HELA细胞复苏技巧步骤、培养基、缓冲液？
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-28
今天做实验，传HELA细胞，手上有伤口，把有细胞的培养基滴在上面了。 会长肿瘤吗？
2.培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶恒温水浴箱37度预热20min，备用。
3.从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入40度水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化
4.将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min），有必要再弃上清，加培养液，再离心一次，把二甲基亚砜洗掉。
5.用培养液悬液混悬沉淀细胞，调整细胞浓度，方培养箱中培养。
6.记录复苏日期
一般动物细胞体外培养都用DMEM（含10%的小牛血清），冲洗细胞用PBS缓冲液，不会使细胞涨破。
HELA这么皮实的细胞 怎么折腾都没事的。。。
HELA细胞复苏技巧步骤、培养基、缓冲液?
答：1.细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。2.培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶恒温水浴箱37度预热20min，备用。3.从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入40度水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化 4.将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min），有必要再弃上清，加...
请教Hela细胞培养用什么培养基最好
答：我一般都是用10％1640，0.25％胰酶消化，时间大概是3——5分钟，这些你都可以自己摸索，在镜下观察或者用滴管吹大一下，做几次就知道了。细胞长得比较快，大概2天就可以传一次代，我一般都是一传三，最多3天传一次。细胞长满了就可以传了，（转载，仅供参考）...
【Hela】人宫颈癌细胞
答：传代过程需谨慎进行，遵循1:4的比例，消化细胞只需2-3分钟，每2-3天更换一次培养液，让细胞保持活力。根据文献记载，HeLa细胞的倍增时间大约为1.3天（PubMed:29156801)，或者在DSMZ数据库中显示为48小时。</在冷冻保存时，采用的是完全培养基加上5%的DMSO冻存液配方。尽管拥有这些特性，操作HeLa细胞...
传代细胞的培养步骤
答：（1）吸掉旧培养液。（2）用D-PBS洗涤细胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，则在trypsin-EDTA作用后，加入适量含血清之新鲜培养基终止trypsin作用，...
TCID50的具体步骤是什么啊?
答：实验方法和步骤 1、单层细胞制备 Hela细胞于青瓶中37℃培养24h，待生成单层后备用。2、病毒液稀释 病毒液作10倍稀释，先将稀释液分装于10个试管中，每管0.9ml，取0.1ml病毒悬液加入第一管中，摇匀后为10-1，换一支吸管，在10-1病毒液中吸放3～4次，取0.1ml放入第二管中摇匀后为10-2......
如何防止细胞培养出现污染
答：防止细胞培养出现污染的方法如下：1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以...
海勒细胞培养需要血清吗
答：激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他营养物质。使用血清的优点是血清含有促进细胞增殖和维持的大部分因子，它几乎是通用的生长添加物，适用于动物、人和昆虫细胞等的细胞培养。因而使用血清不需要为每一个细胞系优化培养基，节省了大量时间和精力。
细胞培养技术必备小知识,新手必看
答：在开始细胞培养之前，先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足，以免在开始实验后再次出入操作台，这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热，选择只预热部分培养基而非整瓶加热，不但可以节约实验时间，而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。结束操作后，需尽可能避光保存。02 细胞培养的...
Hela细胞做转染后 怎样从其中挑出单个的细胞 然后培养得到该细胞的细...
答：如果是这样的话，你可以将转化后的细胞铺于培养皿培养，初始密度在50%以下，然后进行筛选，等阴性细胞死亡以后，换完全培养基培养，此处用的培养基比较特殊，是这样得到的：培养原有的hela细胞，使其密度为70%，培养过夜取此培养基，0.22um过滤与新鲜培养基1:1混合。因为细胞筛选过后，阳性细胞极少，...
hela细胞siRNA转染条件?包括密度,siRNA以及转染试剂用量比例,详细一些...
答：SIRNA做过hela细胞的转染,用的24孔培养板，将siRNA 稀释液与试剂稀释液混合，细胞铺板密度在45%左右。 设置siRNA浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度最好做2个复孔，转染前一天铺板，稀释siRNA和转染试剂的培养基必须是无血清培养基，血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，影响转染效率 ...
