊的要求,配制培养基时还要考虑微生物对特殊营养物质的要求,否则微生物可能不能生长或生长极差,B正确;C、微生物培养和MS培养基通常用高压...
  • 简述培养基种类及其配制原则。
    答:【答案】:1. 培养基种类:- 天然培养基 - 合成培养基 - 半合成培养基 - 液体培养基 - 固体培养基 - 半固体培养基 - 基本培养基 - 加添加剂丰富培养基 - 鉴别培养基 2. 培养配制原则:- 选择适宜的营养物质 - 营养物质浓度及比例要恰当 - 物理化学条件要适宜 ...
  • 培养基配制的基本原则是什么?
    答:第一,要满足六大营养即水,碳源,氮源,无机盐,营养因子,能源.第二,对于特殊的菌要查文献补充必需因子.
  • 培养微生物时应考虑哪些原则
    答:3.控制pH条件:培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。4.控制氧化还原电位:不同类型微生物生长对氧化还原电位的要求不一样,需要选择适合的。5.原料来源的选择:在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量...
  • 设计培养基
    答:为了使食用菌能正常生长发育,培养基除了必须有足够的碳、氮营养外,还应注意碳与氮的比例(碳氮比,C/N)。这样既能保证营养生长阶段对营养的需要,也能保证生殖生长的顺利进行。例如,巴西蘑菇培养料适宜的碳氮比(C/N)为28~30∶1,含氮量1.4%~1.6%,投料量30~35千克/米2。我们可以按照...