进行细菌分类和鉴别的生化检测有哪些

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-30
细菌鉴定除了生理生化反应之外,还有哪些鉴定反应?

如果严格鉴定细菌菌株的分类地位的话,需要采用多相分类法,从多个角度,运用多种不同原理的方法技术对菌株进行分析,综合判定。
常规步骤有三:
1、形态鉴定:个体形态、群体形态、革兰氏染色、基本结构、特殊结构等等,一般只能进行一些初步的分类判定。形态鉴定 是真菌鉴定中的重要依据,在细菌鉴定里面重要性相对较低。
2、分子鉴定:提取纯菌的DNA样品,对16SrDNA进行扩增,测序,将测序结果在NCBI网站上进行BLAST,可初步确定至“属”一级分类单元。
3、理化分析:进行碳氮源利用、产酶特性、代谢产物等鉴定特征的检测,检测项目需要根据前两项分析的结果,结合《伯杰氏系统细菌学手册》进行。一般需要检测至少20项以上的理化指标,多者可达100项以上。一般可鉴定至“种”一级分类单元。
如果以上三步仍然不能确定该菌株的分类地位,则需要进行更深入的分析,例如DNA杂交、化学成分分析等,必要的时候可以进行全序列测定。
建议参考《伯杰氏系统细菌学手册》或者东秀珠老师编著的《常见细菌系统鉴定手册》。另外一般的教学或者验证性试验,可查询普通微生物学实验手册即可。

1、API板条
API板条是法国梅里埃公司生产的一种快速微量的生化反应系统.
2、纸片法
纸片法已经列入了我们国家的国家标准,它是美国3M公司生产的产品。采用3M纸片可以鉴定菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数、沙门菌的鉴定以及金黄色葡萄球菌。由于纸片的价格比较昂贵,因而限制了在基层单位的应用。
3、选择、鉴定用培养基法
它的原理是在培养基中加入特异性的生化反应底物、抗体、荧光反应底物、酶反应底物等,可使目标培养物的选择、分离、鉴定一次性完成。主要包括以下几个公司生产的显色培养基
(1)首先就是法国科玛嘉公司生产的科玛嘉显色培养基
沙门菌培养基:用于鉴别包括伤寒杆菌在内的沙门氏菌
李斯特菌培养基:用于分离和鉴定产单核李斯特菌
金黄色葡萄球菌培养基:用于金黄色葡萄球菌的鉴定和计数
O157:H7培养基:用于分离和鉴定大肠杆菌O-157
大肠杆菌培养基:用于大肠杆菌鉴定和计数
ECC培养基:用于大肠杆菌和大肠菌群的鉴定和计数
弧菌培养基:用于霍乱弧菌、副溶血弧菌的分离和鉴别
(2)法国生物梅里埃公司生产的BP+RPF,兔血浆+纤维蛋白原培养基,可以在24小时内鉴定金黄色葡萄球菌,这也是一种比较常用的显色培养基。
(3)德国的Merk公司生产的chromocultColiformAgar培养基。大肠杆菌为墨绿色或者是大红色的菌落,沙门菌为淡绿色至蓝绿色菌落。柠檬酸杆菌和克雷伯菌为橙红色至红色菌落,其他肠道菌为无色菌落。

rDNA(核糖体DNA)序列分析 细菌、放线菌、酵母、霉菌
大型丝状真菌
功能基因分析 乳杆菌、双歧杆菌、肠球菌
(pheS,gyrB,gyrA,atpD等) 芽孢杆菌
生理生化分析 细菌、放线菌、酵母
BioLog分析 细菌、酵母
API 细菌、酿酒酵母
形态学分析 霉菌
1、2分别与3、4、5组合 细菌、放线菌、酵母、霉菌
大型丝状真菌
G+C mol%含量测定 细菌、放线菌、酵母
脂肪酸组分分析 细菌、放线菌、酵母
DNA-DNA杂交 细菌、放线菌、酵母
极性脂 细菌、放线菌
呼吸醌 细菌、放线菌
电子显微镜 细菌、放线菌、酵母、霉菌
以上是青岛科标生物实验室针对细菌鉴定的部分鉴定方法,可以参考一下。