你既然在做与HELA细胞有关的实验，应该有相关的肿瘤知识啊。肿瘤细胞要种植到另一个体是很困难的，我们常用的是使用有免疫缺陷的动物比如裸鼠或者经过放射后摧毁其免疫系统，所以正常人是不会被种植肿瘤的。
应该是用于观察溶液酸碱度的吧。做实验室一般过酸或过碱可能会杀死细胞，这时则需要更换培养基或缓冲溶液。
1.细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。2.培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶恒温水浴箱37度预热20min，备用。
3.从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入40度水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化
4.将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min），有必要再弃上清，加培养液，再离心一次，把二甲基亚砜洗掉。
5.用培养液悬液混悬沉淀细胞，调整细胞浓度，方培养箱中培养。
6.记录复苏日期
一般动物细胞体外培养都用DMEM（含10%的小牛血清），冲洗细胞用PBS缓冲液，不会使细胞涨破。
HELA这么皮实的细胞 怎么折腾都没事的。。。
答：1.细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。2.培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶恒温水浴箱37度预热20min，备用。3.从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入40度水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化 4.将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min），有必要再弃上清，加...
答：我一般都是用10％1640，0.25％胰酶消化，时间大概是3——5分钟，这些你都可以自己摸索，在镜下观察或者用滴管吹大一下，做几次就知道了。细胞长得比较快，大概2天就可以传一次代，我一般都是一传三，最多3天传一次。细胞长满了就可以传了，（转载，仅供参考）...
答：传代过程需谨慎进行，遵循1:4的比例，消化细胞只需2-3分钟，每2-3天更换一次培养液，让细胞保持活力。根据文献记载，HeLa细胞的倍增时间大约为1.3天（PubMed:29156801)，或者在DSMZ数据库中显示为48小时。</在冷冻保存时，采用的是完全培养基加上5%的DMSO冻存液配方。尽管拥有这些特性，操作HeLa细胞...
答：（1）吸掉旧培养液。（2）用D-PBS洗涤细胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，则在trypsin-EDTA作用后，加入适量含血清之新鲜培养基终止trypsin作用，...
答：实验方法和步骤 1、单层细胞制备 Hela细胞于青瓶中37℃培养24h，待生成单层后备用。2、病毒液稀释 病毒液作10倍稀释，先将稀释液分装于10个试管中，每管0.9ml，取0.1ml病毒悬液加入第一管中，摇匀后为10-1，换一支吸管，在10-1病毒液中吸放3～4次，取0.1ml放入第二管中摇匀后为10-2......
答：防止细胞培养出现污染的方法如下：1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以...
答：激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他营养物质。使用血清的优点是血清含有促进细胞增殖和维持的大部分因子，它几乎是通用的生长添加物，适用于动物、人和昆虫细胞等的细胞培养。因而使用血清不需要为每一个细胞系优化培养基，节省了大量时间和精力。
答：在开始细胞培养之前，先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足，以免在开始实验后再次出入操作台，这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热，选择只预热部分培养基而非整瓶加热，不但可以节约实验时间，而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。结束操作后，需尽可能避光保存。02 细胞培养的...
答：如果是这样的话，你可以将转化后的细胞铺于培养皿培养，初始密度在50%以下，然后进行筛选，等阴性细胞死亡以后，换完全培养基培养，此处用的培养基比较特殊，是这样得到的：培养原有的hela细胞，使其密度为70%，培养过夜取此培养基，0.22um过滤与新鲜培养基1:1混合。因为细胞筛选过后，阳性细胞极少，...
答：SIRNA做过hela细胞的转染,用的24孔培养板，将siRNA 稀释液与试剂稀释液混合，细胞铺板密度在45%左右。 设置siRNA浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度最好做2个复孔，转染前一天铺板，稀释siRNA和转染试剂的培养基必须是无血清培养基，血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，影响转染效率 ...
