细胞培养传代时细胞抱团怎么办
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-07-17
我培养的贴壁细胞容易抱团，有什么好办法把它分散吗
这里，胰酶消化的程度是一个关键：消化过度则对细胞的活性损伤较大，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。影响消化速度的因素较多，主要有胰酶溶液的活性(配制条件、冻存或4℃保存时间长短、是否反复冻融、化冻后存放时间及温度等)、消化时的温度(气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度)以及所加胰酶溶液的多少等。以笔者的经验，以轻吹或加培养液后轻摇可下较好，但对于经验不太充分的实验者而言是较难判断掌握的。
按照课本上的知识，用胰蛋白酶处理可以让细胞分开。
细胞培养传代时细胞抱团怎么办
答：对于贴壁不太紧的细胞如293，可以直接吹散后分瓶。而对于贴壁较紧的细胞如CHO，则需要以胰酶消化后再吹散分瓶，一般过程为(以下操作均按无菌操作的要求进行)：将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液弃去;加入0.25%胰酶溶液，视细胞瓶的大小加入体积为0.5ml或更多，以使充分浸润;一般消化时间约为1...
聚团细胞!我该拿你怎么办?!
答：面对已经聚团的细胞，我们并非无计可施。通过低密度传代，聚团细胞有望分散。对于珍贵细胞，可以尝试复苏新细胞并处理聚团。对于死细胞聚团，DNase可以分解DNA。对于难以计数的聚团，瑞沃德C100自动细胞计数仪的出现，提供了精准且高效的解决方案，15秒快速计数，聚团细胞分析算法让处理变得简单。探索更多 ...
细胞传代后不贴壁了,成团浮在培养基里,怎么办
答：看下培养液颜色，是不是要更换培养液了，做下活性检测，看是不是有污染，细胞是不是死了。细胞和人一样，环境不舒服的时候就会表现出来的，养细胞是个细心活，慢慢来
全悬浮培养时,细胞结团严重,传代时要用胰酶消化吗
答：需要将成团细胞吹散，你看看你细胞能不能吹散，用一次性的滴管吹对细胞损伤小店
细胞传代在培养瓶分布不均匀有什么好方法解决
答：加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你最终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
4T1细胞离心后细胞成团怎么办
答：4T1细胞离心后细胞成团怎么办 贴壁细胞细胞在培养瓶长成致密单层后,继续生长的空间不足,培养基中的营养成份也消耗较多,同时代谢废物也有较多堆积,需要分瓶培养,对细胞进行传代扩增.对于贴壁不太紧的细胞如293,可以直接吹散后分瓶.而对于贴壁较紧的细胞如CHO,则需要以胰酶消化后再吹散分瓶,一般过程为(...
肝癌细胞HepG2传代时,怎样才能使细胞消化成单个细胞?
答：你是不是长得太多没分瓶啊？消化时细胞成团是因为细胞贴壁不牢，轻度消化就成片下来，看起来就成团了。解决办法一个是吹打用力点，二个换新培养瓶试试，让它贴牢点。另外，MTT要求的是均衡性，每孔细胞数要基本一致就行，并不需要完全单个分离。贴壁细胞想100%吹成单细胞是不太可能的。
细胞传代分装不均匀怎么补救
答：不能那么快再消化，这间隔时间太短会损伤细胞的，只能等稀疏的那个培养皿再长一段时间了，你在操作时得多注意一点
Jurkat细胞培养
答：Jurkat 细胞最好的状态是细胞聚团成一串串葡萄状,细胞呈圆形透亮.。报团的细胞是活细胞。传代培养时，因为jurkat是悬浮细胞，当jurkat细胞密度比较大时，可将培养瓶竖直放置2分钟左右，待大部分细胞沉下，吸走上层清液，补充等量的新鲜培养基。
硬核| 细胞培养笔记
答：对于贴壁细胞，如果细胞形态不好或者细胞形态不清晰，表面似有异物等，可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入 3 ml 新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走。然后再加入 3 ml 的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的...
