简述金黄色葡萄球菌的最低鉴定特征
金黄色葡萄球菌
(staphyloccocus
aureus
rosenbach)
是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（staphylococcus），可引起多种严重感染。
生物学特性
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°c，最适生长ph
7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%nacl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，vp反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
流行病学
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。
致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；
b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；
c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关；
d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；
e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为a、b、c、d、e及f五种血清型。肠毒素可耐受100°c煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
金黄色葡萄球菌的检验
①
金黄色葡萄球菌的检验
样品处理：无菌取25g或25ml食品样品，放入225ml灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。
增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%nacl肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37°c培养24小时。
分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和baird-parker平板，置37°c培养24-48小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。在baird-parker平板上菌落为圆形，直径2-3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。
染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。
血浆凝固酶试验：吸取0.5ml兔血浆与0.5ml金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°c培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。
url]耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-dna平板，36±1°c培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
②
金黄色葡萄球菌肠毒素检测
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法，在此就不一一赘述。
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
在形态及表征上直接鉴定：该菌是革兰氏阳性球菌，细胞排列呈葡萄状，无芽孢，无荚膜。进一步：
首先把挑取菌落于甘露醇生化管,37度,过夜,观察结果,变色为阳性,进一步做凝固酶试验,可以分为两种方法,一个是玻璃片法,一个是试管法该菌是兼性厌氧.鉴定很简单,随便一本微生物检验的书都有.
下面是参考。
金黄色葡萄球菌在形态及表征上直接鉴定就可以了,有一些材料,希望对楼主有帮助,
首先，该菌是革兰氏阳性球菌，细胞排列呈葡萄状，无芽孢，无荚膜。
其次，在肉汤培养基中金黄色葡萄球菌呈混浊生长，在胰酪胨大豆肉汤培养基中有时液体澄清，当菌量多时则呈混浊生长。在血平板菌落上生长时呈金黄色，也有时呈白色，菌落大而突起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。
再次，该菌在Baird-Parker平板上生长时菌落为圆形、光滑凸起、湿润、直径2-3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。
长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。(这一点希望能对楼主的鉴定工作有帮助)
Baird－Parker氏培养基.doc (24.0k)
还有一些生理生化的指标,比如血浆凝固酶试验。
挑取菌落接种于肉浸液肉汤，在37度温箱培养24小时后进行血浆凝固酶试验。 该实验的大致步骤是：吸取新鲜兔血浆（1：4），放入小试管中，再加入培养24小时的金黄色葡萄球菌菌液，振荡摇匀，放在36度水浴内，每半小时观察一次，观察6小时，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者）被认为是阳性结果，结合上面的形态等特征，即可以初步断定你的菌是不是金黄色葡萄球菌。
更为详细的实验步骤请楼主查阅有关书籍，比如实验时样品和试剂的加量等细节。
如果你做的是微生物限度方面的，参考《中华人民共和国药典》2005年版二部附录XI J。
金黄色葡萄球菌：取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2），直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的亚碲酸钠（钾）肉汤（或营养肉汤）培养基中，培养18—24小时，必要时可延长至48小时。取上述培养物，划线接种于卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上，培养24—72小时。若平板上无菌落生长或生长的菌落不同于表5所列特征，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。
若平板上生长的菌落与表5所列的菌落特征相符或疑似，应挑选2—3个菌落，分别接种于营养琼脂培养基斜面上，培养18—24小时。取营养琼脂培养基的培养物进行革兰染色，并
接种于营养肉汤培养基中，培养18—24小时，作血浆凝固酶试验。
表5 金黄色葡萄球菌
培养基 菌落形态
甘露醇氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有黄色环，菌落直径0.7—1mm
卵黄氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有卵磷脂分解的乳浊圈，菌落直径1—2mm
血浆凝固酶试验：取灭菌小试管3支，各加入血浆和无菌水混合液（1：1）0.5ml，再分别加入可疑菌株的营养肉汤培养物（或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液）0.5ml、金黄色葡萄球菌营养肉汤培养物（或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液）0.5ml，即为试验管、阳性对照管和阴性对照管。将3管同时培养，3小时后开始观察直至24小时。阴性对照管的血浆应流动自如，阳性对照管血浆应凝固，若试验管血浆凝固者为血浆凝固酶试验阳性，否则为阴性。如阳性对照管或阴性对照管不符合规定时，应加制备血浆，重新试验。
若上述疑似菌为非革兰阳性球菌、血浆凝固酶试验阴性，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。
我也正在做金黄色葡萄球菌的鉴定,因为我的样品比较多,所以我只检测两项指标.
首先把挑取菌落于甘露醇生化管,37度,过夜,观察结果,变色为阳性,进一步做凝固酶试验,可以分为两种方法,一个是玻璃片法,一个是试管法,楼上几位都有说过具体的方法了，我就不在罗嗦了,希望对你有帮助.
非常谢谢上面的大侠指点,获益匪浅啊!
另外,我想问问如果金葡菌在BHI琼脂平板上并以专性厌氧的环境下生长,能生长吗?其表明形态特征是否有所不同?
谢谢!!!
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。
血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。
耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，36±1°C培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
希望这些对你有一些帮助。
答：金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物...
答：1、形态染色鉴别：革兰阳性球菌，葡萄串状排列。2、菌落特征鉴别：在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环。3、鉴定试验鉴别：甘露醇发酵试验阳性，血浆凝固酶试验阳性，触酶阳性球菌，耐热核酸试验酶阳性，新生霉素试验敏感。
答：鉴定金黄色葡萄球菌的依据是形态染色、菌落特征、鉴定试验。1、菌落特征，金黄色葡萄球菌为圆形光滑较小菌落，直径一般只有1mm左右，白色或金黄色，菌落周围有透明溶血环。2、形态染色，革兰阳性球菌，葡萄串状排列。3、鉴定试验，凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳。
答：鉴定金黄色葡萄球菌的依据是触酶阳性、血浆凝固酶阳性、新生霉素敏感、甘露醇发酵试验阳性。
答：S. aureus)也称“金葡菌”，隶属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌代表，为一种常见的食源性致病微生物。该菌最适宜生长温度为37℃，pH为7.4，耐高盐，可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中，空气、污水等环境中也无处不在。
答：金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直径为2mm～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈见图[4]。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色...
答：（1）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的，与其致病力有关的一种侵袭性酶，其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上，能直接作用于血浆中的纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，环绕菌体而形成凝块...
答：形态染色、菌落特征。根据查询金黄色葡萄球菌鉴定方法得知，金黄色葡萄球菌鉴定方法主要有：形态染色、菌落特征、鉴定试验等鉴定。金黄色葡萄球菌是一种常见的病原体，可引起皮肤软组织感染。
答：b吧
