如何检测RNA提取成功或如何检测RNA的完整性
跟琼指糖凝胶电泳，有28S和18S的带，就说明提取成功，如果28S和带比18S的带亮2倍，并且后面没有拖带，说明没被降解，完整性好
对少量样品进行琼脂糖凝胶变性电泳，样品应有清晰完整条带，无弥散。不同物种总RNA条带不同，在网上可以查到相关对照。另外，个别物种如某些昆虫，提取方法不同，RNA完整性亦不同。
具体方法，一般情况下取0.5ugRNA样品，补水至总体积约3~10ul，以4、5uL为佳。加入适量loading buffer及EB（或其他染色剂）混合。按照RNA样品种类不同配置1.3%~1.7%浓度的琼脂糖凝胶。缓冲液配方网上可查。进行电泳。并在紫外灯下观察条带。
全程保证无RNA酶环境，且越长的RNA分子越容易降解，可依次判断您的总RNA样品完整性。
检测RNA的完整性的方法：
完整的总RNA在进行变性凝胶电泳时会产生清晰的28S和18S rRNA条带（真核样品）。28S rRNA条带的强度应当大致为18S rRNA条带的两倍。这种2:1的比率（28S：18S）是判断RNA完整性的一个很好的指标。
使用变性凝胶电泳来评估RNA完整性的一个缺陷是观察所需的RNA样品量。通常情况下，需要在变性凝胶中上样至少200 ng的RNA才能在EtBr染色下进行观察。而在某些RNA制备实验中，如从穿刺活检样品或激光捕获显微切割样品中提取RNA，得率是非常低的。这种情况下，或许就不可能在进行表达谱分析实验前取出200ng的RNA来评估其完整性。其它的核酸染料，比如Moleculor Probes (Eugene, OR) 的SYBR® Gold及SYBR Green II RNA染料，相比传统的琼脂糖凝胶电泳EtBr染色方法可以显著提高灵敏度。通过使用300nm的透射光源（6 x 15瓦的灯泡）及特殊的滤光片，SYBR Gold RNA凝胶染色可以检测到低至1ng的RNA，而SYBR Green II则可以检测到2ng，从而可以使用更少的样品来进行RNA完整性分析。
目前有一种快速简单的方法可以替代传统的凝胶分析方法，这种方法可以同时对RNA样品进行定量及质量评估。Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies)是第一款商业化的提供RNA样品状态细节信息的微流体仪器。当与RNA 6000 LabChip®（Caliper Technologies Corporation所拥有的一个注册商标）结合使用时，每次进行分析最低仅需1µl浓度为10 ng/µl 的样品。除了评估RNA完整性，这台自动化系统同样可以提供样品RNA浓度及纯度（如mRNA制备中的rRNA污染）的评估。在过去，检测浓度及纯度需要使用部分RNA样品（通过A260分光光度法），而评估完整性则需要另外使用部分样品。通过使用LabChip®系统，可以仅使用一份5ng的样品来同时对浓度、完整性及纯度进行分析。分析数据可以显示为类凝胶图像、电泳峰图及表格形式等。
跟琼指糖凝胶电泳，有28S和18S的带，就说明提取成功，如果28S和带比18S的带亮2倍，并且后面没有拖带，说明没被降解，完整性好
答：当R<1.8时，溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显，你可以根据自己的需要决定这份RNA的命运。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。生物帮有相关方面的介绍， http://www.bio1000.com/zt/cell/221848.html 细胞周期,细胞周期蛋白,检测步骤方法,结果分析,细胞周期调控点,细胞周期的调控机制,...
答：RNA胶（凝胶成像）检测。例如：原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是：结合了蛋白的RNA在凝胶中的迁移速率更慢，因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。RNA-seq即转录组测序技术，把mRNA...
答：1、RNA胶（凝胶成像）检测。例如：原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。2、凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是：结合了蛋白的RNA在凝胶中的迁移速率更慢，因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。3、RNA-seq即转录组测序技...
答：RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水...
答：对于RNA纯度的评估，可以通过紫外分光光度法检测样品吸光值A260/A280及A260/A230的比值反映RNA纯度，纯RNA理论值为A260/A280=2.0，A260/A280比值低于1.7表明存在蛋白质污染，A260/A280大于2.0表明有异硫氰酸污染，A260/A230比值通常在2.0-2.2，A260/A230小于2.0表明有酚盐、硫氰酸盐或其他...
答：1、提取组织或细胞总RNA后，除去占大部分的rRNA和tRNA，剩下编码RNA 和非编码RNA 2、对这些RNA进行测序，理想情况下，是直接检测，但是不现实，只有通过碱基互补配对的合成过程，才能知道原来样品中模板的序列，但是这个合成的长度是有限制的，所以只能先把这些RNA切割成小片段，再检测这些小片段的序列。...
答：RNA提取步骤及注意事项（仅供参考）：实验步骤如下：1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上)。2.将匀浆室温放置5min。3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s，冰上静置3min。4.12000rpm，4℃离心15min。5.将上清液小心转移到新的1.5ml离心管中（取400μl），加入...
答：当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。2）RNA的电泳图谱 一般的，RNA的电泳都是用变性胶进行的，但是根据我的经验，如果你仅仅是为了检测RNA的质量是没有必要进行如此麻烦的实验的，用普通的琼脂糖胶就可以了。电泳的目的是在于检测28S和18S条带的完整性和他们的比值，或者是mRNA smear的完整性。
答：1、掌握酵母RNA提取的方法。2、了解核酸的组成。3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作。二、实验原理 酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%。RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到RNA制品。但是用碱液提取的RNA有不同的降解。RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分，加入硫酸...
答：1.RNA的提取RNA的提取其实原理很简单:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。1.1 分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且...