胰酶消化时间稍长一些，吹散后分瓶时混匀，然后不要老混动细胞
主要原因可能还是细胞质量问题，本身代谢就慢或者脆弱；再一个可能跟培养过程中的维护有关系，细胞密度太低或者太高都会导致细胞凋亡，死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物，这些絮状物在显微镜下看的话就是细胞聚集。
贴壁细胞细胞在培养瓶长成致密单层后，继续生长的空间不足，培养基中的营养成份也消耗较多，同时代谢废物也有较多堆积，需要分瓶培养，对细胞进行传代扩增。对于贴壁不太紧的细胞如293，可以直接吹散后分瓶。而对于贴壁较紧的细胞如CHO，则需要以胰酶消化后再吹散分瓶，一般过程为(以下操作均按无菌操作的要求进行)：将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液弃去;加入0.25%胰酶溶液，视细胞瓶的大小加入体积为0.5ml或更多，以使充分浸润;一般消化时间约为1至3分钟，肉眼观察瓶壁半透明的细胞层，当见到出现细针孔空隙时，弃去胰酶溶液，并加入适量的细胞培养液终止消化;视实验要求分入多瓶继续培养，一般为一传二到一传四的比例。这里，胰酶消化的程度是一个关键：消化过度则对细胞的活性损伤较大，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。影响消化速度的因素较多，主要有胰酶溶液的活性(配制条件、冻存或4℃保存时间长短、是否反复冻融、化冻后存放时间及温度等)、消化时的温度(气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度)以及所加胰酶溶液的多少等。以笔者的经验，以轻吹或加培养液后轻摇可下较好，但对于经验不太充分的实验者而言是较难判断掌握的。
按照课本上的知识，用胰蛋白酶处理可以让细胞分开。
答：对于贴壁不太紧的细胞如293，可以直接吹散后分瓶。而对于贴壁较紧的细胞如CHO，则需要以胰酶消化后再吹散分瓶，一般过程为(以下操作均按无菌操作的要求进行)：将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液弃去;加入0.25%胰酶溶液，视细胞瓶的大小加入体积为0.5ml或更多，以使充分浸润;一般消化时间约为1...
答：面对已经聚团的细胞，我们并非无计可施。通过低密度传代，聚团细胞有望分散。对于珍贵细胞，可以尝试复苏新细胞并处理聚团。对于死细胞聚团，DNase可以分解DNA。对于难以计数的聚团，瑞沃德C100自动细胞计数仪的出现，提供了精准且高效的解决方案，15秒快速计数，聚团细胞分析算法让处理变得简单。探索更多 ...
答：看下培养液颜色，是不是要更换培养液了，做下活性检测，看是不是有污染，细胞是不是死了。细胞和人一样，环境不舒服的时候就会表现出来的，养细胞是个细心活，慢慢来
答：需要将成团细胞吹散，你看看你细胞能不能吹散，用一次性的滴管吹对细胞损伤小店
答：加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你最终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
答：4T1细胞离心后细胞成团怎么办 贴壁细胞细胞在培养瓶长成致密单层后,继续生长的空间不足,培养基中的营养成份也消耗较多,同时代谢废物也有较多堆积,需要分瓶培养,对细胞进行传代扩增.对于贴壁不太紧的细胞如293,可以直接吹散后分瓶.而对于贴壁较紧的细胞如CHO,则需要以胰酶消化后再吹散分瓶,一般过程为(...
答：你是不是长得太多没分瓶啊？消化时细胞成团是因为细胞贴壁不牢，轻度消化就成片下来，看起来就成团了。解决办法一个是吹打用力点，二个换新培养瓶试试，让它贴牢点。另外，MTT要求的是均衡性，每孔细胞数要基本一致就行，并不需要完全单个分离。贴壁细胞想100%吹成单细胞是不太可能的。
答：不能那么快再消化，这间隔时间太短会损伤细胞的，只能等稀疏的那个培养皿再长一段时间了，你在操作时得多注意一点
答：Jurkat 细胞最好的状态是细胞聚团成一串串葡萄状,细胞呈圆形透亮.。报团的细胞是活细胞。传代培养时，因为jurkat是悬浮细胞，当jurkat细胞密度比较大时，可将培养瓶竖直放置2分钟左右，待大部分细胞沉下，吸走上层清液，补充等量的新鲜培养基。
答：对于贴壁细胞，如果细胞形态不好或者细胞形态不清晰，表面似有异物等，可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入 3 ml 新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走。然后再加入 3 ml 的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的...