  • 食品卫生微生物学检验中常用的生物化学试验有哪些
    答:食品卫生微生物学检验中常用的生物化学试验有哪些 微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下:一、糖酵解试验 不同微生物分解利用糖类的能力有...
  • 如何鉴别细菌的种类
    答:并观察其形状、大小、有无芽孢及其位置等;②菌种形态观察,主要观察其形态、大小、边缘情况、隆起度、透明度、色泽、气味等特征;③做动力试验,看他能否运动及其鞭毛着生类型(端生、周生);④做生理生化反应及做血清学反应实验.最后根据以上实验项目的结果,通过查阅微生物分类检索表,给未知菌进行命名....
  • 细菌分类鉴定需要测哪些保守序列
    答:2、血清鉴定:一般用于含有较多血清型的细菌,常用玻片凝集试验,也可以用免疫荧光法、协同凝集实验、间接血凝试验等方法灵敏的检测样本中致病菌的特异性抗原。用已知的抗体检测未知待检测的细菌,或者采用已知抗原检测患者血清中的抗细菌抗体的效价,特异性比较高,一般在生化鉴定基础之上给出确定诊断结果。3...
  • 快速检测生化反应的成套细菌鉴定系统有哪些
    答:1、API板条 API板条是法国梅里埃公司生产的一种快速微量的生化反应系统.2、纸片法 纸片法已经列入了我们国家的国家标准,它是美国3M公司生产的产品。采用3M纸片可以鉴定菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数、沙门菌的鉴定以及金黄色葡萄球菌。由于纸片的价格比较昂贵,因而限制了在基层单位的应用。3、选择...
  • 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
    答:细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代,其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。2、生物电化学方法 生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷,从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中,培养基的电...
  • 沙门氏菌检验中的生化试验和血清学分型鉴定
    答:血液和骨髓液需要增菌,然后再划种于肠道选择培养基;粪便和经离心的尿沉淀物等直接接种于SS选择培养基或其他肠道鉴别培养基。37°C孵育24小时后,挑取无色半透明的乳糖不发酵菌落接种于双糖或三糖铁培养基。若疑为沙门菌,再继续做生化反应,并用沙门菌多价抗血清做玻片凝集试验予以确定。近有学者采用...
  • 请问一下菌种鉴定的方法和实验步骤
    答:* 2)GC%测定主要用于对表型特征难区分的细菌作出鉴定,并可检验表型特征分类的合理性,从分子水平上判断物种的亲缘关系。* 3)使用原则:* G+C含量的比较主要用于分类鉴定中的否定每一种生物都有一定的碱基组成,亲缘关系近的生物,它们应该具有相似的G+C含量,若不同生物之间G+C含量差别大表明它们关系远。但具有相似...
  • 在做细菌的分类鉴定生化实验时,有甘露醇和山梨醇实验,请问是什么原理呢...
    答:H7的常用检测方法是粪便培养后作细菌分离,然后用生物化学和免疫学方法鉴定,山梨醇麦康凯琼脂 G染色 生化反应 血清学 毒力基因 大肠杆菌O157: H7实验
  • 细菌鉴定办法有哪些,常见细菌的鉴定办法就可以
    答:细菌的鉴定通过分离培养获得的病原菌,必须达到不含有其他微生物的纯培养程度,才能进行系统鉴定。系统鉴定就是通过病原菌的形态结构、生长特性、抗原性和病原性等检测,并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型。微生物鉴定的程序通常是根据其形态,生长、生化特性等定种,最后根据抗原的免疫血清学...
  • 微生物的实验室
    答:PROBE基因探针检测系统,对于分离到的单个菌落,30 min完成微生物的确证试验,基因探针的缺点是不能鉴定目标菌以外的其他菌。 免疫学技术免疫学技术通过抗原和抗体的特异性结合反应,再辅以免疫放大技术来鉴别细菌。免疫方法的优点是样品在进行选择性增菌后,不需分离,即可采用免疫技术进行筛选。由于免疫法有...