加入你从某动物组织提取了一份总RNA，可采用一些什么方法检测它的质量（完整性）、纯度、和浓度，说明依据
如何对提取后的总RNA进行质量测定
完整的总RNA在进行变性凝胶电泳时会产生清晰的28S和18S rRNA条带（真核样品）。28S rRNA条带的强度应当大致为18S rRNA条带的两倍。这种2:1的比率（28S：18S）是判断RNA完整性的一个很好的指标。
使用变性凝胶电泳来评估RNA完整性的一个缺陷是观察所需的RNA样品量。通常情况下，需要在变性凝胶中上样至少200 ng的RNA才能在EtBr染色下进行观察。而在某些RNA制备实验中，如从穿刺活检样品或激光捕获显微切割样品中提取RNA，得率是非常低的。这种情况下，或许就不可能在进行表达谱分析实验前取出200ng的RNA来评估其完整性。其它的核酸染料，比如Moleculor Probes (Eugene, OR) 的SYBR® Gold及SYBR Green II RNA染料，相比传统的琼脂糖凝胶电泳EtBr染色方法可以显著提高灵敏度。通过使用300nm的透射光源（6 x 15瓦的灯泡）及特殊的滤光片，SYBR Gold RNA凝胶染色可以检测到低至1ng的RNA，而SYBR Green II则可以检测到2ng，从而可以使用更少的样品来进行RNA完整性分析。
目前有一种快速简单的方法可以替代传统的凝胶分析方法，这种方法可以同时对RNA样品进行定量及质量评估。Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies)是第一款商业化的提供RNA样品状态细节信息的微流体仪器。当与RNA 6000 LabChip®（Caliper Technologies Corporation所拥有的一个注册商标）结合使用时，每次进行分析最低仅需1µl浓度为10 ng/µl 的样品。除了评估RNA完整性，这台自动化系统同样可以提供样品RNA浓度及纯度（如mRNA制备中的rRNA污染）的评估。在过去，检测浓度及纯度需要使用部分RNA样品（通过A260分光光度法），而评估完整性则需要另外使用部分样品。通过使用LabChip®系统，可以仅使用一份5ng的样品来同时对浓度、完整性及纯度进行分析。分析数据可以显示为类凝胶图像、电泳峰图及表格形式等。
1、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb
2、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
3、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
4、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）
5、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
6、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
7、碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。
扩展资料：
DNA提取原则：
1、保证核酸一级结构的完整性；
2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；
3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；
4、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。
参考资料来源：百度百科——DNA提取
Nanodrop,初步测浓度，260比280，260比230
Qubit可以精确定量
还有一种安捷伦2100的机器，可以测得更精准的指标，会有一个图以及一个模拟电泳出来，能得到RIN值什么的，目前最尖端的方法就是这四种了
1。测260,280,230下OD值
2。跑琼脂糖凝胶电泳
常用的就这两种方法。具体你自己百度一下，很简单
答：Qubit可以精确定量 还有一种安捷伦2100的机器，可以测得更精准的指标，会有一个图以及一个模拟电泳出来，能得到RIN值什么的，目前最尖端的方法就是这四种了
答：b. 动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。c. 贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。d. 细胞悬液：离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。e. 血液处理：取0.2...
答：6. 把样品袋(纱布袋等)放入液氮中冷冻一下,而后将液氮冷却的组织放入样品袋(每个样品袋只保存同样的组织,样品较多时应分装至多个小袋,不要在一只样品袋中放过多的样品以防无法放入液氮罐或无法从液氮罐中取出),袋口留一根编号绳,绳上粘2 张标签纸(标签上注明:客户名、样品名称、编号、日期,粘2 张标签纸是为...
答：1、抗虫棉 抗虫棉之所以抗虫，是因为外源Bt基因整合到棉株体中后，可以在棉株体合成一种叫δ-内毒素的伴孢晶体，该晶体是一种蛋白质晶体，被鳞翅目等敏感昆虫的幼虫吞食后，在其肠道碱性条件和酶的作用下，或单纯在碱性条件下，伴孢晶体能水解成毒性肽，并很快发生毒性。2、环境保护上 “DNA探针”...
答：没错,海豚是海洋中最受欢迎的哺乳动物,如果是从又黑又冷的海底逃出来的鲨鱼,根本不能和它相提并论 灰原的话真是…… 故事本身没什么意思 258~259 来自芝加哥的男子 勉强算是主线之一吧,那个詹姆斯好似什么重要人物 赤井秀一的第二次登场 还有哀的不寻常的感觉 最后追捕犯人那招蛮有创意的 269~270 犯罪的...
答：22、“我不想,再一次和你分开。”23、“我要说几多次也可以.活下去,活下去,活下去.继续研究炼金术总有一天恢复原来的身体死...一个人死去之类的绝对不容许!”24、“勇往直前吧,不要干不见得人的事,既然你用过我的名字。”25、“这点疼,比起他。。。”26、“没有伴随伤痛的教训根本没甚么意义, 因为...
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答：CAS号(CAS Registry Number或称CAS Number, CAS Rn, CAS #),又称CAS登录号,是某种物质(化合物、高分子材料、生物序列(Biological sequences)、混合物或合金)的唯一的数字识别号码。 美国化学会的下设组织化学文摘服务社(Chemical Abstracts Service, CAS)负责为每一种出现在文献中的物质分配一个CAS号,其目的是...
答：莱西是一只十分聪明的牡羊犬,除了善解人意之外,总是能在危难时候帮助主人,它大概是全世界爱狗人士最想饲养的宠物吧。 《神犬也疯狂》(Air Bud) 巴蒂是一只逃离残暴主人的黄金猎犬,后来遇上新主人贾许,两人一起加入学校篮球队,巴蒂神乎其技的三分射篮,更是成为众人的话题。在现实生活中,巴蒂则是主人在树丛中捡到...
