分区划线接种细菌,一区二区没长出菌,三区四区却长出来了,这是怎么回事啊?求高手指教,急急急~

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-25
细菌划线分离法有哪几种划线方式,划线时应注意什么

用的是四区划线法或五区划线法
划线的形式有多种,可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小,作为待分离菌的菌源区,第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区,第四区(D区),则是关键区,使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用.为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D>C>B>A.
顺便说一下,划线划得好看不好看并不重要,只要分离效果好就行,每个人都可以有自己理想的划线方法,但最关键的依然是效果.此外大致判断接种环上的菌量也是日常积累的经验之一,判断得好就能将细菌分离得更好.

注意事项
1、平板不能倒得太薄,最好在使用前一天倒好。为防止平板表面产生冷凝水,倒平板前培养基温度不能太高。
2、用于平板划线的培养基,琼脂含量宜高些(2%左右),否则会因平板太软而被划破。 3、用于划线的接种环,环柄宜长些(约10cm),环口应十分圆滑,划线时环口与平板间的夹角宜小些,动作要轻巧,以防划破平板。
4、为了取得良好的划线效果,可事先用圆纸垫在空培养皿内画上4区,并用接种环练习划线动作,待通过模拟试验熟练操作和掌握划线要领后,再正式进行平板划线。

分区划线的目的在于分离出样品中各种复杂细菌的单个菌落,只有分离出来单个菌落,才能进行后续的试验或研究。
但是在一般情况下,一区的菌落总是混杂着生长在一起的,所以一区并不需要反复划线,而是使用接种环在一区带出一些细菌,并逐渐分区划线,直至分离出单个菌落。

第一,仔细回忆一下你的操作流程是否规范,是否按照规定的步骤进行操作,避免在不知不觉中出现外来菌污染现象。
第二,观察三区四区的菌落,观察它们的湿润程度,边缘是否规则,菌落颜色与厚度,与期望接种的细菌是否相同。
第三,挑取部分菌体涂片、染色并镜下观察细菌形态,进一步确认是否为目标菌体。
第四,这是我的个人经验与假设,你的一区二区划线太密,每个菌落所占空间及资源极其有限,以致长出的菌落很小,肉眼不可见,你可以挑取部分制成涂片,镜下观察,验证假设。

应该是污染的吧。或者是你的接种环先接触到三区四区,菌种都落在那里了,导致一区二区没有菌。

如果你的恶操作手法正确的话,很肯定的告诉你,你的实验极有可能是失败的,根据我的经验,一区二区不长菌,在其他区域长的话,那就不是目标菌,你看看三区四区长的菌,基本上都不在你划得线上。哈哈,希望对你有帮助,建议你将要接种的菌种先液体摇菌,活化后重新划线,有的菌放置斜面上3个月就死掉了。

长出来的菌是以你划线的路线长的吗?有没有越长越少呢?都不是的话应该是染菌了。。

  • 分区划线接种细菌,一区二区没长出菌,三区四区却长出来了,这是怎么回...
    答:第三,挑取部分菌体涂片、染色并镜下观察细菌形态,进一步确认是否为目标菌体。第四,这是我的个人经验与假设,你的一区二区划线太密,每个菌落所占空间及资源极其有限,以致长出的菌落很小,肉眼不可见,你可以挑取部分制成涂片,镜下观察,验证假设。
  • 混合菌液平板分区划线接种法,经培养后只有一种菌落,为什么
    答:因为在划线时,会灼烧接种杯,以杀灭接种环上尚残余的菌液。平板划线分离法是接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到分离微生物的一种方法。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的。由接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线...
  • 微生物的培养方法
    答:关于微生物的培养方法如下:接种与分离方法。
  • 生物中接种方法→平板划线法要注意什么
    答:(1)要注意全程无菌操作;(2)滑动时用力要均匀,切勿将接种环嵌入培养基内;(3)平板应较硬、较厚、表面干燥;(4)需要分区的时候,划完一个区后必须烧去接种环上的残菌,待冷却后再划另一个区;(5)划线的线条宜平行、密集、整齐。接种是食用菌生产中的关键环节之一,如果接种技术不过关,...
  • 分区划线的步骤和注意事项
    答:划线操作:(1) 挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。(2) 划A区:将平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上,仍留在煤气灯旁),右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的...
  • 分区划线法的操作过程
    答:分区划线法的操作过程如下:四区划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。四区划线分离法原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“...
  • 请问平板划线微生物中不能得到单一菌种的原因是什么?得到的单一菌种是不...
    答:应该是稀释的程度不够吧,这样划线时候菌种就过多分离不开,还有就是划线没划好,长在一起了不能形成单一菌种。一般菌落就是由单个细菌长成的。得到单一菌种是指最后配银行形成的菌落只有一种? 那应该就是纯种微生物了。
  • 微生物划线分离原则及要点
    答:三段画线法:先将菌液滴在原始区,然后用酒精灯为白金耳消毒,用白金耳沾取原始区菌液轻轻左右刮拭,涂抹至整个平板的二分之一,为一区,然后将平板旋转90度,用酒精灯为白金耳消毒,沾取一区的菌液用白金耳轻轻左右刮拭,至剩余的二分之一(即整个平板的四分之一),为二区,然后将平板旋转90...
  • 生物中接种方法平板划线法要注意什么
    答:划线法要注意全程无菌操作,接种环尽量避免划破平板。需要分区的时候换区从前一区引出一条线来,各区之间线的尾部不能交叉。还有就是平板表面不能有太多水,避免菌被水带到其他区域。
  • 细菌平板分区划线时,为何在每区之间要将接种环上的剩余细菌烧掉
    答:烧掉接种环上剩余的菌:1、为了保证下个区域的细菌量较少,更容易在培养后得到单一菌落;2、防止接种环在上次划线时被其它细菌污染而影响下一个区域;3、保证了无菌操作。这题与微生物实验有关,主要考察划线平板的知识。